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标题: 急救!!!转染的细胞出现这种,但感觉不是,能帮忙分析一下原因吗? [打印本页]

作者: 葱葱    时间: 2014-3-23 18:33     标题: 急救!!!转染的细胞出现这种,但感觉不是,能帮忙分析一下原因吗?


: c6 U  ]; r" H* ]2 a1 J急救!!!转染的细胞出现这种,但感觉不是,能帮忙分析一下原因吗?
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补充内容 (2014-3-23 21:49):4 M% M9 _! t$ _0 d
我实验做的是iPS的建立。% a- D  H5 X, C4 D
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补充内容 (2014-3-23 21:50):# m/ a% `3 C: e. }& ^* ^
这是iPS的前期吗?
作者: 碧螺春的秋天    时间: 2014-3-24 00:16

细胞看着不对啊,是不是污染了?ips 前期形变不应该是这样的,前期会先经历MET,细胞会变小,看上去比较健康
作者: zm19900508    时间: 2014-3-24 08:22

你做的是转染还是感染啊?包装病毒的过程是转染,包装好的病毒加入MEF里是感染
作者: 刘慧瑾    时间: 2014-3-24 08:41

应该就是,你可以再重复。
作者: cantherinezhao    时间: 2014-3-24 08:47

不是污染!有可能是肿瘤化
作者: cantherinezhao    时间: 2014-3-24 08:47

细胞数量以及层数过多造成大量堆积
作者: 希望之光    时间: 2014-3-24 09:41

如果是感染了病毒的话应该是感染 ,感染之后一周左右就有可能出现克隆,当然要看你的感染方法!如果转染的话可能与细胞铺的密度有关,但感觉不像,因为克隆太均均一了。
作者: wanglimaomao    时间: 2014-3-24 10:34

不管是不是,先把克隆挑了,传代,如果仍能形成,就是ips。小鼠的一般是长成球形,看不清每个细胞结构的
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:17

非常感谢!!!因为太密,所以我把整盘细胞传代了,结果发现了小黑虫,估计有这方面的影响。我就扔了。再做做试试吧!!!郁闷呐!!!
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:20

我用的是电转染。这是转染一周出现的。
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:22

回复 刘慧瑾 的帖子  e/ p- a9 q5 i! V6 k7 ?4 \1 q
. g# h9 _- |0 N+ F
谢谢!!!我再做做试试吧!!!
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:24

回复 cantherinezhao 的帖子% ]& j3 q" L7 N: u0 H
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谢谢!!!电转也会有肿瘤化吗?
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:26

回复 cantherinezhao 的帖子7 M, q& S; u5 B( f5 a$ u
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后来,我把整盘传代了,密度不大了,又出现这种克隆了。
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:28

回复 希望之光 的帖子
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我用的是电转!!!你有那种克隆初期的图片吗?
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 11:31

回复 wanglimaomao 的帖子
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2 `& O3 u8 G4 @谢谢。我是个新手。请问干细胞长在一起,一个紧贴着一个,而且是球状,那消化时会散成一个一个的吗?
作者: 希望之光    时间: 2014-3-24 12:54

回复 葱葱 的帖子% A9 L  I  x" Z( v) w
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现在不在实验室,所以没法给你提供照片啊!电转的话可能是细胞量是不是过大呢 你在重复一次 如果还是这样的话你就得考虑是iPS细胞了
作者: sirius_zou    时间: 2014-3-24 13:28

回复 葱葱 的帖子! N- `' h8 `( r( m8 C

* J* R4 v2 B5 H$ Y3 n3 e- zlz好,你电转的什么细胞呢?我的什么质粒?
作者: cantherinezhao    时间: 2014-3-24 18:58

回复 葱葱 的帖子; \! I; h9 f; |2 M$ S- O7 ~5 o

- `9 u) d& i: ]( v% O8 V* d电转是什么意思
作者: cantherinezhao    时间: 2014-3-24 18:58

回复 葱葱 的帖子
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你的细胞生长很旺盛速度很快啊,传代的时候要吹散
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 22:14

回复 sirius_zou 的帖子* c1 V3 d6 s4 o$ l! ^) H, v1 m
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成纤维细胞。质粒是老师的。好像是买的吧!!!
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 22:15

回复 cantherinezhao 的帖子- y5 N. b$ s+ o$ o5 O$ X
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用电转仪转的。
作者: 葱葱    时间: 2014-3-24 22:16

回复 cantherinezhao 的帖子9 N9 s: I, V9 V
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初始密度有点大了。所以很快铺满。
作者: wanglimaomao    时间: 2014-3-25 10:39

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就是要散开,才能形成单克隆。挑的时候小心点,尽量去除周围的杂细胞。会由单个细胞形成新的克隆的
作者: 葱葱    时间: 2014-3-25 16:48

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* T; L. Q8 {( l嗯,还在观察,发现疑似克隆,我再挑挑看看!!!谢了!
作者: cantherinezhao    时间: 2014-3-26 08:08

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  H1 v0 a3 U4 O5 e多种几瓶啊,密度就小点了




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