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标题: 求助 脐带间充质干细胞培养基 [打印本页]

作者: dujun033    时间: 2014-5-26 14:51     标题: 求助 脐带间充质干细胞培养基

大家在培养脐带间充质干细胞的时候,所用的培养基里面需要加入什么因子
作者: leaderhou    时间: 2014-5-26 15:18

脐带间充质干细胞和脂肪、胎盘来源的间充质干细胞的培养基我们这用的都是一样的,α-MEM培养基添加10%FBS、100UI/ml双抗、10ng/mlbFGF
作者: Tim    时间: 2014-5-26 15:35

回复 dujun033 的帖子  d' i3 ?* t& T. Y

' `9 l+ ^/ [: }' U: R" @没必要加那么多!血清就可以!抗生素加多了!抑制细菌生长!不代表不生长!容易误判!
作者: dujun033    时间: 2014-5-26 17:14

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) y* _  Z3 E" S' c
: T2 d+ _% Z* U$ r但是培养过程需要让细胞完好贴壁以及防止细胞分化,这些都不需要考虑嘛?听朋友说不加东西也能养,但是冻存后复苏细胞活率低容易出问题,但是我们这边加了2种因子就从来没出现过这问题,当然不知道加了什么,所以想请前辈们指导指导
作者: dujun033    时间: 2014-5-26 17:14

回复 leaderhou 的帖子" F6 H- L" q% r: x' {; t
7 Q( ?2 n2 l6 {; ]
谢谢
作者: luyue6453    时间: 2014-5-27 17:43

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/ l* `& u- j$ m$ b0 b: z: [9 G; d, k. U! @) `. R7 h3 t6 r* `
就用培养基就可以了,不需要加额外的因子。
作者: 牵着蜗牛去散步    时间: 2014-5-28 14:59

添加额外的刺激因子可以适当的提高间充质的数量,这个是肯定的。只加血清生长的数量不多。
作者: Amanda121201    时间: 2014-5-28 15:09

不需要加因子呀,用全培养基就足够了
作者: hefan1234    时间: 2014-5-28 17:07

回复 dujun033 的帖子" I8 W# x+ d# u( ^. u# p( p
6 ?* {  r! T2 B. N$ T4 `- V
我们实验室培养基中加血清替代物、双抗、谷氨酰胺,脐带间充质干细胞长得很快,我看论坛上其他实验室培养脐带间充质干细胞到传代后铺满一般要20天左右,我们一般13-15天就可以了。
作者: zhrt    时间: 2014-6-5 09:56

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6 g/ A1 C5 G# b7 m: \; r6 d2 t- ^% `6 S" y$ i+ s* J' o4 D9 G: C& H
血清替代物?谷氨酰胺培养基中不是有吗?
作者: hefan1234    时间: 2014-6-5 16:56

回复 zhrt 的帖子
& @: K7 P8 s7 e% d
. [) [" Q3 K- D2 W9 \% D" v我们用的是Gibco培养基要自己加血清替代物、双抗、谷氨酰胺,不知道你用的是什么培养基
作者: zhrt    时间: 2014-6-6 08:19

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5 a8 F  r- ~; w7 ^; u4 k. ~5 h' q/ e( u" H8 z; J4 a
hyclone 的DMEM/F12
作者: gd541767393    时间: 2014-6-10 13:31

我们一般是用的基础培养基和血清替代物,其中含有一些EGF和FGF
作者: wangshan    时间: 2014-6-10 14:28

我们用DMEM+10%FBS,100UI/ml双抗,胎盘来源的MSC和脐带来源的MSC培养条件一样,不需要生长因子。
作者: cloud100    时间: 2014-6-10 21:13

回复 hefan1234 的帖子& I0 z  P. W- r* v
; l. z9 W2 Q, J3 Y/ z
请问你们养的期待干细胞,具体培养基配方是怎样的??
9 v; T1 _# m. j! A/ q: O谷氨酰胺加多少剂量?我买的DMEM/F12有2.5mM的谷氨酰胺,还要加吗?
作者: wangshan    时间: 2014-6-16 20:41

我们用的是corning 瓶装培养液,DMEM,培养液配方不是很明确的,是低糖的,培养液含有谷氨酰胺,不需要再额外添加。
作者: gd541767393    时间: 2014-6-25 10:24

现在市面上间充质培养的培养基有好多专业配置好的,直接就能使用的1 K3 m$ f, J2 J- ?$ j
我们一般是基础培养基,加血清、FGF、EGF
作者: 听不到    时间: 2014-7-14 10:36

不用加生长因子,脐带MSC长得很快的
作者: dujun033    时间: 2014-8-5 09:19

回复 hefan1234 的帖子
: i" w, C3 D9 k+ L4 ?2 H: F
, K3 d% n6 p# H我们这边加2种因子,分离后5天换液,10天换液,12天传代,14天冻存,快多了吧
作者: hefan1234    时间: 2014-8-6 08:28

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嗯,是挺快的,我们一般也是两周左右,如果不考虑细胞量的话,是可以快一点的。。。
作者: hefan1234    时间: 2014-8-6 08:37

回复 cloud100 的帖子
0 m4 D7 ]8 _4 m* O. |2 J' W" N
; D6 P* ^; Y$ z- d不好意思,现在才回,我们是要自己加谷氨酰胺的,你们购买的DMEM有谷氨酰胺的话应该是不用加了,不过你也可以拿一瓶加5ml谷氨酰胺,取一份细胞传代的时候,一半用加过谷氨酰胺的培养基,一半用不加的培养基,看一下细胞的培养效果,如果加过谷氨酰胺的培养基中细胞生长状况要明显好于不加的,我觉得还是有必要加谷氨酰胺的,如果效果不明显,那就没必要加了。。。
作者: cloud100    时间: 2014-8-6 09:55

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好的,谢谢!
作者: hameln    时间: 2014-8-6 10:21

我们是没有加其他的 感觉长的也还行啊
作者: yongganyixie    时间: 2014-8-19 22:40

我们就用培养基加血清就好了呀,没有额外加因子,一般15天左右,细胞就长满了




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