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标题: CIK细胞复苏过夜后,培养液上方飘着一层白膜 [打印本页]

作者: yzy017101    时间: 2015-2-3 16:16     标题: CIK细胞复苏过夜后,培养液上方飘着一层白膜

CIK细胞复苏过夜后,培养液上方飘着一层白膜,摇过之后那些白膜聚集成一大团,像是细胞收集时离心管底的细胞,在显微镜下观察是细胞,请教一下是什么东西啊?
作者: lyj-0017    时间: 2015-2-3 17:35

回复 yzy017101 的帖子, t; J- @: {4 [9 @

" `4 Y* k; X2 {0 u" X+ f无图无真相
作者: aulenuyah    时间: 2015-2-3 17:36

有可能是污染,不过还是无图无真相
作者: cjsbaicai    时间: 2015-2-4 08:52

最好有图,另外你说的复苏是指细胞分离培养后出现的情况,还是将细胞冻存复苏培养后出现的情况?
作者: suning5    时间: 2015-2-4 11:24

白膜,又漂浮,是死细胞的可能性很大
作者: luoye1986    时间: 2015-2-4 11:25

应该是污染
作者: xiakexing    时间: 2015-2-4 14:19

是死细胞,细胞裂解以后释放的DNA……
作者: yzy017101    时间: 2015-2-4 14:23

本帖最后由 yzy017101 于 2015-2-4 14:26 编辑
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$ Z) k7 o: Q  p/ n3 V[attach]67334[/attach][attach]67333[/attach]  r3 ^3 P: @" J  H. @$ l

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作者: yzy017101    时间: 2015-2-4 14:27

回复 cjsbaicai 的帖子
4 H! m7 W# V3 A0 i8 s" N. w  V1 D* s( @7 @, q2 Z( f
是细胞冻存后复苏的前一天复苏第二天早上后出现的0 q) r3 o; D( S, N

作者: yzy017101    时间: 2015-2-4 14:28

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! S: v3 Y9 N2 A3 c5 }
- W& W- {8 g  [6 P6 r! M& b相比刚刚复苏和第二天的细胞计数,细胞数量减少30%。
作者: 奇幻雪蓝    时间: 2015-2-4 14:43

复苏工作没有做好
作者: xnyyswzl    时间: 2015-2-4 15:58

是污染
作者: baby00000003    时间: 2015-2-4 16:05

这个是细胞聚集成的团,不一定是死是活,用枪吹几下应该可以散的
作者: dollar007    时间: 2015-2-4 16:12

这是死细胞,CIK冻存技术不当所致
作者: cjsbaicai    时间: 2015-2-4 16:12

回复 yzy017101 的帖子1 L5 {7 i* v6 S' b) {0 M! d/ Q; C2 g- _
( p& f3 G6 j# A, N# B1 m% _" ]
你有添加血浆吗或者其他成份吗?这个可以不是细胞污染,是添加物的问题
作者: yzy017101    时间: 2015-2-4 16:19

回复 cjsbaicai 的帖子0 v# s  |% e9 }( n" R2 [
9 U1 I9 }/ U5 f+ |
没添加别的东西下去,和其它细胞的培养基用的都是一样的。第二天细胞减少30%。
作者: yzy017101    时间: 2015-2-4 16:20

回复 baby00000003 的帖子5 ], A# M% m' ~% R+ W+ L* L- I
& S9 t- u7 o7 M/ q2 r
吹打过了黏在一起,散不开
作者: yzy017101    时间: 2015-2-4 16:21

回复 dollar007 的帖子
7 [: s! x$ C5 c% M# X/ a; [
  X' S* J2 H6 \0 i4 i" u% R但是我冻存过好几批了都没出现问题,就这批出现,
作者: lyj-0017    时间: 2015-2-4 17:34

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4 t8 L6 k! A6 s$ {0 }! d
" M6 \$ v# q4 g6 Q! k& y这个不是污染,是细胞裂解掉后引起的
作者: yzy017101    时间: 2015-2-5 08:03

回复 lyj-0017 的帖子
6 k' E! ]' h: p0 z/ h4 h
7 U! ]1 j% O8 K- N我是个小白啊,能说说其中具体的嘛?
作者: cjsbaicai    时间: 2015-2-5 08:18

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1 i" t2 _6 a& \
: {0 P) f0 F" o$ ~这种东西得成份有点像纤维蛋白原,属于血液中的促凝分子
作者: meister    时间: 2015-2-5 09:26

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- o9 u7 G4 M' y+ l+ g+ W% @' E
8 }6 O* @; p& b  a死细胞团
作者: ccst4838318    时间: 2015-2-5 10:07

回复 yzy017101 的帖子1 X! x8 l& C( W: S

1 Z& L  ]9 a6 \+ m7 _( \& b你这明显就是死细胞DNA缠着蛋白形成的团团啊,不是污染,CIK好像不能冻吧,复苏后的活性是比较差的,还能有什么用,本来单个核细胞诱导出来的CIK比例就比较低,才百分之40%左右,再冻存基本就废掉了
作者: lyj-0017    时间: 2015-2-5 11:49

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$ r7 S* M# }$ M& k
6 Y* a- `; N$ U) {就是你的细胞保存技术不是很好,细胞复苏后,细胞活力太低,部分裂解的细胞释放出胞浆物质,这些物质就会包裹培养瓶中的细胞,吹是吹不散的。
作者: yzy017101    时间: 2015-2-5 21:06

回复 lyj-0017 的帖子. H0 b( |* k5 Z- s3 b9 `3 U7 D. y  z6 L
- C6 j; |. _7 [$ V+ M. g: [7 J
按照这个方法已经冻存过很多个批次了,都没出现问题。但是最近几次不同人冻存的不同人复苏的,都出现一样的问题。
作者: lyj-0017    时间: 2015-2-5 23:14

回复 yzy017101 的帖子! L1 {9 y( }( N' p' E5 j$ [

( i' N2 I( [3 y$ B7 n# W那就不知道啥原因了,没有做过CIK细胞的冻存
作者: xyz2120091064    时间: 2015-2-11 13:25

这是分离的PBMC冻存复苏还是培养的CIK冻存复苏?不同的复苏有不同的原因
作者: delylulu    时间: 2015-2-21 11:13

细胞冻存时候数目过大,这些可能是死细胞,我也遇到过,但是细胞冻存数目少的时候没出现这种情况
作者: 杨知涵    时间: 2015-2-28 10:52

回复 delylulu 的帖子
- P1 M, k# j) s8 ~* w' g: j" c2 I/ ]9 K. S
问一下,冻存细胞数多或者少,大约是多少?
作者: lunyuyuanxj    时间: 2015-2-28 11:58

应该是死细胞粘聚在了一起,镜下还可以见到许多的絮状物吧
作者: xyz2120091064    时间: 2015-2-28 14:58

第一、可能由于冻存的方法不恰当;
/ c" A2 @) ]0 G. j- Q: {; x第二、冻存的时间过长或未在液氮中保存;7 W; W$ E1 g) T; i+ `7 E" I
第三、复苏的数量偏低;
$ {3 j6 Z: u( \7 h+ B第四、换一下培养液;
+ V/ \5 d7 d# s" S: z  v: b( i希望对你有帮助
作者: 蚂蚁小西    时间: 2015-10-19 12:59

死细胞的DNA
作者: Robert-A    时间: 2020-8-18 15:52

细胞裂解了释放物聚集黏附到一起
作者: 细胞分裂    时间: 2020-9-9 16:43

是死细胞




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