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标题: 细胞细菌污染之后有什么紧急补救措施吗？ [打印本页]

作者: 18704632883 时间: 2014-4-24 10:10 标题: 细胞细菌污染之后有什么紧急补救措施吗？

在建立iPS的过程中不小心细胞污染了，如果重新诱导又会花费大量的时间和资源，不知道各位高手是否有补救的好方法呢？难道只能扔掉重做吗？

作者: zhen022 时间: 2014-4-24 10:19

这个基本有很少的解决办法，不过我觉得你可以通过反复清洗，利用iPSC基本贴壁的原理可以洗去污染的细菌，然后消化后进行无限稀释的手段，把细胞稀释成几乎为100微升一个，接种在96孔板中，等待奇迹的将领：细菌被除去，iPSC通过一个细胞长成单克隆。3 \/ T# L. U P3 T H# T

别问我怎么知道的，上面都是瞎编的，因为我要是细胞污染了，基本等于说重新再来吧:'(

作者: 18704632883 时间: 2014-4-24 10:28

回复 zhen022 的帖子
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:L 不过还是谢谢你了

作者: zhen022 时间: 2014-4-24 10:39

回复 18704632883 的帖子% T8 B" g: N% x
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对你细胞的不幸表示sorry

作者: 青云之上 时间: 2014-4-24 10:43

加点抗生素试试~~~

作者: hswu01 时间: 2014-4-24 14:00

小心吸掉旧培养基，用带双抗的PBS洗一遍，吸掉，用双抗洗三遍，最后一遍不吸走，放入培养箱中5min，至时间，吸去双抗，再用带双抗的PBS洗一遍，吸去PBS，加带有2倍双抗的培养基，放入培养箱继续培养，第二天观察。如果第二天污染消除，则用含有一倍双抗的培养基继续培养；第二天仍有污染，用前面的方法在试一次。个人经验仅供参考哈。

作者: Ethan-Liu 时间: 2014-4-24 15:58

重新开始把超级讨厌这种情况

作者: cicadacjk 时间: 2014-4-24 22:16

细胞污染只能扔掉，连这都要补救，这种细胞培养的态度后面iPS铁定也养不好的

作者: zb_ming 时间: 2014-4-25 13:28

回复 hswu01 的帖子 x1 Y) V0 T& z1 k7 H% F
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效果不行吧，细胞已经弥留了，再加上这么折腾，细胞肯定挂啊。

作者: zb_ming 时间: 2014-4-25 13:29

扔掉吧，意义不大了补救。你可以平行做实验呀，多几个批次，可以降低风险的。

作者: jojo1988509 时间: 2014-4-25 16:26

污染了就算你拿来做了，以后出结果了也说不准是什么问题啊，你还是重头来吧。

作者: Tivah 时间: 2014-4-25 17:12

回复 cicadacjk 的帖子

同意。尤其是做表型，做出来也不准。
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补充内容 (2014-4-25 17:12):8 g" n3 o. j# |7 n
并且污染的细胞对于同一个培养箱中其他细胞的威胁有点大……

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