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标题: 用于临床治疗的免疫细胞（尤其是T细胞）能否冻存？ [打印本页]

作者: luckyliu 时间: 2014-12-2 14:25 标题: 用于临床治疗的免疫细胞（尤其是T细胞）能否冻存？

如题，用于临床治疗的免疫细胞（尤其是T细胞）能否冻存？，冻存后的T细胞生物学特征是否发生变化。/ }& \* b( K' O1 K1 ^3 V; Y
请问各位大侠，有没有类似经验或者相关文献推荐，刚接触免疫这块，各种不懂，希望大家多多指教

作者: aochongyu 时间: 2014-12-2 16:12

cik细胞可以冻存，但是复苏后活率会有一些降低，回输洗涤过程中会有死细胞团块

作者: sdudai 时间: 2014-12-2 16:41

建议不要冻存。CIK细胞已经比较成熟了，核质比低，细胞脆弱。冻存后，再复苏。冻和复的过程对细胞损伤很大，而且，复苏后需要离心，机械力的损伤也特别厉害

作者: zuming 时间: 2014-12-2 18:38

冻存本身是没有问题的，但是临床用途的CIK如果冻存会大量损失，细胞碎片进入患者体内还有可能增加不良反应的风险。

作者: senmiao 时间: 2014-12-4 09:00

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那如果是在单核细胞刚去取出来的时候冻，之后在复苏呢？如果以后要扩大培养并回输的细胞冻存液是怎样配比呢，有一种是10%的冻存液变成4%DMSO+6%HES，可以吗？

作者: zuming 时间: 2014-12-4 11:46

这种试过几次，但是扩增不理想后来就没继续做了，不知道是冻存液的问题还是细胞本身的问题。没有验证。- ^9 t8 U6 G7 B7 ?( J5 e& R
所以也就没有办法答复你了。

作者: luckyliu 时间: 2014-12-5 16:06

如果忽视冻存导致的细胞活性和数量的损失，T细胞冻存对T细胞的功能会有影响么？

作者: licp0661 时间: 2014-12-7 03:29

MNC冻存后复苏，可以继续诱导CIK，没有问题。前提是冻存的技术要可靠。

作者: luckyliu 时间: 2014-12-8 15:09

在网上看到较多的是PBMC的冻存，不知道有没有人做过TCM的冻存？

作者: yangpan521 时间: 2014-12-8 15:46

我们用的PBMC冻存液：血浆：培养基：DMSO=5:4:1，效果还可以，主要是和病人本身的细胞有关系，有的复苏后长势就和没冻存一样，有的复苏后，就很难养起来，个人经验，望大家参考

作者: luckyliu 时间: 2014-12-8 16:45

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那你们有没有做复苏后的流式或者相关项目质控检测啊？0 Q, z, x, u) @" X' M' _7 [
与冻存前有什么区别？

作者: yangpan521 时间: 2014-12-10 10:29

回复 luckyliu 的帖子, D+ k; ]; ]5 V4 [

流式结果和细胞总数会降低一点，还有细胞的生长速度也会受到影响，其它指控就基本一样了，主要是有的病人实在是没法会输，不得已才选择冻存

作者: yangpan521 时间: 2014-12-10 10:30

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流式结果和细胞总数会降低一点，还有细胞的生长速度也会受到影响，其它指控就基本一样了，主要是有的病人实在是没法会输，不得已才选择冻存

作者: luckyliu 时间: 2014-12-10 15:51

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是的，非常感谢！' t) s$ M% Y% V3 R
那你冻存的时候，有没有相关冻存的文献推荐呢？

作者: yangpan521 时间: 2014-12-11 10:13

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看了不同类型的细胞冻存文献，主要就是冻存液的比例问题，我们用的是是10%的DMSO，你可以参考做几次验证

作者: luckyliu 时间: 2014-12-11 13:31

回复 yangpan521 的帖子7 w1 t6 q# }4 P3 d& X9 r! a* V
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好的，非常感谢，这个比例我们也是一直在用的，目前市场上PBMC的冻存还是蛮成熟的，就是不知道有没有PBMC扩增后的细胞冻存？

作者: Robert-A 时间: 2020-8-18 15:15

种子冻存后，复苏再培养，成品尽量不要冻存再复苏用，损失细胞。

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