干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 饲养层细胞射线灭活方案？ [打印本页]

作者: mecol 时间: 2014-10-23 20:55 标题: 饲养层细胞射线灭活方案？

准备用X射线灭活CF-1小鼠MEF细胞，目前从文献上查到总量是40Gy，但是不知道具体如何操作。我们医院使用的是通常肿瘤病人的放疗仪器，求教有类似经验的朋友，该如何做？譬如，细胞的处理及量，一次给与的射线量，等等
拜谢！

作者: zhusealin 时间: 2014-10-24 08:52

将细胞全部收集到50ml离心管中，30Gy辐照

作者: scottist 时间: 2014-10-24 08:53

X射线没听说过，Gama射线的剂量如下：如果用的是钴60，处理MEF的剂量选择20-25Gray，有的地方如复旦大学放射研究所用铯137，用的放射剂量为50Gray。MEF生长到80%-90%，就可直接辐照处理，瓶数没有严格要求，仪器中差不多能放下就可以。

作者: xbpy 时间: 2014-10-24 11:01

总去放射室太耽误人家工作了，请问药物处理多少时间，多大剂量好呢？

作者: mecol 时间: 2014-10-24 11:02

回复 scottist 的帖子! a( s: ]$ T) ?8 Z! V' _

能一次就使用20-25Gy的剂量吗？那细胞岂不是都放死了？能不能具体点呢？

作者: mecol 时间: 2014-10-24 11:02

回复 zhusealin 的帖子7 r# { \/ |6 O% }% i0 w

谢谢！能具体点吗？

作者: mecol 时间: 2014-10-24 11:09

回复 xbpy 的帖子
- \" j0 g* x2 }% U. d% W+ i
收费的，但是效果很好。丝裂霉素C处理2-3h即可，工作浓度10μg/ml

作者: shihuijunm 时间: 2014-10-24 14:38

X射线一般是80KV，辐照30min，将整盘（10cm dish）细胞摆在X 射线辐照仪里面照就可以了，辐照结束后，消化细胞，然后冻存或者直接使用。% W! H! b( a; x1 o1 u" K
. E' k& l+ ^. Z4 C1 l9 v% _ a: [5 D+ o
补充内容 (2014-10-24 14:38):
同济大学医学院6楼可以X射线辐照

作者: xbpy 时间: 2014-10-24 14:48

回复 mecol 的帖子$ ?) ^; x3 J& M. T+ E# m y* J. i

多谢回复。前几天用药物处理后做了一个上清实验，看看处理后的细胞在第1~7天什么时候的上清更有助于肿瘤细胞的生长，结果基本没啥效果，还不如普通培养基呢，不知怎么回事。而且10ug/ml3小时处理后的成纤维细胞，传几次2个星期了还不死。:dizzy:

作者: mecol 时间: 2014-10-24 14:55

回复 xbpy 的帖子- L* x( t' V# z; {# L

一般用1周

作者: mecol 时间: 2014-10-24 14:59

回复 shihuijunm 的帖子: Y9 T1 p# B$ J

太谢谢你了！你所说的80KV，辐射30min，总量是多少Gy？

作者: shihuijunm 时间: 2014-10-24 15:14

回复 mecol 的帖子9 T/ w8 W* t5 B& K# U
b6 d, n# k2 U& P4 t9 R
对不起，这个不太了解，只知道怎么用，你再问问别的人，这是他们仪器的介绍，希望能有点帮助。
X-射线生物辅照仪RX-650是FAXITRON专门为满足实验室辐照需要而设计和生产的橱柜式辐照系统，内置电控旋转转台，转台可根据使用需要，可在射线源与物体之间7in.到25.4in.的范围内自由调节，更大程度上满足不同剂量的辐照需要。RX-650的电控旋转转台以2RPM的速度旋转，可确保射线辐照均一性，使得该设备成为一款理想的可完全替代放射性同位素的辐照仪器。技术参数 ? 管电压：10-130KV ? 管电流：5mA ? 焦点大小：IEC 1.5mm， ? X 线束散射角：40 度发散角主要应用于：活细胞辐照；组织标本辐照；植物和种子辐照；动物、食物辐照；聚合物辐照；研究细胞周期，信号转导，癌症肿瘤学研究；实验室器具灭菌研究等。

作者: mecol 时间: 2014-10-24 16:17

回复 shihuijunm 的帖子

好吧，谢谢了

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)