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标题: CIK细胞复苏过夜后,培养液上方飘着一层白膜 [打印本页]

作者: yzy017101    时间: 2015-2-3 16:16     标题: CIK细胞复苏过夜后,培养液上方飘着一层白膜

CIK细胞复苏过夜后,培养液上方飘着一层白膜,摇过之后那些白膜聚集成一大团,像是细胞收集时离心管底的细胞,在显微镜下观察是细胞,请教一下是什么东西啊?
作者: lyj-0017    时间: 2015-2-3 17:35

回复 yzy017101 的帖子' H8 u. \* W6 }0 a0 A

3 A& w, y3 m: _  Q+ m6 p* B无图无真相
作者: aulenuyah    时间: 2015-2-3 17:36

有可能是污染,不过还是无图无真相
作者: cjsbaicai    时间: 2015-2-4 08:52

最好有图,另外你说的复苏是指细胞分离培养后出现的情况,还是将细胞冻存复苏培养后出现的情况?
作者: suning5    时间: 2015-2-4 11:24

白膜,又漂浮,是死细胞的可能性很大
作者: luoye1986    时间: 2015-2-4 11:25

应该是污染
作者: xiakexing    时间: 2015-2-4 14:19

是死细胞,细胞裂解以后释放的DNA……
作者: yzy017101    时间: 2015-2-4 14:23

本帖最后由 yzy017101 于 2015-2-4 14:26 编辑
5 f0 Q  _6 d4 p; d. K, \5 W* u6 w. C4 x$ Q7 s  ]* Z
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4 ]& e7 _; U6 g: o+ V: {3 j[attach]67334[/attach][attach]67333[/attach]
; X7 e' p6 o/ D* n( R8 W4 X" N6 Y$ {. I# g) [

作者: yzy017101    时间: 2015-2-4 14:27

回复 cjsbaicai 的帖子
: d8 S* [& e9 p# ^, N7 z/ N7 Q: I, e8 S  J0 D
是细胞冻存后复苏的前一天复苏第二天早上后出现的
1 Q6 ~# |5 C0 C
作者: yzy017101    时间: 2015-2-4 14:28

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" d( l! ~2 O4 d" c+ T( ~: J, e  b. k; i( }: v6 E
相比刚刚复苏和第二天的细胞计数,细胞数量减少30%。
作者: 奇幻雪蓝    时间: 2015-2-4 14:43

复苏工作没有做好
作者: xnyyswzl    时间: 2015-2-4 15:58

是污染
作者: baby00000003    时间: 2015-2-4 16:05

这个是细胞聚集成的团,不一定是死是活,用枪吹几下应该可以散的
作者: dollar007    时间: 2015-2-4 16:12

这是死细胞,CIK冻存技术不当所致
作者: cjsbaicai    时间: 2015-2-4 16:12

回复 yzy017101 的帖子
/ D( {' m% h" k' C9 B# ?
. M. F5 Q6 E% i* B1 n* G+ h; `你有添加血浆吗或者其他成份吗?这个可以不是细胞污染,是添加物的问题
作者: yzy017101    时间: 2015-2-4 16:19

回复 cjsbaicai 的帖子
6 y$ M1 R& t) J. e; }! P
) l  H4 ?- Q; A2 ?, i% e没添加别的东西下去,和其它细胞的培养基用的都是一样的。第二天细胞减少30%。
作者: yzy017101    时间: 2015-2-4 16:20

回复 baby00000003 的帖子
' L: m/ b& z- E8 b+ I+ ^$ x2 r/ h1 ~
1 V; X; E4 K* U+ {吹打过了黏在一起,散不开
作者: yzy017101    时间: 2015-2-4 16:21

回复 dollar007 的帖子2 K. d$ g) _! K7 W; ~! e

3 a" J8 d. q- U1 T6 ~& k/ M9 K但是我冻存过好几批了都没出现问题,就这批出现,
作者: lyj-0017    时间: 2015-2-4 17:34

