干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站
标题:
用于临床治疗的免疫细胞（尤其是T细胞）能否冻存？
[打印本页]
作者:
luckyliu
时间:
2014-12-2 14:25
标题:
用于临床治疗的免疫细胞（尤其是T细胞）能否冻存？
如题，用于临床治疗的免疫细胞（尤其是T细胞）能否冻存？，冻存后的T细胞生物学特征是否发生变化。
3 S$ x$ g6 Z( u+ d4 d
请问各位大侠，有没有类似经验或者相关文献推荐，刚接触免疫这块，各种不懂，希望大家多多指教
作者:
aochongyu
时间:
2014-12-2 16:12
cik细胞可以冻存，但是复苏后活率会有一些降低，回输洗涤过程中会有死细胞团块
作者:
sdudai
时间:
2014-12-2 16:41
建议不要冻存。CIK细胞已经比较成熟了，核质比低，细胞脆弱。冻存后，再复苏。冻和复的过程对细胞损伤很大，而且，复苏后需要离心，机械力的损伤也特别厉害
作者:
zuming
时间:
2014-12-2 18:38
冻存本身是没有问题的，但是临床用途的CIK如果冻存会大量损失，细胞碎片进入患者体内还有可能增加不良反应的风险。
作者:
senmiao
时间:
2014-12-4 09:00
回复
zuming
的帖子
l7 I$ f2 P3 b4 R, m
9 {1 J6 B" N" ?1 }& p
那如果是在单核细胞刚去取出来的时候冻，之后在复苏呢？如果以后要扩大培养并回输的细胞冻存液是怎样配比呢，有一种是10%的冻存液变成4%DMSO+6%HES，可以吗？
作者:
zuming
时间:
2014-12-4 11:46
这种试过几次，但是扩增不理想后来就没继续做了，不知道是冻存液的问题还是细胞本身的问题。没有验证。
9 B- z1 H) }* E4 z& w# A; d- @. P
所以也就没有办法答复你了。
作者:
luckyliu
时间:
2014-12-5 16:06
如果忽视冻存导致的细胞活性和数量的损失，T细胞冻存对T细胞的功能会有影响么？
作者:
licp0661
时间:
2014-12-7 03:29
MNC冻存后复苏，可以继续诱导CIK，没有问题。前提是冻存的技术要可靠。
作者:
luckyliu
时间:
2014-12-8 15:09
在网上看到较多的是PBMC的冻存，不知道有没有人做过TCM的冻存？
作者:
yangpan521
时间:
2014-12-8 15:46
我们用的PBMC冻存液：血浆：培养基：DMSO=5:4:1，效果还可以，主要是和病人本身的细胞有关系，有的复苏后长势就和没冻存一样，有的复苏后，就很难养起来，个人经验，望大家参考
作者:
luckyliu
时间:
2014-12-8 16:45
回复
yangpan521
的帖子
7 U: B, O& {9 A+ Q/ b; v
! O0 Q" G; |: `2 K
那你们有没有做复苏后的流式或者相关项目质控检测啊？
2 c* D% U( o' m
与冻存前有什么区别？
作者:
yangpan521
时间:
2014-12-10 10:29
回复
luckyliu
的帖子
# H; J- W k: X
5 {, d/ ^& N/ E$ Y. @& @% q1 j# p
流式结果和细胞总数会降低一点，还有细胞的生长速度也会受到影响，其它指控就基本一样了，主要是有的病人实在是没法会输，不得已才选择冻存
作者:
yangpan521
时间:
2014-12-10 10:30
回复
luckyliu
的帖子
# D1 X# D' M' e# {
2 }. H- y2 Q$ P+ \& v
流式结果和细胞总数会降低一点，还有细胞的生长速度也会受到影响，其它指控就基本一样了，主要是有的病人实在是没法会输，不得已才选择冻存
作者:
luckyliu
时间:
2014-12-10 15:51
回复
yangpan521
的帖子
- e; C) i2 N6 U" w
) y6 b6 u' y, I, q! d
是的，非常感谢！
& n: Y% d7 F# X/ I9 M
那你冻存的时候，有没有相关冻存的文献推荐呢？
作者:
yangpan521
时间:
2014-12-11 10:13
回复
luckyliu
的帖子
# Q) Z+ g; s) _2 Q4 ]
+ W; m, n" r7 ] F. q
看了不同类型的细胞冻存文献，主要就是冻存液的比例问题，我们用的是是10%的DMSO，你可以参考做几次验证
作者:
luckyliu
时间:
2014-12-11 13:31
回复
yangpan521
的帖子
$ r# p! N0 }+ j L, K8 H+ _2 y
4 t$ K: {2 w5 b) g
好的，非常感谢，这个比例我们也是一直在用的，目前市场上PBMC的冻存还是蛮成熟的，就是不知道有没有PBMC扩增后的细胞冻存？
作者:
Robert-A
时间:
2020-8-18 15:15
种子冻存后，复苏再培养，成品尽量不要冻存再复苏用，损失细胞。
欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)
Powered by Discuz! X1.5