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标题: 脐带间充质消化问题 [打印本页]

作者: liu3385huan2722    时间: 2013-9-26 09:00     标题: 脐带间充质消化问题

最近细胞出现一个问题,细胞消化的时候成片的掉下来,不像往常一样细胞散开,是什么原因呢?胰酶的问题还是培养基的问题呢?
作者: 2420527    时间: 2013-9-26 09:36

是不是细胞融合度太大了
作者: sdudai    时间: 2013-9-26 09:45

消化时间是多长" d  H" E2 P0 q6 B
胰酶的浓度0 V: y- o* I. m- u. J% ~
养的什么细胞
+ ]$ U4 S; ?+ t多少代8 M% n  G* o8 y: n
状态如何& `( [2 W6 h- _/ ]3 r2 |
还有需要看一下成片掉下来的细胞的活性状态怎么样4 L+ Q4 k: F0 w- p# w% d

作者: liu3385huan2722    时间: 2013-9-26 11:57

回复 sdudai 的帖子: {# i  u1 g/ f/ b6 K9 v+ Y6 C
9 L5 J& c& h! `" q& Q3 ?
1-2min; R8 A1 n( k( S
0.25%的胰酶+0.1%EDTA* G7 Q8 o; B' n' F" u. @0 d
脐带MSC
( |2 }. w5 w6 g+ o7 Z* g6 M代数不等,有P7代的
2 e# W0 a- D1 \. R- {, U/ r状态还可以
9 M0 N6 a1 W; n+ ?0 i  Y# N3 Q掉下来的细胞离心后,重悬,会有絮状的吹不散的细胞团
作者: liu3385huan2722    时间: 2013-9-26 11:58

回复 2420527 的帖子
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刚刚长满吧。。。融合度还可以。。。
作者: sdudai    时间: 2013-9-26 14:24

絮状是细胞碎片还有细胞内蛋白,离心力要小时间稍长一点,尽量不要用枪尖吹打,可以加点血清维持细胞活性。希望有帮助。
7 c. y- S" {5 q$ U1 y3 |  M0 y
作者: deshenglll    时间: 2013-9-26 14:36

回复 liu3385huan2722 的帖子
' I% q. m: j5 r3 j2 E; P, {" e/ }4 Z* R; w2 E
是细胞的问题。培养时间过长,在消化的时候容易成片。用吸管多吹打几次,能吹散的就收集,吹不散的就过滤掉。细胞要及时的观察。




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