干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站
标题:
我的Wistar大鼠骨髓间充质干细胞怎么了？
[打印本页]
作者:
星火燎原3562
时间:
2013-6-30 19:36
标题:
我的Wistar大鼠骨髓间充质干细胞怎么了？
P1代细胞Wistar大鼠骨髓间充质干细胞，自己分离的，P0代长了20多天，传代后就这样了
: |' A6 {& |0 G7 k. h! I1 h: G* v
培养基：DMEM+10%FBS ，FBS是天津TBD的，好多天了 长得特别慢！是不是老化了啊？该怎么办呢
作者:
yinfuhua
时间:
2013-6-30 20:36
回复
星火燎原3562
的帖子
1 J% w3 }1 I: A/ ?( \1 Y- X& X
4 }# D. f- u7 c3 o. Z: t) t) j
这是传代后几天的照片？看细胞状态确实有点老化了，感觉像缺营养物质。这次传代后中间换过液吗？建议再传代看下，密度和这个差不多就行。2-3天后，不论细胞长的如何也换次液，观察看看是否能挽救过来。
作者:
liuyul03
时间:
2013-6-30 23:50
细胞老化了，原代长的时间太长。救过来的可能性很小了，重新做吧。
作者:
light_blue
时间:
2013-7-1 09:19
建议更换进口血清试试，原代时间不能太长，生长过慢可能有细菌污染。
作者:
aulenuyah
时间:
2013-7-1 09:23
个人觉得细胞老化了，传代救过来很难了，建议抓紧时间重做吧
作者:
xld1984
时间:
2013-7-1 13:07
细胞老化了，不知你P0代是消化的还是种植的，时间太长了
作者:
星火燎原3562
时间:
2013-7-1 18:58
P0自己分离的，从分离到长满瓶底
作者:
希望之光
时间:
2013-7-2 09:00
首先，P0代的细胞不能长太久，20天原地不动对细胞是很不利。这一点对你后面养细胞的活力影响很大。其次，传代时要尽可能降低对细胞的损伤，如果是用胰酶的话越低越好，我都用0.05%的，但文献里有用0.025的。如果细胞养老的话用这个浓度就很难消化下来了。从你现在提供的图片来看，你就收了做检测吧！养不好了。记住养细胞的关键就是：一直给它吃好喝好照顾好，丁点损伤都不行，不能抱有侥幸心理。
作者:
细胞海洋
时间:
2013-7-2 10:01
回复
星火燎原3562
的帖子
! B- y3 i# M5 F+ T+ i) W
4 U( |9 l+ {3 z0 V( G! f. f
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
* {& P+ J `' x6 s
7 ]" P, @/ }; W" k$ `7 V e, U
否则他会看不到
作者:
iytbxxg
时间:
2013-7-2 13:53
看起来是像老化了，但愿不是吧，骨髓间充质干细胞有可能多种形态，只是这种形态不太像成纤维，建议把换成出口血清，等这个长满点传个代，传代时间控制好点，但愿你可以成功
作者:
星火燎原3562
时间:
2013-7-2 13:58
回复
希望之光
的帖子
# n" m" m( r+ W/ W; A
" Q- G g6 u/ I2 U! [: [) g, H
谢谢了，原来胰酶浓度要那么低啊
作者:
fay898
时间:
2013-7-2 14:03
亲 老化的太厉害了~~后面好不了的。一定要用进口血清~南美的都不一定好，最好用澳洲的！！
作者:
星火燎原3562
时间:
2013-7-2 14:03
希望之光 发表于 2013-7-2 09:00
1 ?# z- m( C9 y
首先，P0代的细胞不能长太久，20天原地不动对细胞是很不利。这一点对你后面养细胞的活力影响很大。其次，传 ...
1 N9 x y8 l. i. Y
我也不是20天不动，也是每三天换液一次
作者:
星火燎原3562
时间:
2013-7-2 14:04
回复
细胞海洋
的帖子
' q* j( k6 D S" q, w4 U
: x/ c/ }/ `! Q9 W
明白了
作者:
menghy
时间:
2013-7-2 16:04
原代培养我个人认为没有必要让其满瓶，因为原代的时候细胞都是成片状生长，一些细胞长的快，一些细胞长的慢，等满瓶了的话长的快的细胞就已经出现老化了。等你再传代后对后期细胞培养有很大的影响。你可以根据成片状细胞的密度，活性来判断传代时间。细胞太少的话可以原瓶传代，让细胞重新分散后继续培养，也可以转到更小体积培养。
作者:
lyxzjr
时间:
2013-12-30 18:30
我的是进口血清，传代后也这样
作者:
lyxzjr
时间:
2013-12-30 18:33
回复
lyxzjr
的帖子
& z/ L6 {# ~' ?9 j7 W
8 X5 ]; v2 R9 _
作者:
lyxzjr
时间:
2013-12-30 18:36
怎么发图片？
作者:
limeiying
时间:
2013-12-30 19:34
回复
星火燎原3562
的帖子
$ }7 \8 M: c- a# ^7 L3 I
6 C: }5 W7 x7 q# _, {6 @" e5 c
培养干细胞最好还是用进口的血清，Hyclone或Gibco的。大鼠的BMSCs个人觉得不好培养，前几代还可以。实在不行的话可以考虑添加bFGF等生长因子。
作者:
细胞海洋
时间:
2013-12-31 10:51
回复
lyxzjr
的帖子
/ u( m; t' Z* V# x
2 l! S' s3 f- e |* h
回复 高级模式 附件上传 单个图片不要大于1000kb
欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)
Powered by Discuz! X1.5
