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标题: 求助脐带间充质干细胞培养基 [打印本页]

作者: dujun033 时间: 2014-5-26 14:51 标题: 求助脐带间充质干细胞培养基

大家在培养脐带间充质干细胞的时候，所用的培养基里面需要加入什么因子

作者: leaderhou 时间: 2014-5-26 15:18

脐带间充质干细胞和脂肪、胎盘来源的间充质干细胞的培养基我们这用的都是一样的，α-MEM培养基添加10%FBS、100UI/ml双抗、10ng/mlbFGF

作者: Tim 时间: 2014-5-26 15:35

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没必要加那么多！血清就可以！抗生素加多了！抑制细菌生长！不代表不生长！容易误判！

作者: dujun033 时间: 2014-5-26 17:14

回复 Tim 的帖子1 V( ]6 x- G7 `* g* L

但是培养过程需要让细胞完好贴壁以及防止细胞分化，这些都不需要考虑嘛？听朋友说不加东西也能养，但是冻存后复苏细胞活率低容易出问题，但是我们这边加了2种因子就从来没出现过这问题，当然不知道加了什么，所以想请前辈们指导指导

作者: dujun033 时间: 2014-5-26 17:14

回复 leaderhou 的帖子: g8 Q- h; C# y, ?; R7 i* w

谢谢

作者: luyue6453 时间: 2014-5-27 17:43

回复 dujun033 的帖子 ^4 R* n0 u6 ~6 B
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就用培养基就可以了，不需要加额外的因子。

作者: 牵着蜗牛去散步 时间: 2014-5-28 14:59

添加额外的刺激因子可以适当的提高间充质的数量，这个是肯定的。只加血清生长的数量不多。

作者: Amanda121201 时间: 2014-5-28 15:09

不需要加因子呀，用全培养基就足够了

作者: hefan1234 时间: 2014-5-28 17:07

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我们实验室培养基中加血清替代物、双抗、谷氨酰胺，脐带间充质干细胞长得很快，我看论坛上其他实验室培养脐带间充质干细胞到传代后铺满一般要20天左右，我们一般13-15天就可以了。

作者: zhrt 时间: 2014-6-5 09:56

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血清替代物？谷氨酰胺培养基中不是有吗？

作者: hefan1234 时间: 2014-6-5 16:56

回复 zhrt 的帖子 \7 t& R7 u( ^4 k, `, A' M
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我们用的是Gibco培养基要自己加血清替代物、双抗、谷氨酰胺，不知道你用的是什么培养基

作者: zhrt 时间: 2014-6-6 08:19

回复 hefan1234 的帖子! l. a% g9 O* ]8 l' c
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hyclone 的DMEM/F12

作者: gd541767393 时间: 2014-6-10 13:31

我们一般是用的基础培养基和血清替代物，其中含有一些EGF和FGF

作者: wangshan 时间: 2014-6-10 14:28

我们用DMEM+10%FBS，100UI/ml双抗，胎盘来源的MSC和脐带来源的MSC培养条件一样，不需要生长因子。

作者: cloud100 时间: 2014-6-10 21:13

回复 hefan1234 的帖子" m* Y9 U- s# w
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请问你们养的期待干细胞，具体培养基配方是怎样的？？
谷氨酰胺加多少剂量？我买的DMEM/F12有2.5mM的谷氨酰胺，还要加吗？

作者: wangshan 时间: 2014-6-16 20:41

我们用的是corning 瓶装培养液,DMEM，培养液配方不是很明确的，是低糖的，培养液含有谷氨酰胺，不需要再额外添加。

作者: gd541767393 时间: 2014-6-25 10:24

现在市面上间充质培养的培养基有好多专业配置好的，直接就能使用的. |/ ]/ K6 ]0 p; ^' x- {" U7 U: l+ F
我们一般是基础培养基，加血清、FGF、EGF

作者: 听不到 时间: 2014-7-14 10:36

不用加生长因子，脐带MSC长得很快的

作者: dujun033 时间: 2014-8-5 09:19

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我们这边加2种因子，分离后5天换液，10天换液，12天传代，14天冻存，快多了吧

作者: hefan1234 时间: 2014-8-6 08:28

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嗯，是挺快的，我们一般也是两周左右，如果不考虑细胞量的话，是可以快一点的。。。

作者: hefan1234 时间: 2014-8-6 08:37

回复 cloud100 的帖子
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不好意思，现在才回，我们是要自己加谷氨酰胺的，你们购买的DMEM有谷氨酰胺的话应该是不用加了，不过你也可以拿一瓶加5ml谷氨酰胺，取一份细胞传代的时候，一半用加过谷氨酰胺的培养基，一半用不加的培养基，看一下细胞的培养效果，如果加过谷氨酰胺的培养基中细胞生长状况要明显好于不加的，我觉得还是有必要加谷氨酰胺的，如果效果不明显，那就没必要加了。。。

作者: cloud100 时间: 2014-8-6 09:55

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好的，谢谢！

作者: hameln 时间: 2014-8-6 10:21

我们是没有加其他的感觉长的也还行啊

作者: yongganyixie 时间: 2014-8-19 22:40

我们就用培养基加血清就好了呀，没有额外加因子，一般15天左右，细胞就长满了

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