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标题: 急救!!!转染的细胞出现这种,但感觉不是,能帮忙分析一下原因吗? [打印本页]

作者: 葱葱    时间: 2014-3-23 18:33     标题: 急救!!!转染的细胞出现这种,但感觉不是,能帮忙分析一下原因吗?


6 v) I1 Z0 C/ n6 m急救!!!转染的细胞出现这种,但感觉不是,能帮忙分析一下原因吗?( y& `8 {8 ?$ u2 N; N0 A5 i* z. i

: o1 h. ^; m* N! R3 K补充内容 (2014-3-23 21:49):6 w4 P; c/ d0 [: v# _3 c7 D+ m
我实验做的是iPS的建立。8 C; u! X1 q& S9 P9 P* H

2 d2 Z- C5 T" e2 e补充内容 (2014-3-23 21:50):
4 [, \% A- z4 u7 \. ^4 e这是iPS的前期吗?
作者: 碧螺春的秋天    时间: 2014-3-24 00:16

细胞看着不对啊,是不是污染了?ips 前期形变不应该是这样的,前期会先经历MET,细胞会变小,看上去比较健康
作者: zm19900508    时间: 2014-3-24 08:22

你做的是转染还是感染啊?包装病毒的过程是转染,包装好的病毒加入MEF里是感染
作者: 刘慧瑾    时间: 2014-3-24 08:41

应该就是,你可以再重复。
作者: cantherinezhao    时间: 2014-3-24 08:47

不是污染!有可能是肿瘤化
作者: cantherinezhao    时间: 2014-3-24 08:47

细胞数量以及层数过多造成大量堆积
作者: 希望之光    时间: 2014-3-24 09:41

如果是感染了病毒的话应该是感染 ,感染之后一周左右就有可能出现克隆,当然要看你的感染方法!如果转染的话可能与细胞铺的密度有关,但感觉不像,因为克隆太均均一了。
作者: wanglimaomao    时间: 2014-3-24 10:34

不管是不是,先把克隆挑了,传代,如果仍能形成,就是ips。小鼠的一般是长成球形,看不清每个细胞结构的
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:17

非常感谢!!!因为太密,所以我把整盘细胞传代了,结果发现了小黑虫,估计有这方面的影响。我就扔了。再做做试试吧!!!郁闷呐!!!
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:20

我用的是电转染。这是转染一周出现的。
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:22

回复 刘慧瑾 的帖子6 B  v* U6 b1 `% r; k% z
. [  q. Q- ]" [
谢谢!!!我再做做试试吧!!!
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:24

回复 cantherinezhao 的帖子
7 K+ _' Z: D3 u; C' q8 p! W6 q9 a
谢谢!!!电转也会有肿瘤化吗?
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:26

回复 cantherinezhao 的帖子
' ?# _: b6 w& c" ~! ^; v
) Q  n0 B( q6 F, F( Z: N后来,我把整盘传代了,密度不大了,又出现这种克隆了。
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:28

回复 希望之光 的帖子
  u8 G8 E. K0 `. n# y! |- ^6 S& R! X5 q% _% z4 B3 |
我用的是电转!!!你有那种克隆初期的图片吗?
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:31

回复 wanglimaomao 的帖子
$ n3 g+ K( |1 J0 Q" a8 Z& A
( Y+ O5 X4 [8 J4 z$ X4 Y2 k2 c6 o谢谢。我是个新手。请问干细胞长在一起,一个紧贴着一个,而且是球状,那消化时会散成一个一个的吗?
作者: 希望之光    时间: 2014-3-24 12:54

回复 葱葱 的帖子
  H) c* f: e& _
5 {1 A% L' U: i现在不在实验室,所以没法给你提供照片啊!电转的话可能是细胞量是不是过大呢 你在重复一次 如果还是这样的话你就得考虑是iPS细胞了
作者: sirius_zou    时间: 2014-3-24 13:28

回复 葱葱 的帖子
9 z. K+ Q* D* }* z( @+ i. O: L& k
lz好,你电转的什么细胞呢?我的什么质粒?
作者: cantherinezhao    时间: 2014-3-24 18:58

回复 葱葱 的帖子
, ?( {5 f7 P/ f+ t* f0 U# F: J: M" w/ g/ b8 Z) L
电转是什么意思
作者: cantherinezhao    时间: 2014-3-24 18:58

回复 葱葱 的帖子" w- d8 z6 `/ ~# Z3 [( f
3 {8 n1 Y. _* Y8 ~) z
你的细胞生长很旺盛速度很快啊,传代的时候要吹散
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 22:14

回复 sirius_zou 的帖子0 [- ?, ]2 b  i" ~

6 h: F0 G" q% ]7 ~3 p8 e- X% ^成纤维细胞。质粒是老师的。好像是买的吧!!!
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 22:15

回复 cantherinezhao 的帖子
# [  O6 K) Y  b1 L6 k: y) J# P5 {+ d  V0 e' b; \& k
用电转仪转的。
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 22:16

回复 cantherinezhao 的帖子. F2 B( j6 }1 E5 s- l9 b) k! |

; u* A9 Y" R0 K$ g* O+ s# e6 f初始密度有点大了。所以很快铺满。
作者: wanglimaomao    时间: 2014-3-25 10:39

回复 葱葱 的帖子. E1 ~: i  r) n% c) P' o

8 Y; q+ @: T; {3 ^. a$ @  `1 k就是要散开,才能形成单克隆。挑的时候小心点,尽量去除周围的杂细胞。会由单个细胞形成新的克隆的
作者: 葱葱    时间: 2014-3-25 16:48

回复 wanglimaomao 的帖子
0 {& G: g$ A1 Z- B0 f( w0 j; O% d9 g) e) j, \0 a
嗯,还在观察,发现疑似克隆,我再挑挑看看!!!谢了!
作者: cantherinezhao    时间: 2014-3-26 08:08

回复 葱葱 的帖子3 X# V6 d/ i3 U1 \) G- z

/ s5 _; \- }1 @+ j3 `7 r/ t多种几瓶啊,密度就小点了




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