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标题: 请教如何提高CIK的cd3cd56的阳性率呢 [打印本页]

作者: levell 时间: 2014-5-28 16:01 标题: 请教如何提高CIK的cd3cd56的阳性率呢

请问如何能够提高CIK细胞的CD3CD56的表达，勤补液？还是提高某种因子的浓度。我就是常规D0加IFN-g1000U/ML，D1加CD3mAb（50ng/ml）、CD28mAb（50ng/ml）、IL-1A（100U/ml）、IL-2（500U/ml），此后补液只加IL-2（只加入新补液体积的量），细胞增殖、成团都比较好，就是CD56的阳性率不高，我都要怀疑抗体的问题了。
谢谢大家

作者: 牵着蜗牛去散步 时间: 2014-5-28 16:07

和勤补液没有关系，是否能够高度的表达CD56取决于你加入的刺激因子和浓度。

作者: levell 时间: 2014-5-28 16:21

我觉得我加的浓度都是常规方法，应该没有什么问题啊，试剂除了T551外都是进口的，不明白怎么回事啊

作者: 牵着蜗牛去散步 时间: 2014-5-28 16:32

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T551应该也是进口的。日本TAKARA公司

作者: lyj-0017 时间: 2014-6-4 11:39

回复 levell 的帖子, Z4 r9 R+ ~( ]* @, o! V4 |3 P
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这个问题应该与各家的工艺有关，使用的因子浓度大家都差不多，关键是这些因子买的都是哪个公司的，以及各家公司因子的组合，再一个就是表型检测的问题，抗体是否是大家都在用的克隆号？流式设置是否正确？后续分析是否正确？这都需要一点一点摸索

作者: lyj-0017 时间: 2014-6-27 09:11

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另外，想问一下，你做流式用的只有CD3和CD56两种荧光抗体吗？这两种抗体都标的是哪种荧光染料呢？

作者: levell 时间: 2014-7-1 10:35

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不是啊，还有CD4\CD8，只是这两个做了个双标，一个用PE，一个是FITC

作者: levell 时间: 2014-7-1 10:42

回复 lyj-0017 的帖子- Z" `& q, V0 h( }/ D2 K

说的很详细，我再摸索吧，谢谢！

作者: lyj-0017 时间: 2014-7-1 18:41

回复 levell 的帖子# t9 g! ~5 W' S, e' X1 W
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那你CD3和CD56是如何做的补偿调节呢？

作者: levell 时间: 2014-7-2 08:23

一共四管，PE IgG2a/FITC IgG1，PE IgG2a/CD56，FITC IgG1/CD3，CD3/CD56

作者: cjsbaicai 时间: 2014-7-2 08:35

与文献报道，你在第一天多加了CD28mAb因子，细胞培养效果好很多吗

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