干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 培养基的PH值会对HES的状态影响吗？ [打印本页]

作者: qiushuiwuhen 时间: 2013-9-21 15:44 标题: 培养基的PH值会对HES的状态影响吗？

各位战友，最近细胞传代的时候出现问题，考虑各种原因，测了培养基的PH值在7.5，后重新配置还在7.48-7.5左右，请问这种PH回对细胞的生命状态有影响吗，大家每次配置培养基会不会测量PH值呢，请分享经验，谢谢

作者: feifangli 时间: 2013-9-22 13:08

配制好以后用1N HCl 调节pH

作者: qiushuiwuhen 时间: 2013-9-23 10:33

回复 feifangli 的帖子1 B! V+ _; U6 T& C+ v% k) _
' E' q2 R2 n7 b
我买的直接就是gibco的knockout DMEM/DMEM-F12,你是说配好之后就直接检测，然后再过滤除菌还是怎么办？谢谢不吝赐教

作者: feifangli 时间: 2013-9-24 10:15

回复 qiushuiwuhen 的帖子
! u! C' o% q7 o/ ~1 I8 u
我们买的粉末自己配置液体培养基，都是溶解后调节Ph，然后再过滤灭菌。如果买来是液体的，一般可以直接使用。

作者: 孙帅帅 时间: 2013-9-24 11:24

PH和渗透压都会影响细胞的的生存状态~~

作者: qiushuiwuhen 时间: 2013-9-25 09:10

回复孙帅帅的帖子' C2 \% n3 o. D

你的意思是如果买的就是knockout的DMEM/DMEM-F12，在加完各种营养因子之后还需要测下PH值，还是不用测直接用（上述试剂按照正常程序4度保存的）？谢谢！

作者: luyue6453 时间: 2013-9-25 09:52

回复 qiushuiwuhen 的帖子6 p+ C! {& E F& B4 w% h
7 i8 Z( j5 l4 H. @7 P& X5 n
买来的一直用就行了，如果放置太久谷氨酰胺失效颜色就变粉了，细胞贵重的话就不要用了，会收影响的，如果自己配的话一定要调PH值得，调完了再过滤，还是买现成液体的吧，贵不了很多钱，省不少事！本来做实验就够累心的，还因为配药这种可避免的事操心，不值得。

作者: qiushuiwuhen 时间: 2013-9-25 11:36

回复 luyue6453 的帖子
0 s' f8 y& C/ F
你好，我买的就是knockout的DMEM/DMEM-F12成瓶的液体500ml，你的意思是在加完各种营养因子之后不用测直接用（上述试剂按照正常程序4度保存的）就行吗？一般1月那瓶500的就用完了？

作者: yingjie 时间: 2013-9-26 09:24

回复 qiushuiwuhen 的帖子! m5 i# F9 l/ R! ], z! |
% T3 B- v F* r) ^7 {
瓶装的500ml培养基都是调节好PH、渗透压等因素的，所以在配制成完全培养基时，如果添加的东西量少，一般对PH什么不构成影响，可以直接用。当然，如果是比较娇嫩的细胞，条件要求苛刻的，还是测下吧。刚买来的DMEM/DME-F12是可以低温（2-8℃）存放一段时间，一两个月没问题，当添加了血清、生长因子等，尽量短时间内用完

作者: 孙帅帅 时间: 2013-9-26 11:29

回复 qiushuiwuhen 的帖子

我们在养HES的时候用碳酸氢钠和氯化钠调节PH和渗透压，但是培养基是我们自己配的！如果市场上买，培养基添加物应该给你们调好了！

作者: 孙帅帅 时间: 2013-9-26 11:31

回复 qiushuiwuhen 的帖子) u$ k$ A3 O7 `3 [6 N4 ]% R' x1 L3 }
! X, \- o6 o. \7 X
我指的是HES培养基！

作者: qiushuiwuhen 时间: 2013-9-26 12:51

回复 yingjie 的帖子( B1 }! s0 r# S) h

谢谢

作者: qiushuiwuhen 时间: 2013-9-26 12:51

回复孙帅帅的帖子, ~ N+ I& i6 e& z5 ], Z5 F
7 L, j% ], o1 ^% y+ Z. [) |
谢谢了

作者: zxmflying 时间: 2013-9-26 13:03

买的商品化的培养基可以直接用。再说PH7.5应该对细胞没影响

作者: luyue6453 时间: 2013-9-27 16:18

回复 qiushuiwuhen 的帖子8 @0 z- v; W- O) I

买来现成的当然不用测了，一般加完因子都需要再短时间大概一周内用完吧，如果你用不完，你可以把因子分装冷冻起来，用多少配多少就是麻烦点，但是我一般都这样做，不影响效果

作者: heming 时间: 2013-9-28 10:01

一般买来的培养基，只需要加入相应的血清和其他东西，其pH值都在正常范围内。如果是干粉自己配置的话，pH值和你用的水有关系了不过一般影响不会是很大，配置好后测量一下pH值，可以用HCl和NaOH调节。建议直接买现成的培养基 gibco的还不错

作者: friendly0722 时间: 2013-11-11 16:26

如果细胞贵重，最好还是买液体的吧。可以添加各种细胞因子后，每次使用分装出来。

作者: 流霞淌 时间: 2013-11-12 15:25

我们是少量配制培养基，最好在两周内用完。因为反复加热和冷藏培养基会导致其PH发生明显改变，最直观就是培养基颜色变粉。

作者: 小沙弥敲木鱼 时间: 2017-6-30 11:05

回复 heming 的帖子
! k5 e! [' n* F7 k4 {; @) \
你好如果用NaHCo3 调节PH值，PH不合适了用什么中合调节

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)