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标题: 如何提高CIK细胞中CD3+CD56+的量？ [打印本页]

作者: 人杰鬼雄 时间: 2013-9-24 09:34 标题: 如何提高CIK细胞中CD3+CD56+的量？

最近在做CIK细胞培养方面的实验，按照最基本的培养体系——无血清培养基+CD3单抗+细胞因子（IFN，IL-2，IL-1），培养16天左右，CD3+CD56+细胞含量只有12%左右，低于文献报道，请问如何提高该细胞的含量，需要添加其他细胞因子吗，若要添加，浓度应控制在什么范围内？

作者: 孙帅帅 时间: 2013-9-24 11:11

你可以尝试用含有胎牛血清的培养基培养~ CD3激发型单抗能够模拟抗原与TCR/CD3复合物的识别和激活过程，从而引起T细胞的增殖与活化，因此是CIK细胞培养中不可或缺的刺激因素；IL-2还可刺激NK细胞的生长并增强其杀伤能力。因此CIK细胞培养中须添加IL-2，以促进T细胞的增殖与活化；在诱导CIK细胞形成的过程中加入IFN- g ，可降低IL-2的用量。研究发现，IFN-g加入的顺序与CIK的细胞毒活性密切相关。先加入IFN- g，培养24后再加入IL-2，可明显提高CIK的细胞毒活性。

作者: luyue6453 时间: 2013-9-25 09:48

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CD3激发型单抗？你用的是什么厂家的，型号能给一下吗？

作者: 孙帅帅 时间: 2013-9-26 11:26

OKT-3(CD3)肯定是激发型单抗啊！！！

作者: 人杰鬼雄 时间: 2013-10-1 09:11

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谢谢，用做临床的话，我们是不能用含动物成分的试剂的，而且现在加的都是自体血清。

作者: 星空雾雨 时间: 2013-10-8 23:09

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请问你用的是什么培养基

作者: lyj-0017 时间: 2013-11-28 21:08

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能否将你做流式的FSC/SSC图、圈门以及CD3/CD56双参数图发上来看看呢？想向您学习一下，多谢了~

作者: get0715 时间: 2014-4-23 15:44

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想请教一下，如何提高双阳性细胞的比例，我一直培养的CIK数量不成问题，只是双阳性的细胞太少了。可否请教IFN-g因子使用的浓度么？还需要添加其他因子么？

作者: 3254938 时间: 2014-4-23 16:45

用宝日医的GTT551，效果还不错

作者: shamoye 时间: 2014-4-25 15:57

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其实现在做临床的好多也在用含太牛的血清，回输时经过清洗没什么问题的

作者: 青云之上 时间: 2014-4-25 16:19

我们用的跟你的差不多，也是自己添加，一开始用的是公司成套的，后来我们实验室专门做这个的师姐就自己配，效果比公司的还好，方法流程都一样，所以你还是要注意因子配制时的浓度是不是正确，培养箱温度，二氧化碳浓度是否准确等~~~

作者: 草胞 时间: 2014-6-25 16:34

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如果培养中Treg 细胞比例比较高怎么办呢，有什么方法可以降低Treg吗

作者: lyj-0017 时间: 2014-6-26 23:08

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你好，能否说一下你们CD3CD56双阳细胞所用荧光抗体？是只用这两种抗体上机检测的吗？

作者: 刘小白and刘小黑 时间: 2020-6-12 09:37

回复孙帅帅的帖子' @; Z8 b- y. I% O) p2 h$ P! D

老师，可以提供一下试剂厂家和货号吗？谢谢啦

作者: ninacxx 时间: 2020-6-30 15:57

我们用CSTI的ALyS505，自配因子，还可以

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