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标题: 求构建具有过表达基因+RNA干扰的慢病毒应用的文章 [打印本页]

作者: zhen022 时间: 2013-10-24 18:59 标题: 求构建具有过表达基因+RNA干扰的慢病毒应用的文章

问了一个生物公司，问是否可以构建一个可以同时表达某种蛋白质的基因和具有RNA干扰作用的小RNA，他们说不行。8 B5 T' L' V* j9 J
刚了解这方面，不知道有没有这方面的报道？这种构建方式是理论上本身就不行还是因为构建很难啊？

作者: michaelgibh 时间: 2013-10-24 22:07

你的意思是把它们构建到同一个载体上吗，理论上可行，实际很难，它们的启动子不同。

作者: zhen022 时间: 2013-10-24 23:30

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嗯对啊，这种是不是启动子有各自的系统啊？那为何慢病毒上可以构建多个标记（这些不都是红色荧光蛋白，荧光素酶蛋白之类的啊）的基因呢

作者: zhen022 时间: 2013-10-25 09:15

ｕｐｕｐｕｐ

作者: zhangweihwz 时间: 2013-10-25 18:09

这是一个载体设计上的问题，完全是可以实现的。# f/ F8 g) [5 F X
用于RNAi的载体上一般会带有筛选标记。将筛选标记换成自己需要表达的目的基因就行了。或者用IRES、2A将筛选标记和目的基因串联起来。同一载体上的H1 promoter 或者U6 promoter 后面仍旧可以插入shRNA。

作者: zhen022 时间: 2013-10-28 17:33

回复 zhangweihwz 的帖子/ ?* F; Y: E# V1 N- E" t+ }4 B) D1 q

求相关技术文献之类的，因为问了公司，都说比较苦难达到两种基因的同时表达！

作者: zhangweihwz 时间: 2013-10-29 11:15

Cas9 载体不就是这样的吗。一个载体上需要表达较大的cas9蛋白，同时还需要表达gRNA。看看cas9的文章就会明白的。

作者: goodboy 时间: 2013-10-29 14:47

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7 ?, u5 B* a+ Y1 t; F
完全没有问题，我们实验室一直在用此系统。好多文章都有报道的。

作者: zhen022 时间: 2013-10-30 14:18

回复 goodboy 的帖子
6 I% D$ l1 M$ G U
跪求几个相关文章，另外不知道你们做的效果基本如何。; k9 S* T, r8 J3 P9 {
我是真心没找到针对性的文献。

作者: goodboy 时间: 2013-11-14 11:00

回复 zhen022 的帖子. V O; e) G5 Z% o6 b( r2 _
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在小鼠上可以成瘤[attach]56870[/attach]

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