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标题: 如何去除细胞碎片 [打印本页]

作者: zhangjieyctc 时间: 2013-6-9 09:15 标题: 如何去除细胞碎片

去除细胞碎片，一般用的速度和时间分别是多少啊？

作者: 素心无痕 时间: 2013-6-9 09:51

一般情况下，可以采用3000-5000转/分，离心5分钟，可使细胞碎片沉淀下来，取上清液即可。

作者: zhangjieyctc 时间: 2013-6-9 11:10

回复素心无痕的帖子7 p: I7 `) W% @1 Z+ O6 H+ t

3000-5000rpm细胞不是也随沉淀一起沉下去了嘛？

作者: 歪歪 时间: 2013-6-9 12:28

自然沉降20min

作者: evial 时间: 2013-6-9 20:56

素心无痕发表于 2013-6-9 09:51
( ]* D9 R% }8 L3 Y+ t( A" h/ |0 Z) B' L一般情况下，可以采用3000-5000转/分，离心5分钟，可使细胞碎片沉淀下来，取上清液即可。

这个速度细胞都碎了

，全变碎片沉下去了。安全速度是不超过2000RPM

作者: ytumuyangren 时间: 2013-6-9 21:00

回复素心无痕的帖子* y/ ~6 P; i/ g0 @! d7 z0 S
; k+ i: @: Z$ D0 E' A0 u0 s
这么高的转速，还要你的细胞不？细胞都成碎片了。

作者: jj2570782 时间: 2013-6-12 22:27

低速500rpm左右短时 2-3min

作者: 素心无痕 时间: 2013-6-13 10:43

感谢战友们的批评指正。其实如何去除细胞碎片还是靠个人经验总结，比较常用的方法有1.自然沉降法，将细胞悬液置于离心管中，等细胞大部分下沉后，吸弃上清，如此反复多次，也可到达目的，但是还是会有少量的残留；2.离心法，转速<300-500g，5min，但是还是要根据不同的细胞类型来决定。当然也有人提出使用稀释法，不过本人没有做过。谢谢大家！

作者: evial 时间: 2013-6-14 10:47

300-500G?看不同的机器，这个转速是高的相当于1200-1500rpm左右，上面有位朋友说的是500rpm不是g哦！这是低转速，能够使碎片下沉但细胞还沉不下来。

作者: zhangjieyctc 时间: 2013-6-14 16:38

回复 evial 的帖子8 h$ ]+ Q& Z9 B$ K8 Z, p3 S5 t
9 h+ ~; h3 T5 @5 Y9 f
是的，300g我试过，相当于1200-1300rpm，这个转速肯定是不行的，500rpm，没试过。请问你们一般用多少的转速和时间啊

作者: 硕果累累_555 时间: 2013-6-14 17:21

500-800r即可去除细胞碎片哦

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