干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 求教 我的BMC状态正常吗? [打印本页]

作者: 听不到    时间: 2014-8-17 16:56     标题: 求教 我的BMC状态正常吗?

本帖最后由 听不到 于 2014-8-17 17:11 编辑
  j0 N. Y( \1 Q: p2 H- U% m* e
5 Q9 a+ r+ H4 u" Z- C/ |全骨髓法提取的大鼠BMC,不敢确定状态是否正常,但是诱导的时候总是不能成功,请各位大神帮忙看下这个状态还是BMC吗?3 f- m2 D+ n" C" R) B
我传了好几遍图片都传不上去啊
作者: lovesxj941    时间: 2014-8-17 17:57

BMC的诱导需要免疫细胞染色、流式、或者根据细胞不同选特殊方法等等来确定的。靠图片很难判断。向什么方向诱导?
作者: 细胞海洋    时间: 2014-8-18 10:11

回复 听不到 的帖子
/ J4 P$ X" e5 [: Y# O& Q+ {
* Q# B; w( G2 b发帖 或者回复 高级模式 附件上传 单个图片不要大于1000kb
作者: wanghebin    时间: 2014-8-18 10:38

方法有没有问题?介绍一下具体过程?
作者: 听不到    时间: 2014-8-18 14:22

[attach]63447[/attach][attach]63446[/attach][attach]63445[/attach]三张图片是这样的
作者: 倒腾细胞    时间: 2014-8-18 14:36

这三张图片是什么代什么天的呀?
作者: 听不到    时间: 2014-8-18 15:31

回复 lovesxj941 的帖子& \9 i7 \* Z& X& Z: \: ~0 G2 W* x" F
1 E  ]6 n4 m2 G+ V6 \
向神经元方向诱导,不过一直没成功...
作者: 听不到    时间: 2014-8-18 15:35

回复 wanghebin 的帖子
5 Y( G% Z5 A; V8 g( z& |& B4 w% d7 N& x) e/ D4 m  Y# g
提取BMC的方法就是取胫骨,用DMEM冲骨腔,再以15%FBS的DMEM静置培养,传代后改为10%FBS的DMEM
作者: 听不到    时间: 2014-8-18 15:36

回复 倒腾细胞 的帖子
/ n& y, c- l( W, g0 W" |+ `, W7 L% e" i4 \2 k, [& G
是第4代,然后新复苏的,第6天
作者: lovesxj941    时间: 2014-8-18 16:29

回复 听不到 的帖子
4 z& L' P  U+ R* H
3 e6 t8 Y# l! w* I* n神经元诱导,我看了你之前的帖子是Nerobasl+B27。你消化传代时换用诱导培养基试试。你是正常培养然后直接换诱导培养基吗?
作者: 听不到    时间: 2014-8-18 17:30

回复 lovesxj941 的帖子
) D6 w1 ?& D8 `: C5 A' Y% ^
( U5 z* E" F7 W5 [% O是,不过我现在想确定的是我的细胞的形态像是BMC吗,还是老化了?还是根本不是BMC?
作者: 倒腾细胞    时间: 2014-8-18 22:33

回复 听不到 的帖子
) H# K/ t) {* T! L* M/ z5 W. {! V- }( a3 `* F: @/ u- {
低糖还是高糖呀?  你们传到第四代就冻存吗?
作者: 倒腾细胞    时间: 2014-8-18 22:36

回复 听不到 的帖子, w+ U- Z9 I% G( K# e# B
- y8 T! V6 Z: n6 S5 Z) @3 v2 r
我觉得是 形态还行吧
作者: 听不到    时间: 2014-8-19 08:53

回复 倒腾细胞 的帖子
- v* _5 I3 ~; @! s
$ C* f1 k3 e5 Z$ J3 v低糖的,不过我想试试DMEM/F12行不行,我看别人用F12养过脐带MSC,打算试试。不是传到第四代冻存,是从第二代吧开始每代都冻存个几管了就,实验室穷,不怎么敢老是申请买老鼠...
作者: 倒腾细胞    时间: 2014-8-19 13:22

回复 听不到 的帖子
, ^9 j, r3 e; _( M( c: _  b7 G: H4 F( I5 p% c
晕。。。。。。第二代都不纯吧。。。我们也穷




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5