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标题: 80ml外周全血，能培养出200亿个CIK细胞么？ [打印本页]

作者: cneagle66 时间: 2014-3-3 19:41 标题: 80ml外周全血，能培养出200亿个CIK细胞么？

本帖最后由 cneagle66 于 2014-3-3 20:08 编辑 9 J0 A' m6 d0 B

有人说，80ml外周全血，能培养出200亿（20x10^9）个CIK细胞。请做CIK的同道们解惑！

作者: cantonchn 时间: 2014-3-4 09:08

可以的~~~50ml就可以了，只是你的技术能不能达到而已~~

作者: mtdj1314 时间: 2014-3-4 09:19

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哦？请问你那边用的谁家的培养基？培养时间和终体积分别是多少？

作者: lyj-0017 时间: 2014-3-4 09:25

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约5x10^7扩增至2000x10^7？扩增400倍？跟楼上一样，同问用的什么培养基，培养体系以及培养时间，用的培养瓶还是培养袋？

作者: luyue6453 时间: 2014-3-4 11:07

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没样过那么多，我觉得也就10^10，就挺好的

作者: lyj-0017 时间: 2014-3-4 11:17

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问过一个采集外周血做的同僚，她们是采集50ml外周血，培养三周，数量级一般都是8次方，偶尔会达到9次方

作者: menghy 时间: 2014-3-4 11:17

200亿需要的培养体系要求很高了，随着培养时间的延长是可以达到，但是细胞毒活性的关系考虑了没有呢？一般也就20亿比较正常吧。

作者: cantonchn 时间: 2014-3-4 12:36

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我们其中一种技术采用的是“日本バイオセラピー研究所”的核心技术。其他无法透露。

作者: hwlightning 时间: 2014-3-4 14:38

很容易就200亿啊~~~~我们基本上都是，除非刚刚做完化疗。

作者: lyj-0017 时间: 2014-3-4 16:40

回复 cantonchn 的帖子 R7 O' B" E( B! m5 k7 d( w7 y5 m
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日本人在这方面还是有一定的技术优势的，这点不得不佩服。还想问一下，你们是CD3CD56双阳比例一般能达到多少呢？这个可以透露吧？

作者: lidd14 时间: 2014-3-5 09:35

这个跟个人体质有关系，有的人的白细胞相对多一些，培养出这个数目很有可能，培养基Takara,GT-t551或者561，加人重组IL2，加CD3抗体，加10%的血清（血清用身的血清，分离CIK时，血清留下灭活），加γ干扰素，（只在分离后单核细胞悬浮后加且只加一次），培养14天活性达到最高峰，再养几天也可以，不要超过16天。要在培养袋中养，隔一段时间晃培养袋，令细胞散开，这样细胞长的快。

作者: cneagle66 时间: 2014-3-5 14:08

如果再分出一部分培养DC，估计不会有这么多CIK了

作者: zhrt 时间: 2014-3-17 16:43

正常人的血液是可以的，患者的血液有点难度

作者: yangpan521 时间: 2014-3-18 14:45

对呀同求抽50ml 外周血怎样在体外培养数量至10*10，培养基终体积多少？回输几次？是健康人的血液还是癌症病人的？有木有高人指点一下呀

作者: momoenn 时间: 2014-3-18 15:28

病人身体状态没有问题，这个数应该正常啊。每次回输至少要10^9个吧

作者: yangpan521 时间: 2014-3-19 12:37

回复 momoenn 的帖子( U7 I0 Z e4 T5 N5 A( M
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我培养不到呀总体积1.2L,共放液6次，每次都在10*8左右，达不到是10*10，培养基是GT-T551

作者: momoenn 时间: 2014-3-20 09:29

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平均一次放液200ml？肯定不够啊，除非你细胞密度能达到5X10^6个/ml。另外要求应该是每次回输细胞量达10^9个，每疗程达5X10^9个。

作者: lyj-0017 时间: 2014-3-20 11:01

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只不过是想知道培养基、培养时间之类的，又不涉及具体试剂和工艺流程，没必要隐藏得这么深吧？

作者: 筱筠 时间: 2014-4-12 08:48

完全可以的，40-50ml足够了

作者: 3254938 时间: 2014-4-13 14:48

目前培养的是50ml，13天了，突破了百亿，

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