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标题: 请教有关细胞冻存的问题 [打印本页]

作者: baby00000003 时间: 2014-12-9 09:26 标题: 请教有关细胞冻存的问题

只是如果假设技术上可以实现的话，5 W! F' P5 T- n! s
冷冻过程中如果可以持续振摇冻存管或者冷冻血袋的话，是不是可以避免因为自然沉降导致的细胞浓度不均匀呢？( T& Q$ D9 s' ]$ O0 F2 ]
或者说，这种自然沉降完全没必要去刻意避免？

作者: 鬼赦秉 时间: 2014-12-9 10:31

本帖最后由鬼赦秉于 2014-12-9 10:31 编辑 4 W' F6 M& g K' o G7 p& \* t

我们做冻存的时候会考虑的是如何保证细胞的存活率，会加DMSO/FBS（1:9）。至于沉降的问题，我不知道你是有什么需要所以要防止沉降。不过我觉得，反正下次你用细胞的时候也要取出来解冻的啊，所以沉降与否都不紧要的吧。

作者: yeshch 时间: 2014-12-10 09:16

冻存液对细胞是有损伤的，均匀滴加后尽量不要摇晃以避免对细胞造成太大损伤

作者: xiaolizhang87 时间: 2014-12-10 09:46

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冻存细胞时，尽量将冻存液在4度预冷，然后在制成细胞悬液。使用的程序降温盒也要提前在4度预冷，然后将加入细胞悬液的冻存管转移到程序降温盒中。尽量缩短细胞降至4度及-80度的时间，也可在一定程度上避免细胞的沉降。
不过感觉细胞在冻存液中的这种自然沉降也没必要刻意避免，操作时注意一下就好。

作者: wxdang 时间: 2014-12-10 10:55

其实细胞冻存，可以不考虑浓度问题，如果细胞在运动，理论上是否可以考虑其细胞的损伤问题，是不是得不偿失

作者: daviddow 时间: 2014-12-15 12:34

我们是先放在-20度1到2个小时，然后放到-80冰箱，然后液氮

作者: bleachmen2 时间: 2015-1-22 14:55

回复 daviddow 的帖子- {" ^5 E- x' g) O, O
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-20℃的时候冰晶效应最强，怎么还在-20放1-2个小时呢？一般的做法都是先-80度1天再液氮吧。

作者: naturehu 时间: 2015-1-25 17:03

个人感觉细胞在冻存液中的沉降速度较慢，还是不要持续振荡的好，保证细胞的完整性和存活是关键。

作者: 大胖子阿哥 时间: 2015-1-26 07:53

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: Q5 K/ y) c' L1 V5 O) ^
没有必要刻意去避免细胞自然沉降

作者: sdfengxuan 时间: 2015-1-29 14:43

细胞冻存的目的是保持细胞的活性吧，冻存过程中的因为自然沉降导致的细胞浓度不均，对活性有影响吗？

作者: yuanyecat 时间: 2015-2-3 10:37

你摇晃的话会损伤细胞的。这个沉降不会影响细胞活性的。而且如果你想一个样品使用多次，可以分成几份冻存。同一个冻存袋或者管最好只用一次，反复冻存会极大的杀伤细胞。还有你可以用专业的降温装置，减少过程中对细胞活力的损伤。

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