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标题: 请教一个荧光定量PCR的问题 [打印本页]

作者: ind6562 时间: 2013-5-29 15:02 标题: 请教一个荧光定量PCR的问题

各位大侠，大家做荧光定量PCR后得到的扩增产物还需要跑电泳吗？如果跑，目的是什么，能定性地分析基因表达量的变化吗？

作者: DNAngle_RNA 时间: 2013-5-30 09:47

可以跑电泳，但是一般来讲qPCR的扩增产物都不到200bp，条带太小，没必要去跑，除非你对自己定量的结果很怀疑……

作者: 86964109 时间: 2013-5-31 08:14

结果不理想时作为验证吧

作者: yangcy-smile 时间: 2013-5-31 09:46

回复 ind6562 的帖子% P( W3 T2 J9 r9 ]8 b8 h" w
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跑电泳只是个参考，差不多属于半定量，跟你算出来的结果不一定一致。因为倍增是根据CT值算出来的，是个起始值。pcr到最后差不多都到达了一个平台期，跑出来的条带其实有时候差别不明显，除非有表达和不表达的。假如设置的循环数比较少，在到达平台期之前收集的PCR产物，定量则有一定参考价值。

作者: 461650833 时间: 2013-6-4 14:58

一般都不跑
不过最后先放负二十冰箱，等分析完数据，再做处理。

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