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标题: 细胞每离心一次会损失百分之多少的细胞 [打印本页]

作者: 永远的伊凡 时间: 2013-5-30 15:41 标题: 细胞每离心一次会损失百分之多少的细胞

细胞每离心一次会损失百分之多少的细胞，有人做过实验吗

作者: wf78365421 时间: 2013-5-30 16:27

每次离心损失10%以上，

作者: sdwzg119 时间: 2013-5-30 16:38

这个不一定吧，各个细胞都不同，需要做研究，离心力大了细胞会有损伤，小了会有部分细胞损失掉，所以要通过实验确定离心机转速呀！转速不是通过拍脑袋决定滴~

作者: 三月桂花香 时间: 2013-5-30 17:29

我们一般是1000R，5分钟离心、

作者: jiaozi 时间: 2013-5-30 18:37

每个离心机转子直径不同，因而要用离心力来表示，用转速不可比

作者: sdzysp 时间: 2013-5-31 08:33

我们通常是200g，8min离心，细胞损失不大

作者: s02260441 时间: 2013-5-31 09:15

我个人是操作300g，5分钟0 s( U/ r1 j; k
基本上500g以内，时间不要超过10分钟都不会有太大损失

作者: zh116z 时间: 2013-5-31 10:52

我们是1400r 5min哦细胞损失不大

作者: sunny.yc 时间: 2013-6-3 14:26

回复永远的伊凡的帖子

离心有两部分损失，一种是机械损伤细胞造成的损失，第二种就是离心后上清液中有悬浮细胞损失0 n2 L' \5 \) K8 ~

我教你一个方法你可以试一下( J9 z& Y2 F# q8 t( T8 B2 _/ e
/ B5 y1 S( A$ U8 B O: y
离心前，计数同时计算活率- n) D2 M+ X5 L2 D% {8 M5 s
3 ?/ P) r* Y, a* T
离心后，重悬细胞计数同时计算活率

作者: 永远的伊凡 时间: 2013-6-3 14:43

回复 sunny.yc 的帖子. H, u- `0 V" @2 m9 u+ |2 Z5 N# \
+ _5 D% s1 t( o: @% R6 j
好方法，可以去试一下

作者: 永远的伊凡 时间: 2013-6-3 14:44

回复 sunny.yc 的帖子+ T. @. ]' Y+ L3 q, ?

好方法，可以试一下

作者: sunny.yc 时间: 2013-6-3 14:49

回复永远的伊凡的帖子8 D1 T5 B- E1 C* @ f

不同的细胞，不同的转速和时间，甚至是不同的离心机和离心管都是不一样的，所以……

作者: meister 时间: 2013-7-18 15:47

CIK回收，洗涤三次，丢失20%。

作者: xiaolong 时间: 2013-7-19 14:21

回复 sunny.yc 的帖子8 _# Y, ?& v" N) b8 I
' a& ?7 Q; L/ K5 o1 C& e5 q
上清液中一般是不会有细胞的，我做过几次显微镜观察，没发现有细胞

作者: 20111109 时间: 2013-7-19 14:51

最近也遇到了这个问题：) X. @+ M7 ?* X- F: I3 ~2 Z
我来描述一下具体情况--细胞消化后离心1800rpm，5min，拿出来发现有沉淀，但是在上清液中有似龙卷风一样的没有被离心下来。（这类东西是因为细胞培养的MEF之间的某些东西）我的做法是小心的弃掉部分上清，再用枪轻轻的打后，重复离心。这次离心后沉淀便稳稳的呆在离心管底下了。
我也担心是否离心次数增加令细胞数量减少，毕竟我的细胞本来就不多（还在建系中），传代后第二天观察，细胞状态良好的，目测细胞数量还不少。

作者: heming 时间: 2013-7-19 16:59

这个估计没有人做过吧，离心肯定是有损失的，转速低了在上清液中细胞的损失多，转速大了，细胞收到的压力大，又会损伤细胞。不过一般离心细胞选择的转速都在200g到300g时间4到10min不等，具体按照细胞不同而不同，一般300g左右离心5min对绝大多数细胞都适用。在这个转速和时间上，一般细胞损失都很小，也不会对细胞造成损伤。

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