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标题: 求教胎盘干细胞传代时酶消化的程度 [打印本页]

作者: chenzhengliang 时间: 2013-5-29 15:43 标题: 求教胎盘干细胞传代时酶消化的程度

各位大神，请问下胎盘干细胞做传代培养时，加入胰酶消化，大概什么程度多长时间可以加血清培养基终止啊，消化5min后显微镜下看到细胞变圆，变小，是不是这时就可以终止消化了？

作者: 452359357 时间: 2013-5-29 16:56

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是的把胎盘组织剪碎 37℃消化随时注意镜下观察当细胞开始变圆有少部分脱落时加血清终止消化稍微振荡过滤观察细胞是否大部分脱落必要时重复消化一次离心收集细胞

作者: wf78365421 时间: 2013-8-21 16:48

回复 chenzhengliang 的帖子: d2 B" X& ~& i3 ^
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你用0.25%胰酶？如果是0.25%胰酶，用不了1分钟就可以终止。( Z6 z( O% V, K# y8 B6 I6 V W7 U
如果用0.125%胰酶，可能需要5分钟。
消化时在镜下观察，细胞皱缩，轻轻一拍，细胞脱落，即可终止消化。

作者: piano尤尤 时间: 2013-8-23 13:09

我用的商品化0.25%胰酶 1min 最多1分半
只要细胞稍微变化没有那么铺展就终止
对于各种间充质我都是这么处理* f- H% n' R; Y _
不然传代后贴壁下来状态很差

作者: wangbo19880315 时间: 2013-8-23 17:04

在显微镜下观察到细胞之间分开就可以了，终止消化过程要快，要按照加胰酶的先后顺序终止消化！不然会导致消化不均一！

作者: 孙帅帅 时间: 2013-8-26 15:39

我们用的0.05%的胰酶，37℃消化一分钟就可以了啊~~

作者: 枫之叶影 时间: 2013-10-8 17:11

我们用0.125%的消化4分钟能脱落80%到90%，吹打下就OK了

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