干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 脐带间充质干细胞培养 [打印本页]

作者: jinhaifeng    时间: 2014-11-12 11:28     标题: 脐带间充质干细胞培养

我这边养的脐带间充质干细胞细胞爬出来的速度很快,但是往后就不怎么增值,传代后也是,请教下是什么原因呢,是不是培养基不行啊
作者: bsx1111    时间: 2014-11-12 14:05

组织块必须贴稳,细胞才会爬出来。华通胶撕下来很容易剪的,不要剪得太小,那样组织块就会一直飘在培养液中。建议前12小时用很少的培养液,只要保证组织块没有干就可以了,比如T75的培养瓶可以只用3-4ml,组织块贴稳以后再慢慢添加培养液,每次也不要添加太多,基本原则是前一周保证组织块不干就可以,等组织块全部贴稳后可以多加培养液了。还有脐带干细胞爬出来的速度本来就不快,培养过程中尽量不要动。7天左右可见细胞迁出,10天-12天可进行传代
作者: 月_幻影    时间: 2014-11-12 14:34

细胞爬出来的速度很快说明活力还是不错的,建议前几代传代的时候密度高一些、别太低了…
作者: jinhaifeng    时间: 2014-11-12 15:52

回复 bsx1111 的帖子9 V; q% i7 S: i5 n6 P
0 C* G. [8 Z' n# v+ t+ z0 q
谢谢,以前传代密度稀的时候细胞增值也挺快啊,换了家公司用了不同的培养基
: J' |5 O! b) F4 E/ _/ l3 y
作者: frankhu    时间: 2014-11-12 16:57

一个看消化是否过度,另一个就是细胞是否污染。因为原代你长的很快,就很难判断培养基出了问题,除非每次都是这种情况。
作者: zxmflying    时间: 2014-11-12 17:15

有可能是培养条件(如培养基)不合适,或者是在培养的过程中被污染了,建议检测一下支原体。
作者: jinhaifeng    时间: 2014-11-13 09:00

谢谢各位高手的指教,我再看看
作者: 水念人倦    时间: 2014-11-14 08:54

回复 jinhaifeng 的帖子' v4 g" M9 D2 b" x  t' X8 v' Q+ P
8 p/ `2 {; E4 e, j: @5 P/ x+ k
爬出的快的话,应该说明样本和培养基是没问题的,我觉得也是接种密度出了问题。楼主什么密度接种的呢?
作者: chenchunlei    时间: 2014-12-23 13:07

回复 jinhaifeng 的帖子
) m- e* v1 }5 K$ g9 S1 T% `/ g6 J$ h. F4 Z* S$ A6 I
细胞爬出来很快说明你的细胞没有问题,和你分析一样感觉培养有问题,可以换一种培养液养养试试,在一个是你的培养皿,皿不一样细胞生长状态就不一样。你也可以传代后的两到三天半量换液试试
作者: 791849046    时间: 2014-12-26 16:31

组织块悬浮培养也可以的
作者: 2013sp    时间: 2015-1-3 15:40

回复 bsx1111 的帖子
- G4 }) c- f. W2 i! Y  d, U# m  Q. U5 ^3 ]  L
请问前辈,组织块一旦爬出细胞,就将组织块挑除吗?还是等到消化时再挑除?
作者: caustic    时间: 2015-1-8 14:48

培养环境也很重要,建议细胞刚爬出来的时候 不要总是拿出来观察,现在天气冷,细胞环境的改变对细胞生长也有一定的影响。
作者: bsx1111    时间: 2015-1-19 11:50

回复 2013sp 的帖子' e# T8 p/ |' I8 e0 N

4 E  `3 e* U, |消化时再挑除就行或者长的足够多时换液时去除就行
作者: alicia_86    时间: 2015-1-21 10:50

你是说原代爬出来后不增值么?还是传代后不增值,个人建议你在原代的时候每隔3-4天都得换液,另外P0-P1传代的时候密度大一点。。
作者: dollar007    时间: 2015-1-22 11:30

长时间过密培养,会降低增殖潜能




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5