干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 脐带间充质干细胞聚团,形成一大片絮状物,大家有没有遇见过,求解??? [打印本页]

作者: aochongyu    时间: 2013-9-5 10:30     标题: 脐带间充质干细胞聚团,形成一大片絮状物,大家有没有遇见过,求解???


/ Z) V9 n5 Z5 C3 {脐带间充质干细胞聚团,形成和水母似得絮状物,检测了支原体也没污染,细胞状态也没有什么异常,吹开以后,加液继续培养,还是照样聚团,求大神指点???
作者: 2420527    时间: 2013-9-5 11:14

细胞融合度?
作者: iytbxxg    时间: 2013-9-5 13:02

你说得让人不是太明白,最好还是上图。
# z3 A  ^' O& M9 M' g6 S我个人认为细胞应该有聚团的趋势,毕竟细胞之间是有相互作用的,这样更有利细胞生长,但是为什么你把它们吹打开了还要聚在一起我就不是太明白了。望知道的人指教。
作者: aochongyu    时间: 2013-9-5 13:45

回复 2420527 的帖子
1 g, G# _% K' I3 E2 S2 `! ^4 J# @4 k3 j& Q* j
我个人感觉不是融合度的问题,有时候我们培养瓶处理晚了,融合度都100%,也没事啊
作者: aochongyu    时间: 2013-9-5 13:46

回复 iytbxxg 的帖子
! d* t7 F6 Z1 b4 M( s/ C
- X' x" Q/ {$ ^$ e当时没拍下图片
作者: aochongyu    时间: 2013-9-5 13:48

是肉眼可见的絮状物,在T175瓶子里面很大一片
作者: iytbxxg    时间: 2013-9-5 14:14

是不是漂在培养基表面的,有可能是细胞释放出来的吧,感觉像脂肪的吗?
作者: 2420527    时间: 2013-9-6 14:57

百分之百和百分之百是不一样的,有时候细胞生长时间太长,有的细胞会生长到之前的细胞表面,形成多层的细胞,这样就容易成为我们称之为“絮状物”的东西
作者: jxydiandian    时间: 2013-9-6 16:29

是不是血清没有灭火处理?里面的纤维蛋白聚集,将细胞网住,进而导致其死亡,再聚集
作者: uslzhang    时间: 2013-9-6 18:12

您的细胞是MSC吗?
作者: 2420527    时间: 2013-9-9 15:36

回复 jxydiandian 的帖子+ ?! M& n6 G$ D. Q5 {  z
& ?8 ~  V4 s6 \$ S- X# ^" t
无血清培养基也会出现的
作者: 漂泊的风    时间: 2013-9-10 08:31

回复 aochongyu 的帖子
  R6 ]# @7 q0 G, r2 m% k) c6 t* ?
% o! I. T0 p2 T. E# i5 z; k我估计是脐带分泌的东西,我养鼠的脂肪,在底部也有一层,是在细胞爬出来之前就有的,后来随着细胞爬出的越来越多。他越来越少。
作者: wuzhongqi    时间: 2013-9-10 10:24

回复 漂泊的风 的帖子7 J" M* p2 Q0 a
  I6 u4 E! M' b. v, s
细胞长的太满了   会出现成堆现象   有时候会漂起来
作者: deshenglll    时间: 2013-9-10 10:39

回复 aochongyu 的帖子7 F6 G, s! y. l! Y
9 T5 Y$ r( E; {
正常的,传代时细胞没有吹匀。以后传代的时候多吹打几下,过滤。
作者: pcljsw2008    时间: 2013-9-10 10:54

最近我也出现这问题了,之前都没有的,组织块感觉像腐烂了冒泡一样的感觉,但是又不是污染,后来说是培养基的问题,换液周期也缩短了
作者: wind789    时间: 2013-9-10 16:28

回复 aochongyu 的帖子5 ?0 R/ u* f2 B& _) p6 b1 g

) z5 k4 u9 V( s7 I- U这个话题讨论几次了。其实也不是传代时没有吹散,也不是长过。部分细胞就是会出现这种情况,有空地它不长,非要堆起来长。我建议做做流式看看。
作者: wind789    时间: 2013-9-10 16:30

jxydiandian 发表于 2013-9-6 16:29
/ s, r; p& W+ ?9 ^/ T是不是血清没有灭火处理?里面的纤维蛋白聚集,将细胞网住,进而导致其死亡,再聚集

