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标题:
实验室台盼蓝溶液
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作者:
指下人生
时间:
2014-2-25 13:12
标题:
实验室台盼蓝溶液
细胞计数的台盼蓝溶液主要成分是什么？在超净台外边计数会被污染吗？
作者:
flylover1221
时间:
2014-2-25 13:31
台盼蓝溶液，是台盼蓝用生理盐水稀释至0.4%的溶液。有潜在致癌危险，请穿实验服并戴一次性手套操作。但在实验台外操作不会产生污染。观察完后及时清理实验台，擦洗计数板和盖玻片就可以了。
作者:
月_幻影
时间:
2014-2-25 13:32
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指下人生
的帖子
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台盼蓝溶液的主要成分当然是台盼蓝啦，细胞计数可以在超净台外进行……
作者:
zhucexiaji
时间:
2014-2-25 14:22
我的观点跟三楼有些不同，养细胞用生理盐水干嘛？下面我跟你说说台酚蓝的具体原理及配置和注意事项。
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台盼蓝染色：
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如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。如果细胞膜完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有一定的帮助。
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用品方法如下：
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1. 配置台盼蓝使用液：
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称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100ml，用滤纸过滤，4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。
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2. 镜检计数：
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首先制备单细胞悬液。并作适当稀释（10 *6 细胞/ml）；然后取9滴细胞悬液移入小试管中，加1滴0.4%台盼蓝溶液，混匀；最后，在三分钟内，用计数板分别计数活细胞和死细胞
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3. 结果：
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镜下观察，死细胞被染成淡蓝色，而活细胞拒染。
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根据下式求细胞活力：
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活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）*100
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4. 注意事项：
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台盼蓝染细胞时，时间不宜过长。否则，部分活细胞也会着色，会干扰计数。
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台盼蓝
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主要用来鉴定原代培养细胞时，
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细胞分离后的存活情况
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台盼蓝
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直接染色，在显微镜下观察即可，活细胞不被染色。方便易用，因此在实验室中比较常用，尤其在心肌细胞原代培养中。台盼兰染色法价格低廉，操作简单，又不用无菌操作，做这个实验只要是把显微镜调好了，细胞浓度调好了就不会有问题，是一个养细胞的入门实验。台酚蓝有较强毒性，使用注意不要污实验台及器具。
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作者:
genetics2014
时间:
2014-2-25 14:48
中英文名称:台盼蓝（Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝；分子式：C34H24N6O14S4Na4；分子量: 960.82，是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性。还常用于细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。
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镜检计数时，单细胞悬液和台盼兰溶液按照1:1混合，然后立即放显微镜下计数，一般是随机计数100个细胞。
作者:
指下人生
时间:
2014-2-25 18:22
谢谢！！
作者:
jyfeicun
时间:
2014-2-26 10:58
呵呵
作者:
dandan9230
时间:
2014-2-27 10:48
在超净台外面操作即可。
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