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标题: 质粒转染效率 [打印本页]

作者: yeshch 时间: 2014-10-15 08:40 标题: 质粒转染效率

含目的基因的质粒经过酶切测序鉴定都没问题，但是转染效率总是很低（看GFP荧光），收的病毒暂时不敢用；而且同样的操作，其它的基因转染效率却很高，请问可能是什么原因？

作者: qingxingruyu 时间: 2014-10-15 09:47

相同的表达载体吗，也遇到过这样的问题，但没想过为什么，同样期待有人能给出解释

作者: zb_ming 时间: 2014-10-15 10:59

片段大小也影响转染效率。

作者: luyue6453 时间: 2014-10-15 11:01

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转不同的基因肯定出现不同的表达量，有的比较易表达，有的根本还不表达，主要看载体的启动子等调控原件，不行就换转染方法

作者: 刘彩云 时间: 2014-10-15 13:58

你用的什么转染方法？脂质体转染效率本来就很低，转不上多少也正常，你可以试试电转。

作者: yeshch 时间: 2014-10-16 10:58

回复刘彩云的帖子8 B9 U1 _$ S x& E$ A% _

我用的钙转；脂质体转染很贵但效率很高啊；电转更贵！

作者: yeshch 时间: 2014-10-16 10:59

回复 luyue6453 的帖子$ v! l4 t' u9 Z* b# t2 F, A
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嗯哦，谢咯！

作者: creatine 时间: 2014-10-20 11:22

本帖最后由 creatine 于 2014-10-20 11:22 编辑 - u- F6 |+ D4 B3 @

不知道你做完，有没感染下然后qpcr检测下看下？如果只是荧光的话不一定靠谱。另外以前是不是在保研论坛见过？看你头像一样。

作者: yeshch 时间: 2014-10-20 22:45

本帖最后由细胞海洋于 2014-10-21 08:45 编辑 5 g& k: M1 K* N- b- C9 T, S/ \5 x

回复 creatine 的帖子1 `4 f! x& m/ d; U3 r8 D( n9 S
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好像是的，以后继续向你学习

作者: xiaostou 时间: 2014-10-21 10:01

有条件的话试试核转的方法，Lonza出的电转仪，直接转到细胞核内。

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