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标题: 293FT 细胞可以测病毒滴度吗? [打印本页]

作者: harryyuan    时间: 2014-3-7 11:00     标题: 293FT 细胞可以测病毒滴度吗?

293FT 细胞可以测病毒滴度吗?
作者: yiyi8909    时间: 2014-3-7 17:31

293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失,从而影响实验结果。如果一个实验室新得到的293细胞是邮寄得到的并且细胞在培养瓶中,就需要让细胞沉降几天时间,因为大量细胞会漂浮在培养液里。2 A7 O7 _3 F$ \
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来源:人体肾脏 形态:上皮细胞 生长特性:贴壁 注释:该细胞含腺病毒5 DNA 。
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4 S" J, A2 u+ h. Q  j4 V培养液:完全培养基。2 ?7 t5 h9 z+ R/ g# l0 |

7 P, t' r3 }) y* e# m$ s8 [传代: 吸去培养液。 胰酶消化,以1:2到1:4为宜,传代期间培养液2-3天更换1次。
0 P4 _( k6 U9 n2 I冻存:90%培养液+10%DMSO冻存于液氮。& Q1 \& X9 B" }( f

) t! D- w3 s" E* [0 j293A:是293中后来又建的细胞亚株,这个A是adhere的意思,就是说293倾向于形成单层细胞(monolayer),它比293好的地方是在做计算病毒数量的空斑试验(plaque assay)293A是均匀的一层,没有细胞重叠和细胞空隙(hole),就这个意思,这个A所对的是293S(suspension).
8 B( k& [  ?( M0 ~293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞,表达转染的腺病毒5的基因。
4 O% C' c* R* J293T细胞表达 E1A蛋白,S40大T抗原,含有S40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。
& @7 ~+ v+ q: s3 ^; q9 L  w293FT细胞能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞,组成性表达 E1A 和 E1B 蛋白。




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