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标题: 干细胞培养是不是要特殊培养基 [打印本页]

作者: Zhouhaiyan12388    时间: 2014-6-5 05:49     标题: 干细胞培养是不是要特殊培养基

如题
作者: sycdegcb    时间: 2014-6-16 16:01

干细胞培养一般是DMEM高糖、DMEM/F12等营养较全面的基础培养基,加一些相关细胞因子比如LIF,EGF,bFGF等。根据培养细胞类型添加血清或血清替代物如B27,KSR等。基础培养基+细胞因子+血清(+饲养层)+双抗。
作者: cyz3057    时间: 2014-6-20 17:02

可以在相关文献 找到培养基的配制 作为参考 干细胞培养不会使用血清 血清会使得细胞分化
作者: xunway    时间: 2014-7-9 15:42

培养基 有所 不同的 7 a. A9 |3 ]% c3 ?
要参考文献 和别人的 经验 添加东西
+ [9 W9 c# i, R/ P4 F当然 你也可以自己摸索 比较花时间
作者: s02260441    时间: 2014-7-9 15:57

回复 Zhouhaiyan12388 的帖子
# u& r+ x2 ~. G7 ?
. V! h6 q4 E% n1 M3 x0 d8 _现在也有许多厂家直接出培养干细胞的kit' x+ E4 B. }5 r) y6 H  o
  h' A  k7 M  Z, ?; k" t
Stemcell Technology, r' F% L- }$ V0 \; b6 ]* G. h
' H$ U/ |# M4 H7 s8 o/ j2 `
Life Technologies
, Z. h, z. _( e
& O+ p* i, p/ t* o" z+ ]" H; \8 O" Z& R  k1 a# _* X/ a. ^. p

8 M, N6 E% x- ^6 g! {这边只列了几个,其实还很多,可以自己再找找 8 s+ E) {4 D: J! M0 A/ r7 F

) ~, {* a$ P$ v4 g8 R! I
作者: yanglixia1984    时间: 2014-7-15 11:56

回复 sycdegcb 的帖子
; |6 O. v* ?. O" h, o
$ d+ i* k% o6 u( }2 u; y干细胞培养一般需要加什么培养因子
作者: jjjddf    时间: 2014-7-21 16:28

我们用的甲基纤维素
作者: liuyanli123    时间: 2014-7-25 20:16

加各种因子是否会影响干细胞的干性,而使其分化成为别的成熟细胞。上面所提到的EGF,bFGF等就能够诱导干细胞成为类神经细胞,一般直接用培养基就行,不用加因子
作者: cyagen    时间: 2014-7-25 23:48

要看你是培养的哪种干细胞落,一般培养干细胞的基础培养基和血清都是筛选的。
作者: tess1029    时间: 2014-8-29 11:22

在选择干细胞培养基时,您要考虑干细胞的潜在应用、您的细胞所需的培养基组分,以及培养基的可靠性和质量。在大部分情况下,培养基是根据干细胞的来源而设计的,如胚胎、神经或造血。在选择培养基时,必须记住,它要能实现干细胞状态下的细胞扩增,同时又不会损害其分化能力。如果有多个培养基满足您的要求,那么您再考虑使用的简单程度以及成分是否确定。
作者: 2005y19    时间: 2015-12-1 08:53

维持的话,早期用feeder养时,用的KSR加bFGF;现在有更便捷的培养基,E8和mTSR1,后者更贵,一瓶500毫升2000多。B27和N2一般在进行分化protocol时才用。
作者: liqiang8589    时间: 2016-1-13 23:17

本帖最后由 liqiang8589 于 2016-1-13 23:18 编辑
3 t) Y4 x' j% M/ Q( _6 _9 @
$ j, O6 a- E2 d( R  G2% --- FBS; X$ B" g4 F6 F' \3 }! m+ d  x  A
5 ng/mL --- rh FGF basic- F' a* |$ J3 V' F
5 ng/mL --- rh FGF acidic
( S( t- X$ ~& o: l  R+ }5 ng/mL --- rh EGF$ x$ c% p; D* P8 U' O% M6 ]
2.4 mM --- L-Alanyl-L-Glutamine
$ Y% p+ O0 [$ r0 ^4 s8 z2 \) I---------------------------------------------* O; t' o# d! n6 g
+双抗
) ?3 _1 v! Q9 n: e9 |' s这个是在ATCC网站上找到的---低血清人间充质干细胞培养液
6 P, k# |5 u* f7 ?& c现在论文好像都都在用DMEM-low glucose培养液为基本培养液# l8 q6 _* @+ R# |

作者: saliai2016    时间: 2016-1-19 14:58

干细胞培养一般是DMEM等营养较全面的基础培养基,加一些相关细胞因子比如kGF,EGF,bFGF等。根据培养细胞类型添加血清。基础培养基+细胞因子+血清(+饲养层)+双抗。
作者: 蚂蚁上树    时间: 2016-5-12 15:22

可以参考文献或者专利,有的干细胞比较好养,基础培养基DMEM/F12加血清就好了,但是血清中的一些成分会导致细胞衰老或者分化,如果传的代数不多,基础培养基就可以满足培养要求。如果传代数多,或者对细胞质量或者数量要求比较高,就可以用专用干细胞培养基,那些培养基会要求加少量血清或者不加血清,对细胞分化影响比较小
作者: 13710232281    时间: 2016-8-26 19:21

哇!感觉这个帮助很大!但还是没有弄明白是加血清还是不加 ?
作者: 吃呆猫    时间: 2016-11-17 14:27

我们实验室用的是
6 g1 U8 k6 [6 @15%ksr
" ^7 ?! \# ^/ f. @, o3 q高糖DMEN. Y" K0 e9 Y! Q7 I- p: x
1%NEAA
$ P' l9 j% j, `1%Pruvate& A- s+ U# ~1 g( ?2 R' n4 h
1%Glutamine. X# l. g: S5 o! \+ Q' e4 B
1%双抗
) u7 j! r* P  _& D1%FBS
' m+ Q6 d+ e7 M% h$ w3 {  J0.1%LIF外加beta巯基乙醇
作者: boji1111    时间: 2017-3-8 10:18

这要看你要保持干细胞的全能性还是要分化成其它细胞了。
2 t; E& H) d8 _/ E! R# f如果是iPS的话,如果是要保持全能性,好像普通高糖的DMEM就行,不过就是要每天换液。我们实验室用的是ajinomoto的ak02,可以保持很好的全能性。
作者: laputa12    时间: 2017-4-24 08:55

干细胞培养基一般加了一些特定的细胞因子,避免分化;一般多用无血清培养基,而且不同类型的干细胞所需培养基的类型也不相同




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