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标题: 流式细胞仪 CD34 [打印本页]

作者: 刘小白and刘小黑 时间: 2013-7-17 13:48 标题: 流式细胞仪 CD34

用流式细胞仪做CD34检测，每份脐带血的CD34的图谱有特异性吗？CD34的百分含量有最大值吗？上次做了一份百分含量为1.59%，这个正常吗？

作者: cantonchn 时间: 2013-7-17 14:00

如果是检测脐带血，应该是CD34+吧~~~) B8 w' f, I/ \

如果是CD34+的结果是1.59%的话，那简直是~~高的离谱！

作者: 刘小白and刘小黑 时间: 2013-7-17 14:20

就是CD34+ 之前做过的最高也就0.7%多一点后来另一个标本做出来的结果1.59% 不晓得正常不？这个有范围么？

作者: cantonchn 时间: 2013-7-17 15:10

目前没有确切的范围，但是有经验值~~~这个值可能含有其他杂质吧~~~

作者: Life_Tech 时间: 2013-7-18 17:28

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有可能有一些非特异性染色，对照做好了吗？通常我们都是用不染色的作为阴性对照，但是如果抗体的特异性不是特别强，最好选择同型对照染色作为阴性对照。

作者: 三月桂花香 时间: 2013-7-19 13:34

做同型对照，看看，但是如果是脐血的话是不是高了点~~

作者: miltenyi 时间: 2013-7-19 13:58

脐带血里的CD34细胞比例大概是0.1-0.5%，有可能是非特异性染色，抗体浓度，染色时间，温度还有封闭步骤都可以检查一下，祝后续实验顺利哦！

作者: 刘小白and刘小黑 时间: 2013-7-19 14:54

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有做阴性对照用的CD45标记，然后阳性是CD34 阴性是IgG 应该是抗原抗体结合被标记在通过荧光检测的嘛这个样本我做过两遍都是一样的值

作者: 刘小白and刘小黑 时间: 2013-7-19 14:56

回复 miltenyi 的帖子# D; `( W- P* f$ Z" }4 w' Q/ W
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关于CD34的东西我在网上也查过资料知道温度影响挺大的我用的25-27摄氏度不知道有没有问题

作者: 刘小白and刘小黑 时间: 2013-7-19 14:56

回复三月桂花香的帖子! K; P" o7 n9 L( c2 }
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就是觉得有点高啊呵呵

作者: miltenyi 时间: 2013-7-19 16:13

哦？美天旎的流式抗体染色基本都是2-8度，貌似有些品牌的流抗可以室温染色的，不过要缩短染色时间，你根据抗体说明书做的话应该没问题，另外，可以咨询一下你用的抗体的技术支持，他们更了解自己的抗体，也许会有更好的建议

作者: miltenyi 时间: 2013-7-19 16:17

本帖最后由 miltenyi 于 2013-7-19 16:19 编辑 8 h* i& Q( t8 K) B7 \9 p

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有没有用BSA封闭呢，还有补偿调节都没问题吧？

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