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标题: 成体干细胞（AMSC BMSC HSC）的鉴定指标 [打印本页]

作者: Andyhigh 时间: 2013-9-30 23:15 标题: 成体干细胞（AMSC BMSC HSC）的鉴定指标

自己最近在看一些关于成体干细胞的一些文章，有一些疑惑，希望大家能帮我解答下。% X' F1 c6 W. j9 ^" d6 v: S8 U( e
; G; D+ Q- \8 i- `
在获取ESCs或iPSCs后，会对其做一系列的检测：多能性及分化潜能的检测，如AP染色多能性特异性基因（定量）多能细胞表面标记物（免疫荧光染色）Oct4和Nanog的甲基化分析拟胚体畸胎瘤嵌合体···, F0 |1 |: v: ?! r
那在获取ASCs（成体干细胞，如脂肪间充质干细胞骨髓间充质干细胞）后，按理应该也需尽可能进行大量的检测，已确定是否为ASCs？？？

还希望各位能帮我列举下成体干细胞的检测指标，越详细越好！！！

作者: Andyhigh 时间: 2013-9-30 23:17

目前自己了解到的最主要的其分化潜能的检测如成脂成骨成肌的检测···

作者: Andyhigh 时间: 2013-9-30 23:19

如果可以并方便的话，还请大家能提供下文献！！！自己的课题是猪方面的，如果没有相关猪上的文章，小鼠和人的也可以，不过最好是近三年的！！！

作者: zjdoctor 时间: 2013-10-1 01:37

回复 Andyhigh 的帖子( r6 c+ F) N6 H/ v" J

看看我的日志，参考一下。

作者: Andyhigh 时间: 2013-10-1 07:47

回复 zjdoctor 的帖子3 c; [; q- k2 N% l* U
8 ?% b# s) \. S w) d: p
好的，谢谢啊！！！

作者: s02260441 时间: 2013-10-1 10:22

本帖最后由细胞海洋于 2013-10-28 09:35 编辑
6 @ u. D# c$ ~ w5 o
ISCT规制的MSC基本要素，包含：
(1)显微观察) n* G7 z; Y' Z7 W4 _* O* \: t5 X* U
纺锤状贴附型细胞' j/ U' C3 l6 i2 h, L1 [6 b B9 t
(2)表型分析" w+ l0 F& r" j* b! D
Negative: CD34 CD45 HLA-DR
Positive: CD73 CD90 CD105
(3)诱导分化
软骨丶硬骨丶脂肪
) N" m" w+ I9 g. k
Ref:[attach]55922[/attach]

作者: Andyhigh 时间: 2013-10-1 11:18

回复 s02260441 的帖子9 ]3 ]0 X- ~' M4 e- b
, p6 {# a9 y# y
太感谢了···

作者: 绝对忠橙 时间: 2013-10-27 23:53

回复 s02260441 的帖子

这pdf是个好东西啊！

作者: 钰千 时间: 2014-4-18 16:03

我怎么不能下载

作者: awangling 时间: 2015-4-27 21:59

请教大家去除血管和结缔组织，分离的也是脂肪细胞，顶多中间含极少量脂肪干细胞，但离称呼脂肪干细胞还太远！！
大家怎么看？？？你这明显就是脂肪细胞，如何得到高纯度的干细胞？？？？发文章审稿也会问这个问题，光说胶原酶消化后得的细胞就是干细胞，不太让人信服！！请教大家/ s* R- M$ P9 O3 S
怎么回答这个问题？？

作者: Andyhigh 时间: 2015-4-29 20:52

回复 awangling 的帖子1 y3 S4 Y+ ^! n" @

1. 取材消化得到初步的细胞悬液；0 ^7 A/ h% r. p) K8 a

2. 用孔径为80目的尼龙网筛(250μm)过滤细胞悬液，除去未分散的组织块，收集滤液，接着用200目的尼龙网筛(80μm)，过滤掉脂肪细胞，滤液1,200rpm室温离心5min后，弃去悬液部分并用含血清的基础培养液重悬，再用400目(25μm)的尼龙网筛过滤，除去前脂肪细胞。每次过滤后要用少量培养液洗涤滤网，回收残留的脂肪干细胞，首次过尼龙网筛，事先需要用吸头吸取适量培养液压着网面吐液通透；: [7 Z& s/ v4 N( r2 N
, S: q3 b8 a3 v- l& K0 m
3. 最后需要一系列的检测才能最终确定是否为ADSCs；

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