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) g2 P" O. Z& N9 `1 ~# I. T0 e2 a. Z9 y1 g$ X# o$ f
这个不是污染,是细胞裂解掉后引起的
作者: yzy017101    时间: 2015-2-5 08:03

回复 lyj-0017 的帖子- F0 f3 W, A, ~& Z( ~& c
2 }$ X& z& H0 j: ]& N6 c# ]6 N/ w
我是个小白啊,能说说其中具体的嘛?
作者: cjsbaicai    时间: 2015-2-5 08:18

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3 v1 \) B3 O- `4 t0 ^3 {$ p2 z7 u8 r. J2 o* [  q, g
这种东西得成份有点像纤维蛋白原,属于血液中的促凝分子
作者: meister    时间: 2015-2-5 09:26

回复 yzy017101 的帖子9 ~8 ]8 M% Q( \( |; \1 n3 C# P& y
. \! V# g0 q  Y/ |+ N
死细胞团
作者: ccst4838318    时间: 2015-2-5 10:07

回复 yzy017101 的帖子
: q* A8 n' T. v, M0 L" K3 d3 {' ?  z2 ]! r/ m/ k( |5 \
你这明显就是死细胞DNA缠着蛋白形成的团团啊,不是污染,CIK好像不能冻吧,复苏后的活性是比较差的,还能有什么用,本来单个核细胞诱导出来的CIK比例就比较低,才百分之40%左右,再冻存基本就废掉了
作者: lyj-0017    时间: 2015-2-5 11:49

回复 yzy017101 的帖子4 L5 g% N- s' P8 B4 [
9 d, `" _6 w2 d! |% O
就是你的细胞保存技术不是很好,细胞复苏后,细胞活力太低,部分裂解的细胞释放出胞浆物质,这些物质就会包裹培养瓶中的细胞,吹是吹不散的。
作者: yzy017101    时间: 2015-2-5 21:06

回复 lyj-0017 的帖子" |! D- V0 K/ c1 c2 ?3 l; @

8 C4 z$ j7 ^! b2 ?/ H按照这个方法已经冻存过很多个批次了,都没出现问题。但是最近几次不同人冻存的不同人复苏的,都出现一样的问题。
作者: lyj-0017    时间: 2015-2-5 23:14

回复 yzy017101 的帖子- o4 m6 T) f# m: p' E8 B
* I7 h) R8 i9 O1 [6 @, h
那就不知道啥原因了,没有做过CIK细胞的冻存
作者: xyz2120091064    时间: 2015-2-11 13:25

这是分离的PBMC冻存复苏还是培养的CIK冻存复苏?不同的复苏有不同的原因
作者: delylulu    时间: 2015-2-21 11:13

细胞冻存时候数目过大,这些可能是死细胞,我也遇到过,但是细胞冻存数目少的时候没出现这种情况
作者: 杨知涵    时间: 2015-2-28 10:52

回复 delylulu 的帖子
! R( U: s: r5 ]1 Z- z' y; q  i9 Y4 M8 k1 e
问一下,冻存细胞数多或者少,大约是多少?
作者: lunyuyuanxj    时间: 2015-2-28 11:58

应该是死细胞粘聚在了一起,镜下还可以见到许多的絮状物吧
作者: xyz2120091064    时间: 2015-2-28 14:58

第一、可能由于冻存的方法不恰当;) Q/ q, K6 }# J
第二、冻存的时间过长或未在液氮中保存;
+ q9 Y4 ~& _) X$ z# C3 H第三、复苏的数量偏低;
, v3 T! U" d" Y: t1 a" U第四、换一下培养液;
9 l4 d+ O( g0 W$ }) g. N3 ~* ~% \6 F+ m希望对你有帮助
作者: 蚂蚁小西    时间: 2015-10-19 12:59

死细胞的DNA
作者: Robert-A    时间: 2020-8-18 15:52

细胞裂解了释放物聚集黏附到一起
作者: 细胞分裂    时间: 2020-9-9 16:43

是死细胞




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