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标题: 本身带有荧光的细胞如何进行流式细胞检测 [打印本页]

作者: aulenuyah    时间: 2013-10-9 17:50     标题: 本身带有荧光的细胞如何进行流式细胞检测

本人构建了一些细胞,分别表达绿色荧光和红色荧光,今天做流式(细胞周期和FITC/Annixin V)的时候,发现对结果会有很大的干扰。
# I1 x' V' o/ ]* L. r3 X# l  U+ D请问,是否有其他的一些试剂盒可以解决这个问题?
, v' U( o1 l1 f0 K, V; i我们使用的是BD的盒子。3 \; R  ^: u) e. a7 R0 `. S
谢谢~~
作者: LiuRoc    时间: 2013-10-9 22:25

回复 aulenuyah 的帖子, U# O8 Z$ g5 j2 @
6 j3 F! A. ]1 y% u( e" f2 X# z
GFP与FITC是同一个通道,肯定不能同时用,将FITC换掉;至于红光,不知其光谱多少、宽窄、走哪个通道?查下然后避开补偿大的荧光抗体应该就可以了。
作者: app_1983    时间: 2013-10-10 09:22

如果你要检测表达绿色荧光蛋白的细胞的话,测凋亡可尝试用7-AAD/Annixin-V试剂盒,这样就可以避开使用与GFP相同的通道;如果是红色荧光蛋白的细胞,就可以使用你之前所说的FITC/Annixin-V试剂盒了,应该没问题的,预祝你实验顺利!
作者: zz091115    时间: 2013-10-16 12:19

GFP走的是FITC RFP是PE或是mecherry通道 细胞周期可以用DAPI 但是PI就不行了 凋亡的7-AAD/Annixin-V就不行了 去找找别的颜色或是单独的Annixin-V 然后自己加荧光二抗 ebioscience有405激光下的 可以去选选 另外做这个实验用BD 的盒子很奢侈啊 国产的信号就足够好了
作者: aulenuyah    时间: 2013-10-17 21:59

回复 zz091115 的帖子2 l6 b; I# z2 ?3 Y; c+ {

# U* v1 q' K; \2 n. O谢谢哦~~我们正在尝试重新构建不带荧光的质粒




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