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标题: 每10ml血你能提多少PBMC [打印本页]

作者: easternliu 时间: 2013-5-30 09:46 标题: 每10ml血你能提多少PBMC

我一般40ml血提1.5-3.7*10^7的PBMC，听说别人每10ml能提1*10^7，大家一般能提多少哇

作者: fengxiwu 时间: 2013-5-30 11:01

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我做的是白血病实验，需要分离骨髓单个核细胞（BMNC)，梯度离心进行了不下20次。5 \4 [+ Z* j5 O4 B0 P; T, ^
非白血病人的骨髓1-2ml分离的BMNC不超过10*7，而白血病人的骨髓1-2ml最多可以分离10*8到10*9 BMNC，治疗后的分离细胞数量同非白血病人样本.: k& o8 F/ ~+ K' O2 D
外周血的梯度离心也做过几次，7ml血液大都分离MNC 3-5×10*6左右。（非白血病）
外周血同骨髓相比MNC密度几乎差一个数量级。

作者: meister 时间: 2013-5-30 11:21

一般1*10，6次方/ml

作者: meister 时间: 2013-5-30 11:21

一直很少的话，是分离方法有问题。偶尔少是样本的问题。

作者: easternliu 时间: 2013-5-30 14:50

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做了不少了，一直没这么大的量分离出来，10^6/ml这个量只有才做过一次脐血时接近。求教，分离哪些不易注意的细节，感激不尽

作者: fengxiwu 时间: 2013-6-3 13:00

回复 easternliu 的帖子9 A3 F0 V& I# F# Z, E

样本可能有个体差异，因为血液中的细胞比例是动态变化的，分离的单个核细胞包括了单核细胞和淋巴细胞，也只能是分离到其中的一部分，回收率不可能达到100%，如果按50%算的话，你看你能分离多少，而且，分离之后的洗涤离心也是会损失一点的。

作者: easternliu 时间: 2013-6-3 13:10

回复 fengxiwu 的帖子3 P( P9 ~, K/ I& x7 x

做得不多，所以有些细节还不是很清楚

作者: xiaostou 时间: 2013-6-3 17:16

ficoll对细胞数得到多少很关键，选进口的吧

作者: fengxiwu 时间: 2013-6-3 22:04

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国产的物美价廉，淋巴细胞分离液没有什么高科技的东西吧，不就是个密度梯度离心吗，为什么一想到的试剂都是国外进口的呢。细胞因子，荧光抗体，国内的如果质量上不去，他怎么提高销量，本来就够便宜的了，如果不提高销售量，哪里来的利润？我们中国人都不支持自己的产品，还奢望他人的支持吗？要让别人尊重我们，我们自己首先要尊重自己！

作者: meister 时间: 2013-6-4 13:07

本帖最后由 meister 于 2013-6-4 13:08 编辑 # ~# W$ s$ U3 ?& X/ X3 O. a' T+ M
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国产的我试过了，不稳定，效果比进口的差不少。有时低40-50%

作者: sunny.yc 时间: 2013-6-15 11:38

回复 easternliu 的帖子, D: m( |- l. |0 ^" b7 p+ j
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分离方法很重要，样品来源、甚至计数方法同样也很重要，都要考虑在内，否则可能会钻到牛角尖里的

作者: meister 时间: 2013-7-18 15:36

回复 easternliu 的帖子8 F, f4 E3 g2 n4 [- s* F; O

一般1ml，0.5-2*10的6次方。个体差异很大。

作者: easternliu 时间: 2013-7-19 13:32

回复 meister 的帖子: X! V. G) ]- |8 i5 V: ~

嗯嗯，差不多，谢谢你

作者: wenwen1228 时间: 2013-9-4 23:11

不同的标本细胞数也不同。还跟标本采集时间和分血时间间隔长短有关。一般每10毫升分1×10*6到1×10*7不等。

作者: forwain 时间: 2017-5-8 12:35

请教各位，有朋友说他在国外都是购买PBMC来进行实验的，国内有这类提供PBMC产品的公司吗

作者: 细胞海洋 时间: 2017-5-8 13:59

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作者: 金鹏 时间: 2017-5-10 09:06

我一般50ml血，正常情况下分出来的PBMC也就在5×10^7~1×10^8上下

作者: zmfang555 时间: 2017-5-24 08:33

外周血的来源是关键，健康人血液一般不少于1x10 6/ml, 患者的外周血质量参差不齐，并不一定都符合FICOLL分离的最佳密度，特别是血液病患者，相当一部分都分离失败的。

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