干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站
标题:
EDTA
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作者:
lmh_yixue
时间:
2013-6-17 22:03
标题:
EDTA
EDTA传代细胞时，EDTA是否对细胞具有潜在危害
作者:
ipadworm
时间:
2013-6-18 03:11
控制时间不会的。 时间长了的话还是有可能的， 因为缺钙
作者:
wangzhiqi86
时间:
2013-6-18 16:05
取决于你的浓度和作用时间，楼主的ETDA应该是和胰酶一起作用消化细胞吧，一般那那么一点，不会有影响，因为新鲜培养基自然会稀释它的作用
作者:
lmh_yixue
时间:
2013-6-18 17:30
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wangzhiqi86
的帖子
: A0 \2 n* G" h9 ^( x- N
( R# M I0 s# s7 f: i) X$ h5 Y
谢谢！我看到文献中有只用0.05mM的EDTA传代ES的，想知道EDTA是否会影响ES
作者:
lmh_yixue
时间:
2013-6-18 17:31
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ipadworm
的帖子
1 m/ ]! H+ L3 H) A* _% Q# u
7 r, d ?0 k7 D7 a' ^
谢谢！我看到文献中有只用0.05mM的EDTA传代ES的，故考虑EDTA是否会影响ES
作者:
mjc588
时间:
2013-6-18 23:29
钙离子结合剂
作者:
xiangyu83
时间:
2013-6-19 00:37
好像影响不大。如果试验比较精细，可以消化完成后，用10倍含血清培养基终止，然后离心弃上清，再用培养基重悬。这样就排除了EDTA对细胞潜在影响。
作者:
zpzp0312
时间:
2013-6-19 09:46
一定会的，所以最好用一些替代物，胶原酶或者Accutase，但也有一些操作上的不方便，比如消化不完全，消化后不易离散。
1 c L1 I l; A) g3 I
但目前大部分人都是使用胰酶的，所以如果对细胞不是要求很高，用胰酶足够了
作者:
lmh_yixue
时间:
2013-6-20 15:58
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zpzp0312
的帖子
8 H' f$ v( u) m, `) M2 `8 q' E
2 M1 J1 m( v+ u m/ Z( p" a
谢谢，我们看到文献有只用EDTA传代ES的，但是我们想知道EDTA是否会对ES产生不好的影响，用这样的ES来做后续试验可能会对结构有影响。
作者:
zpzp0312
时间:
2013-6-21 09:13
"我们看到文献有只用EDTA传代ES的"
! N& d; L/ E) O5 S, y
如果这样的话，即使有影响，也只能这样做
* _7 R( a( d- l! Y* G" ~2 m( k/ p
要不你就说说你的实验具体要做什么吧
作者:
zsc78
时间:
2013-6-23 07:40
EDTA的影响肯定是有的，消化完后用PBS或培养基漂洗细胞2次就能减少影响。ES的消化有较好的替代物，如胶原酶、Accutase等。
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