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每10ml血你能提多少PBMC
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作者:
easternliu
时间:
2013-5-30 09:46
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每10ml血你能提多少PBMC
我一般40ml血提1.5-3.7*10^7的PBMC，听说别人每10ml能提1*10^7，大家一般能提多少哇
作者:
fengxiwu
时间:
2013-5-30 11:01
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easternliu
的帖子
! O b! t0 k& {2 y0 O
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我做的是白血病实验，需要分离骨髓单个核细胞（BMNC)，梯度离心进行了不下20次。
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非白血病人的骨髓1-2ml分离的BMNC不超过10*7，而白血病人的骨髓1-2ml最多可以分离10*8到10*9 BMNC，治疗后的分离细胞数量同非白血病人样本.
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外周血的梯度离心也做过几次，7ml血液大都分离MNC 3-5×10*6左右。（非白血病）
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外周血同骨髓相比MNC密度几乎差一个数量级。
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作者:
meister
时间:
2013-5-30 11:21
一般1*10，6次方/ml
作者:
meister
时间:
2013-5-30 11:21
一直很少的话，是分离方法有问题。偶尔少是样本的问题。
作者:
easternliu
时间:
2013-5-30 14:50
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meister
的帖子
: g& q- J+ u9 ]! w" `. `
& q, `; F" H. S
做了不少了，一直没这么大的量分离出来，10^6/ml这个量只有才做过一次脐血时接近。求教，分离哪些不易注意的细节，感激不尽
作者:
fengxiwu
时间:
2013-6-3 13:00
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easternliu
的帖子
" `2 I" y8 N: P( G5 ~' R
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样本可能有个体差异，因为血液中的细胞比例是动态变化的，分离的单个核细胞包括了单核细胞和淋巴细胞，也只能是分离到其中的一部分，回收率不可能达到100%，如果按50%算的话，你看你能分离多少，而且，分离之后的洗涤离心也是会损失一点的。
作者:
easternliu
时间:
2013-6-3 13:10
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fengxiwu
的帖子
P4 k- O' F8 P0 g2 K# V3 L
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做得不多，所以有些细节还不是很清楚
作者:
xiaostou
时间:
2013-6-3 17:16
ficoll对细胞数得到多少很关键，选进口的吧
作者:
fengxiwu
时间:
2013-6-3 22:04
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xiaostou
的帖子
! ]( Y: a& h/ Q: X
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国产的物美价廉，淋巴细胞分离液没有什么高科技的东西吧，不就是个密度梯度离心吗，为什么一想到的试剂都是国外进口的呢。细胞因子，荧光抗体，国内的如果质量上不去，他怎么提高销量，本来就够便宜的了，如果不提高销售量，哪里来的利润？我们中国人都不支持自己的产品，还奢望他人 的支持吗？要让别人尊重我们，我们自己首先要尊重自己！
作者:
meister
时间:
2013-6-4 13:07
本帖最后由 meister 于 2013-6-4 13:08 编辑
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fengxiwu
的帖子
+ s1 U4 i2 d$ r2 h; a; v9 T1 G" z! ~
. X+ w, i3 w" u0 _3 R; w$ o( \. ?
国产的我试过了， 不稳定，效果比进口的差不少。有时低40-50%
作者:
sunny.yc
时间:
2013-6-15 11:38
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easternliu
的帖子
7 a, q% q7 r) ?' m; {
& ~$ ]$ Q' ?+ K
分离方法很重要，样品来源、甚至计数方法同样也很重要，都要考虑在内，否则可能会钻到牛角尖里的
作者:
meister
时间:
2013-7-18 15:36
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easternliu
的帖子
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& C' e3 r$ F7 Z# K3 j; \& C
一般1ml，0.5-2*10的6次方。 个体差异很大。
作者:
easternliu
时间:
2013-7-19 13:32
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meister
的帖子
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2 f E% w' k) t1 y/ ]9 K; Y$ c' ?
嗯嗯，差不多，谢谢你
作者:
wenwen1228
时间:
2013-9-4 23:11
不同的标本细胞数也不同。还跟标本采集时间和分血时间间隔长短有关。一般每10毫升分1×10*6到1×10*7不等。
作者:
forwain
时间:
2017-5-8 12:35
请教各位，有朋友说他在国外都是购买PBMC来进行实验的，国内有这类提供PBMC产品的公司吗
作者:
细胞海洋
时间:
2017-5-8 13:59
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forwain
的帖子
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作者:
金鹏
时间:
2017-5-10 09:06
我一般50ml血，正常情况下分出来的PBMC也就在5×10^7~1×10^8上下
作者:
zmfang555
时间:
2017-5-24 08:33
外周血的来源是关键，健康人血液一般不少于1x10 6/ml, 患者的外周血质量参差不齐，并不一定都符合FICOLL分离的最佳密度，特别是血液病患者，相当一部分都分离失败的。
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