干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 脐带间充质干细胞培养 [打印本页]

作者: jinhaifeng 时间: 2014-11-12 11:28 标题: 脐带间充质干细胞培养

我这边养的脐带间充质干细胞细胞爬出来的速度很快，但是往后就不怎么增值，传代后也是，请教下是什么原因呢，是不是培养基不行啊

作者: bsx1111 时间: 2014-11-12 14:05

组织块必须贴稳，细胞才会爬出来。华通胶撕下来很容易剪的，不要剪得太小，那样组织块就会一直飘在培养液中。建议前12小时用很少的培养液，只要保证组织块没有干就可以了，比如T75的培养瓶可以只用3-4ml，组织块贴稳以后再慢慢添加培养液，每次也不要添加太多，基本原则是前一周保证组织块不干就可以，等组织块全部贴稳后可以多加培养液了。还有脐带干细胞爬出来的速度本来就不快，培养过程中尽量不要动。7天左右可见细胞迁出，10天-12天可进行传代

作者: 月_幻影 时间: 2014-11-12 14:34

细胞爬出来的速度很快说明活力还是不错的，建议前几代传代的时候密度高一些、别太低了…

作者: jinhaifeng 时间: 2014-11-12 15:52

回复 bsx1111 的帖子
" f$ M0 H' T* `- g; c
谢谢，以前传代密度稀的时候细胞增值也挺快啊，换了家公司用了不同的培养基

作者: frankhu 时间: 2014-11-12 16:57

一个看消化是否过度，另一个就是细胞是否污染。因为原代你长的很快，就很难判断培养基出了问题，除非每次都是这种情况。

作者: zxmflying 时间: 2014-11-12 17:15

有可能是培养条件（如培养基）不合适，或者是在培养的过程中被污染了，建议检测一下支原体。

作者: jinhaifeng 时间: 2014-11-13 09:00

谢谢各位高手的指教，我再看看

作者: 水念人倦 时间: 2014-11-14 08:54

回复 jinhaifeng 的帖子
0 k. w' C% ]3 L; D# V
爬出的快的话，应该说明样本和培养基是没问题的，我觉得也是接种密度出了问题。楼主什么密度接种的呢？

作者: chenchunlei 时间: 2014-12-23 13:07

回复 jinhaifeng 的帖子

细胞爬出来很快说明你的细胞没有问题，和你分析一样感觉培养有问题，可以换一种培养液养养试试，在一个是你的培养皿，皿不一样细胞生长状态就不一样。你也可以传代后的两到三天半量换液试试

作者: 791849046 时间: 2014-12-26 16:31

组织块悬浮培养也可以的

作者: 2013sp 时间: 2015-1-3 15:40

回复 bsx1111 的帖子8 c1 X2 ?( o% o
5 R% V! S5 t( P }' j& a
请问前辈，组织块一旦爬出细胞，就将组织块挑除吗？还是等到消化时再挑除？

作者: caustic 时间: 2015-1-8 14:48

培养环境也很重要，建议细胞刚爬出来的时候不要总是拿出来观察，现在天气冷，细胞环境的改变对细胞生长也有一定的影响。

作者: bsx1111 时间: 2015-1-19 11:50

回复 2013sp 的帖子- a B; w- Q- l8 s# s/ u$ M# y
( b7 P- ~7 @# J, M1 I4 G4 R# s P
消化时再挑除就行或者长的足够多时换液时去除就行

作者: alicia_86 时间: 2015-1-21 10:50

你是说原代爬出来后不增值么？还是传代后不增值，个人建议你在原代的时候每隔3-4天都得换液，另外P0-P1传代的时候密度大一点。。

作者: dollar007 时间: 2015-1-22 11:30

长时间过密培养，会降低增殖潜能

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)