2 l" P6 u" |7 m4 I; L: ~0 Z2 s最近使用的血清替代品倒是出现了这种状况,推测就是蛋白把细胞黏住,死亡后聚集为有点云雾网状漂浮物。我打算以后培养基过滤后使用。
作者: crazytime    时间: 2013-9-24 12:21

接种密度可能有点高,或者没有完全吹开,建议用细胞滤网过一下
) ^1 t; }) ^- E: u" K再接种,应该会好很多
作者: liu3385huan2722    时间: 2013-9-27 10:39

回复 aochongyu 的帖子
5 a+ k( b6 `8 U0 p( o  ^' }
' d" ?! T8 b$ g7 d你好,我养的最近的MSC也是消化的时候,一大片的落下来,不像以前一样是散的,我以前一直认为是胰酶的问题,我都配胰酶配了很多遍了,但后来用买的现成的胰酶,也是这样,我觉得可能不是胰酶的问题了,但是,有一点是,我的瓶子是重复利用很多次了,不知道你是不是用的旧瓶子?
作者: aochongyu    时间: 2013-9-29 09:45

回复 liu3385huan2722 的帖子% R+ }) `( y7 `( a3 M; t+ C* y; H7 t$ e

+ g! j3 s, x4 S( r* k我的是新瓶子
作者: sdudai    时间: 2013-9-29 10:07

应该是细胞生长太快,导致互相堆叠,形成团块絮状物吧
作者: yanglixia    时间: 2014-7-4 15:44

不会是掉进去的棉花丝吧
作者: wuzhongqi    时间: 2014-7-7 16:06

回复 liu3385huan2722 的帖子
- }8 O5 @9 B8 e' e2 X6 e0 z& z7 c3 ?1 k. P
细胞密度太大了,瓶子都长满了,细胞形成密致层,一消化都是一层一层的下来,有些都吹不散,只能过滤掉。
作者: 弑之使徒    时间: 2014-7-7 16:24

本帖最后由 弑之使徒 于 2014-7-7 16:30 编辑
$ T% H, m# s6 ]( k
6 l, s& }1 D0 f用了血小板提取物?无过滤就直接使用,纤维蛋白会成团的…
作者: 弑之使徒    时间: 2014-7-7 16:25

用了人血清?人血清貌似会有结团现场
作者: dujun033    时间: 2014-8-6 14:16

回复 aochongyu 的帖子% H$ K1 m/ D& s5 f# s
9 L& D4 z9 `- s0 S6 v
正常 融合度的问题  简单的说就是长过了
作者: MilesMa    时间: 2014-8-7 16:19

我们曾经出现过这种情况,可是吹散后换个瓶子接种就好了。可以换个瓶子试试
作者: wuzhongqi    时间: 2014-8-8 10:22

回复 2420527 的帖子
9 ?* M+ n+ i. n. Z6 I/ B
; O2 f6 t9 o  u9 I( z% B细胞长的太满了,好几层叠加在一起,酶消化时会一片一片脱落下来,吹不散的,只能用过滤器过滤掉,损失好多细胞的
作者: bin    时间: 2016-8-9 08:59

回复 aochongyu 的帖子6 p5 s( [7 @8 B; l

, y* g5 @& z& D( r7 k  P0 k脐带间充质干细胞不是贴壁细胞吗?怎么会有这样絮状物呢?是在原代培养还是传代培养时候出现的,如果是消化后的原代培养出现的,很有可能是消化酶有问题,组织在消化过程中会有细胞破裂,核内dna会释放出来,而dna是很稳定的长链,如果消化酶中不加dna酶,长链dna会把单个悬浮细胞聚拢起来形成絮状。如果是传代过程出现这个问题,可能是传代时候有细胞破裂,dna释放出来了,建议在消化酶中加一点dna酶,不需要很多,也不需要消化很长时间,这样会好很多。我做组织消化的时候里面都会添加dna酶,从来没有出现过絮状物出现。希望对你有帮助。
作者: echizne    时间: 2016-8-30 10:48

会不会是霉菌污染呢,上图才好判断
作者: LVXUEYAN1101    时间: 2016-9-2 09:03

肉眼可见的絮状物是不是污染了?
作者: 独自等待    时间: 2016-9-6 10:57

肉眼看漂浮在培养基中还是镜下观察贴壁絮状物?可能是细胞有凋亡了




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5