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标题: 干细胞不白提问：关于间充质干细胞接种密度 [打印本页]

作者: cageling267 时间: 2013-6-9 15:05 标题: 干细胞不白提问：关于间充质干细胞接种密度

一个还在干细胞科研大门外的科研小白求助，间充质干细胞传代培养时，接种密度是怎么确定的？普通情况下是多少呢？' n% o; p X! Q* Z7 |+ Z
PS:由于是个门外汉，可能提的问题会比较幼稚，但希望各位大侠能够解答一二。

作者: CELL007 时间: 2013-6-9 15:54

关于接种密度，要看细胞生长的速度。我现在做的一般是这样，5000个/cm2.长的快的就传稀疏点，长的慢的就传密集点。原代一般1传2；后面的一般1传3，或者1传4那样子。

作者: lizzy_81 时间: 2013-6-10 10:37

3000/cm2至10000/cm2都有，还要看是哪种来源的间充质，培养条件也有很大的影响

作者: aibi1983 时间: 2013-6-10 12:17

我们都是根据生长曲线决定，如果倍增时间长就稍种密点，反之亦然，假设你的细胞对数生长期为3天，那就根据对数生长期开始相对应的浓度接种，这样收获的细胞会比较多！

作者: fengxiwu 时间: 2013-6-10 15:15

各位测量过间充质干细胞的大小吗？长度、宽度大体能在什么范围？MSCs的倍增时间是多少？" I( m7 Y; F* C. Z" n
小鼠的间充质干细胞和人的间充质干细胞还是多少有点差别的吧！
间充质干细胞的专著中提到人的MSCs融合度达到50%就可以传代了，而相比较小鼠的80%传代要好一些！$ U* g' L1 K' Y
我们通过计算可以得出5万/cm2的MSCs（估算100%融合度），但是实际情况可能1万/cm2的密度都何难达到的。( f7 `" s2 |' {
个体差异难免。基本的数据搞不清楚，就总是在估摸着做实验，这样是有些不准确的。我有一次在六孔板中培养的MSCs100%融合，细胞量10万左右。

作者: lele 时间: 2013-6-12 11:21

回复 cageling267 的帖子+ s0 W- M" q9 }/ [
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对细胞要求不是很严格的话，接种密度接多少的都有，依情况而定，一般原代1:2来接种，传代培养1:3，1:4,1:5。这跟个人操作的手法和物种都有关系，所以具体接种密度个人实际摸索中总结。

作者: 单个核细胞 时间: 2013-6-14 09:01

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建议接种密度为2.0×10^4 cells/cm^2。

作者: tonyww723 时间: 2013-7-12 01:19

人的MSC比鼠的好养，这很正常。一般来说10%血清培养基的接种密度在3000/CM2 比较合适，无血清的接种密度在5000/CM2左右。建议传代：人MSC 70%+ 鼠80-85%+

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