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标题: 这是什么污染呢？ [打印本页]

作者: Iris88888888 时间: 2013-9-21 14:41 标题: 这是什么污染呢？

细胞污染了，肉眼看细胞瓶可以见到白色的像沙一样的东西，显微镜下是这样的 QQ截图20130921143921.png

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这是什么污染呢？

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作者: Iris88888888 时间: 2013-9-21 14:51

自己顶一下，这些团状的东西是不贴壁的一晃就掉下来了。。。。

作者: Iris88888888 时间: 2013-9-21 15:16

好吧，刚刚查了一下资料，感觉有点像白色念珠菌，不知道有木有高人能确定一下这个污染。。。。。

作者: lipd09@mails 时间: 2013-9-21 16:20

回复 Iris88888888 的帖子' q+ d' [) @, ?- w t( W7 o" v

我也染过，肉眼看像细沙一样的，镜下观察是串珠样的，我认为是链球菌。

作者: Iris88888888 时间: 2013-9-22 08:55

怎样检测呢。。。。

作者: shunanqi 时间: 2013-9-22 10:33

做个革兰氏染色，再根据血培养仪的曲线来判断

作者: Iris88888888 时间: 2013-9-22 17:09

血培养仪木有这个仪器。。。。好高端的样子啊。。。。

作者: yaolinzhang 时间: 2013-9-22 17:45

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阳性球菌污染，建议楼主培养细胞加双抗。

作者: Iris88888888 时间: 2013-9-23 09:15

回复 yaolinzhang 的帖子
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好的呢，只能这样了。。。。

作者: 小咪咪 时间: 2013-9-23 13:34

我上次养细胞时也出现过类似的情况，用了双抗也不行。后来加大了双抗的用量，还加了0.1%的两性霉素B，但结果还是救不了。细胞全碎了，严重影响我的实验。故同求解析~

作者: biovictor 时间: 2013-9-23 18:28

貌似念球菌污染，建议楼主仔细查看一下培养箱，这批细胞，不建议挽救了。尤其是长期没有打扫过的地方，比如培养箱中风扇处。我之前也是遇到过此类污染，长的超快！所以我把培养箱彻底消毒一次（尤其是平时不注意的旮旯中！），就没事儿了！

作者: 流泪的鱼 时间: 2013-9-23 20:36

一种真菌污染，肯定是人为原因。否则细菌污染也许是非认为原因。

作者: Iris88888888 时间: 2013-9-24 10:18

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作者: xiaoyuwsp 时间: 2013-9-24 10:56

这是霉菌污染。简单鉴定方法：用10%KOH或NaOH涂片显微镜下可见菌丝，或者用革兰氏染色为阳性的菌丝鉴定

作者: sun_happone 时间: 2013-9-24 11:56

像酵母。

作者: oucflora 时间: 2013-9-24 12:16

本帖最后由 oucflora 于 2013-9-24 12:26 编辑

肉眼观察到白色的像沙一样的东西，培养基变为黄绿色，低倍显微镜下也是流沙状，应该是细菌污染。不过我看楼主最下面一张图片，又有点像酵母菌或白色念珠菌，因为在细菌在低倍下很难看清具体的形态。不知道楼主几张照片的放大倍数是多少，
污染到这个程度，加10倍双抗很难去除干净。而且高倍的双抗处理时间太久，细胞受不了的，如果细胞特别珍贵，可以试试；若实验室还有细胞种子，建议尽快把有细菌污染的细胞丢弃，彻底清理超净工作台、无菌室和培养箱。旧培养液和血清也别要了。

作者: Iris88888888 时间: 2013-9-25 13:48

回复 oucflora 的帖子- O- P1 T, ^( _ y* W
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放大倍数依次是400X，200x，40x，培养基会慢慢变黄但不变绿，不像细菌污染一夜就混了，其实感觉勤换液应该还可以撑一段时间的。。。但是感觉细胞形态在发生变化，而且之前有一种及其细的小黑沙，于是想看看细胞放放会怎样，几天后就成这样子了

作者: oucflora 时间: 2013-9-25 19:27

回复 Iris88888888 的帖子& Z6 }2 J+ C: s% W- R: z

最下面那张如果是40X,也就是物镜是4倍？那肯定不是细菌污染，而是酵母菌或你说的白色念珠菌。你试试针对真菌的抗生素。如果污染物在里面，对细胞生长不好，所以细胞形态变化。如果还有细胞种子，赶紧扔了这瓶细胞吧。养着也不能做实验的。而且还会污染其他细胞。

作者: fm001982 时间: 2013-10-14 10:39

有条件的话送检，做BPA，BPN检测，就明白是什么菌造成的污染了。

作者: Iris88888888 时间: 2013-10-15 12:06

回复 fm001982 的帖子
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谢谢啦

作者: jackywangzr 时间: 2013-10-15 16:56

没见过，不过可以先画个平板看个菌落形态，然后革兰氏染色镜检一下，至于其他专业的检测恐怕也没有专门的检测用的培养基。。

作者: fm001982 时间: 2013-10-16 09:29

Iris88888888 发表于 2013-10-15 12:06
; F" @- |& L- w% J# T* b! R1 G回复 fm001982 的帖子
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谢谢啦

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检测出结果了回下贴，让大家了解一下这是什么菌造成的污染。

作者: gzeb 时间: 2013-10-17 13:02

类似情况我们最近也碰到过，不过没你这么严重，洗洗没效果，最后还是扔了；真菌污染，细菌污染不是这种状态，短时间内不会出现细胞如何，时间一长，细胞飘起来的就多了。救的话，我们试过100X双抗一小时，之后10X双抗过夜，之后加双抗培养，开始两天还好，第三天，老样子，而且细胞越长越差，最后拿去做普通实验，哎，救不活！

作者: gzeb 时间: 2013-10-17 13:03

我也想看看你的结果，出来了，公示下喽1 r3 I9 k+ C! W$ F- F6 @

作者: Iris88888888 时间: 2013-10-18 08:34

回复 gzeb 的帖子, M$ r9 u- K6 [% A& Y6 Q( q( u/ J8 V! b
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之前细胞污染后拍完照就扔了然后对细胞室和培养箱进行了一次清理灭菌，怕污染其它的细胞，当时还不知道什么检测方法，so，以后如果出现类似的情况，大家不要丢，拿去检测一下吧

作者: 淡定的摩羯 时间: 2013-10-30 10:40

我的建议如果实在想保重那么先冻存细胞冻存之后不要放到-80度冰箱而是直接放在液氮中看你能否杀死细菌及不健康的细胞同时复苏的时候加双抗

作者: gondobar 时间: 2013-11-22 14:55

白色链球菌

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