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标题: 求助：各位老师请指导：貌似IPS细胞培养过程中分化了 [打印本页]

作者: 922922922 时间: 2013-11-17 19:22 标题: 求助：各位老师请指导：貌似IPS细胞培养过程中分化了

各位老师好，我的IPS细胞培养7天之后，感觉克隆的边缘不平滑了，开始出现不规则的形状，不再像原来的圆形。请问是IPS分化了吗？如果是，应该怎样剔除这些分化的细胞呢？请各位老师和师兄师姐不吝赐教！先谢过了

作者: 细胞海洋 时间: 2013-11-18 09:50

建议上图

作者: lipenix 时间: 2013-11-18 11:02

机械法挑克隆传代，对细胞的损伤较小；或者IV胶原酶消化，时间短一点，分化的部分不会被消化下来。

作者: zm19900508 时间: 2013-12-12 15:50

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iPSCs 很容易分化的，是在2i里养的吗？

作者: 木木泥 时间: 2013-12-13 09:41

如果有分化倾向的话不妨尽快传代改善下生长状态。那些已分化的不能在传代后的干细胞培养基里生长未分化的能在形成克隆

作者: 穿裙子的猫 时间: 2013-12-27 08:44

本帖最后由穿裙子的猫于 2013-12-27 08:46 编辑

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B) s. m) y8 `* v
我的好像也分化了，但是这些貌似分化的细胞可以在干细胞培养基里生长啊！
搞不懂了？过几天之后，这些圆形的细胞中间就会开始形成细小颗粒的细胞，立体生长。( U) E; I: _1 D7 A3 W1 J
我想知道我这是不是干细胞啊？

作者: 穿裙子的猫 时间: 2013-12-31 11:21

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我的一直都是在干细胞培养基中培养的，现在开始变黑，边缘有相对比较大的细胞了。你是怎么办的？

作者: Emma1986 时间: 2014-2-20 10:15

显微操作去掉边缘，保留正常形态的中心部分，继续传代挑选。

作者: yiyi8909 时间: 2014-3-4 15:20

边缘清晰明亮的先用记号笔标出拿枪析出

作者: 922922922 时间: 2014-3-5 09:09

回复 yiyi8909 的帖子

我们是在倒置显微镜下做的。请问您，是不是在培养皿的底部用记号笔标出，然后是在镜下还是不用在镜下，就可以用枪洗出来？期待您的回复,谢谢！

作者: yiyi8909 时间: 2014-3-6 08:20

倒置显微镜下用记号笔画个圈，然后拿超净台中用枪洗出，IPS贴壁很不牢，轻轻一吸就下来了

作者: yiyi8909 时间: 2014-3-6 08:21

回复 922922922 的帖子 S) _9 m/ T& t& A0 v
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洗画圈的中央，画圈需要练习，尽量又小又圆

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