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标题: 怎样保持无菌啊？ [打印本页]

作者: willow0711 时间: 2013-8-27 12:36 标题: 怎样保持无菌啊？

最近在做胎盘小叶酶解法获得间充干，做了两次都污染了，是细菌污染，实在找不出原因了，请各位大侠帮
我取回的胎盘有pbs+双抗洗，听位战友的意见，过了两次75%酒精，时间很短，不到一分钟！洗两遍换个新的无菌的烧杯，洗了N遍。

作者: 金戈 时间: 2013-8-27 15:00

胎盘组织较大，在留取过程，产科一般不怎么给你注意无菌。所以你取回来的时候务必进行仔细清洗和消毒。双抗只能起到抑菌作用，所以真要污染时，是没用的。一般注意大量清洗后，污染还是可以控制的。

作者: helong 时间: 2013-8-27 15:35

培养基也加双抗

作者: jxaf3900824 时间: 2013-8-27 16:17

第一代，每次补液都加双抗。

作者: 单个核细胞 时间: 2013-8-27 16:39

回复 willow0711 的帖子# z. E( f) j9 q8 P8 e3 T
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运输时可加双抗，清洗的时候可以用酒精，消化的时候也加双抗，培养的时候再加双抗。

作者: willow0711 时间: 2013-8-27 16:41

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哦，洗的时候加酒精处理几次？每次多长时间呢？谢谢

作者: willow0711 时间: 2013-8-27 16:42

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哦，谢谢您

作者: willow0711 时间: 2013-8-27 16:42

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加了的

作者: willow0711 时间: 2013-8-27 16:42

回复 jxaf3900824 的帖子+ ]3 l9 E" g8 ]- ?( l; ^, l: v, C
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哦，谢谢

作者: 单个核细胞 时间: 2013-8-27 16:43

回复 willow0711 的帖子 Z8 \1 s" S! [) G$ [* o' P) V4 ^
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可以反复浸泡两到三次，每次30s，酒精浸泡还能有效去除红细胞。

作者: willow0711 时间: 2013-8-27 16:50

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哦，好的，下次我试试看！谢谢

作者: wangbo19880315 时间: 2013-8-28 00:12

1、运输过程可以考虑适当泡在加双抗的保养液中，这样等到了实验室很少会污染。$ g) h9 |0 L' v& g# M" ?
2、培养过程中加双抗。

作者: willow0711 时间: 2013-8-28 09:09

回复 wangbo19880315 的帖子$ H9 S, h5 T6 h7 A; q% v5 R

我就是这样做的，谢谢

作者: iytbxxg 时间: 2013-8-28 09:32

首先你要确保你的实验环境尽可能无菌，特别是超净工作台在分离前要消毒，最好用酒精擦+紫外照30分钟。
操作过程尽可能按照无菌操作来操作，操作过程中多给手部喷酒精消毒。& Q. D8 ~. V6 `7 d
一般原代培养比较容易污染，主要污染来源是样本来源所带的污染，能通过酒精泡和加双抗等方法去消除。

作者: tianangelt 时间: 2013-8-28 09:38

取下组织后就要浸泡酒精消毒一下的，然后再放在运输液中，取的过程很容易污染。

作者: sun_happone 时间: 2013-9-3 13:40

建议你加点庆大霉素，网上查下它的用法，也可以起到预防细菌的作用。另外，操作方法，器械也都要确保无菌，多洗几遍，应该可以预防的。

作者: willow0711 时间: 2013-9-3 15:18

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谢谢

作者: willow0711 时间: 2013-9-3 15:19

回复 sun_happone 的帖子4 D% u: C9 ]& U# s
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哦，好的

作者: willow0711 时间: 2013-9-3 15:19

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谢谢

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