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标题: 请教：丝裂霉素C处理MEF [打印本页]

作者: yaolinzhang 时间: 2013-6-7 16:27 标题: 请教：丝裂霉素C处理MEF

不知大家做ips时，用什么溶液来溶解粉末状的丝裂霉素C？处理MEF的用量是多少？先行谢过！

作者: fengxiwu 时间: 2013-6-7 18:16

回复 yaolinzhang 的帖子, K, P% ?- q* h @" S

http://www.stemcell8.cn/forum-vi ... able-tid-30766.html$ G. {% U: D1 s! K8 e/ V4 S- d. Q4 ^
搜了一下是先前的帖子，已经将的很详细了，也有很好的讨论了

作者: yaolinzhang 时间: 2013-6-8 08:03

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谢谢楼主热心相助！

作者: flagarmy 时间: 2013-7-1 09:29

pbs配液 5ml 加100微升左右

作者: lipenix 时间: 2013-7-4 22:25

海正药业，医院里开的，几块钱一盒，2mg/瓶，加2ml PBS，成100X溶液，4度冰箱放置可用半年以上；1 J, @- P* ^4 G2 s: D0 }
如，配制5ml处理液，DMEM 4950ul，加丝裂霉素贮存液50ul，即为10ug/ml处理液，一般处理2小时；, g) {2 X6 X8 v2 ~
处理后注意洗涤干净，这个对ES生长有影响，不能偷懒~~:P

作者: xld1984 时间: 2013-7-7 10:12

当然是用PBS用了

作者: supercell 时间: 2013-7-9 09:47

配制溶液我一般都习惯视所处理细胞的培养基而定，如MEF建议HD或HD+10%FBS（FBS会对细胞有一定保护作用）；配制浓度按照终浓度是10ug/ml配制成10X或20X储存液，分装后冻存。使用时提前溶解，不建议反复冻融，4度放置不建议超过2周；使用浓度：即使是同一厂家不同批次MT，或者同一种属老鼠不同批次制备的MEF，都建议梯度摸最佳处理时间。

作者: zhanlixiang 时间: 2013-9-14 14:20

请教大家都用什么品牌的丝裂霉素C，配至10ug/ml后4°能储存多久？期待回帖，:handshake感谢大家！

作者: 细胞海洋 时间: 2013-9-16 11:41

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作者: luyoude 时间: 2013-9-23 16:58

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我们用的是罗氏的，工作液的话都是现用现配，一般是先配母液放在-20中！

作者: zhanlixiang 时间: 2013-10-10 15:22

首先感谢大家的回帖！-20可以储存多久呢？冻存后丝裂霉素的作用不受影响吗？

作者: 细胞海洋 时间: 2013-10-11 09:06

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作者: 天龙八部 时间: 2015-4-9 19:26

回复 lipenix 的帖子0 t; i' g* }/ a3 w$ w `3 `* |1 o
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谢谢！
请问丝裂霉素稳定吗？四度放半年的话。。。。我想放-20度，1年没问题吧？

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