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标题:
求助最近培养的人hESC特别容易分化,通常第3天就分化了
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作者:
青鸟
时间:
2013-10-17 08:59
标题:
求助最近培养的人hESC特别容易分化,通常第3天就分化了
本帖最后由 细胞海洋 于 2013-10-17 11:08 编辑
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各位大神们,最近培养的人hESC特别容易分化,通常第3天就分化了,求教!
9 j: W% A5 J3 N6 ^# h& q1 U
作者:
waterbubble
时间:
2013-10-17 09:03
是不是你这批冻存细胞时候状态就不好啊
作者:
waterbubble
时间:
2013-10-17 09:05
要是分化细胞不多,可以传代时先消化一下分化的细胞容易掉下来吸走,再消化hESC。这样传两代,就会好了。要不然你实验室有条件的话就刮掉那些分化的细胞。
作者:
waterbubble
时间:
2013-10-17 09:06
不知道对不对,请各位大神批评指正
作者:
SKC-SFC
时间:
2013-10-17 11:16
细胞分化应该跟培养条件不合适有关系或者细胞传代前状态就不好
作者:
watchen198891
时间:
2013-10-17 13:25
要不你试一试手工传代
作者:
wwy551
时间:
2013-10-17 13:28
很可能是你用的MEF feeder不好,可以考虑重做原代MEF,传代不超过三代做feeder。
: W( M% z# d' H& Z- h1 r/ A, D
提高现在培养ES用的培养液中的bFGF浓度,如果分化状况不是特别严重,传代ES之前在显微镜底下标记出来分化的克隆,挂掉。如果分化得很严重了,建议重新找来状态好的ES培养,一定要把MEF搞好。
作者:
zxmflying
时间:
2013-10-17 16:26
是不是培养基有问题?
作者:
青鸟
时间:
2013-10-17 21:20
我们现在用的就是三代以内的MEF,一直都是机械传代,没有用过酶传代。请教你们传代时挑选克隆的经验?
作者:
gzeb
时间:
2013-10-18 09:29
细胞出现分化跟传代是否手工或机械没什么关系,主要是生长环境问题,你是最近几次培养出现过度分化吗?如果以前都没问题,而且你最近使用过的试剂、因子有所变动,就想想是否是这方面的问题,特别是血清和细胞因子
作者:
细胞海洋
时间:
2013-10-18 10:35
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青鸟
的帖子
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, F7 \: H" |9 B+ p! N( D: E+ ?6 H
' g+ Y# d7 F1 b2 U3 `, z: w
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
$ A8 u8 Z, ~) U! q% a
: d9 K, B2 \0 j2 ?0 `
否则他会看不到
# a) H) t2 U) u+ K- i" S
作者:
细胞海洋
时间:
2013-10-18 10:36
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zxmflying
的帖子
/ Q+ D5 N5 q6 c2 C
1 o! b- K% G6 ]& k- D& O1 l* I
看9楼
作者:
nichifanlema2
时间:
2013-10-18 11:07
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青鸟
的帖子
9 F: v, ~7 b7 F8 t8 H8 I' z
! r0 G5 i5 T9 B: w. u e
如果能提供图片更好解答一些。我觉得很可能是feeder密度的问题。
作者:
青鸟
时间:
2013-10-18 17:14
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waterbubble
的帖子
6 K7 R# n0 i$ y( _
0 H& z: J4 n8 Q t
我们一直是机械传代,求你们传代时细胞选择的经验
作者:
青鸟
时间:
2013-10-18 17:15
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gzeb
的帖子
+ H$ i. J! ?7 D, w) g# \
' Q( q9 [) @' ~
我们的试剂一直很稳定,没有随意更改过,同求你们细胞选择的经验
欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)
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