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标题: 关于骨髓间充质干细胞分化心肌细胞的问题 [打印本页]

作者: ooocyqooo 时间: 2014-6-25 09:25 标题: 关于骨髓间充质干细胞分化心肌细胞的问题

之前没有太多的生物基础，一下子要做干细胞分化实验，有点头疼，细节的问题总搞不清楚，还请各位大神多多帮助，多谢大家！0 p* p) {$ m' ?
1.我要用5-氮胞苷分化，配置的5-氮胞苷要灭菌吗？能高温高压灭菌吗？4 B2 ?; [/ x, E* u' x! q
2.一般要冻存骨髓间质干细胞的冻存液配比是多少呀？培养基：FBS：DMSO=4：5:1？or 7:2:1？
3.要做免疫组化的话，选什么抗体比较好呀？哪个牌子的比较好用？2 D% A Y. H- h. Z* b5 i! Q2 K
多谢大家啊。。。。。* `" J# G' q# J& e( `

作者: chichao0000 时间: 2014-6-25 12:29

1. 5-氮胞苷用0.2um过滤消毒；
2. 我冻存的是脂肪干细胞培养基：FBS：DMSO=7：2:1. ?) {/ t( {% h# l5 s9 D8 _6 |6 P- D U
3. 你是指心肌分化的marker吧，我没经验。

作者: ooocyqooo 时间: 2014-6-26 13:35

回复 chichao0000 的帖子1 n0 Q* @( Z/ Q$ D

多谢啦~~~

作者: ooocyqooo 时间: 2014-6-26 13:35

回复 chichao0000 的帖子4 Q0 C! B+ p; z* z
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那你用的培养基是什么呀？加了什么吗

作者: chichao0000 时间: 2014-6-27 06:36

回复 ooocyqooo 的帖子# I; l7 T$ M/ J& k O

我用的是DMEM-Low Glucose+10%FBS。没有加其他生长因子，我看的文献就是完全培养基内加5-Az。但是胚胎干细胞进行心肌分化诱导的培养基就复杂了，我也没弄明白为什么，希望多讨论。

作者: ooocyqooo 时间: 2014-6-27 09:36

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我做的是间质干细胞，诱导剂是5-氮胞苷，但是胚胎干细胞就不是了；我现在用的培养基是加了FBS、双抗、谷氨酰胺。你在做什么呀。。。

作者: chichao0000 时间: 2014-6-28 01:18

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脂肪干细胞，你知道为什么胚胎干细胞向心肌分化培养基复杂的原因吗？

作者: ooocyqooo 时间: 2014-7-2 13:26

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不是太清楚，因为当初就是觉得做胚胎干细胞太复杂，后来选做骨髓间质干细胞。是防止胚胎干细胞非定向分化吧，还要特定的微环境和滋养层，感觉看了文献就觉得好娇贵，难伺候

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