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标题: 间充质干细胞的功能检测 [打印本页]

作者: 风自在流年 时间: 2015-3-24 09:31 标题: 间充质干细胞的功能检测

请教各位，我目前在用一种染料标记MSC，想标记后检测该染料对间充质干细胞的影响，比如对其贴壁、活性等的影响，请问一般需要哪些实验，谢谢

作者: ciweiyuan 时间: 2015-3-24 10:21

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贴壁指标，我认为用肉眼观察即可。
活性，有很多实验可以做啊，比如台盼蓝染色，比如cck8测增殖活性。
仅供参考

作者: 奇幻雪蓝 时间: 2015-3-24 14:07

同意楼上的做法！！

作者: dongxin 时间: 2015-3-24 15:02

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觉得应该从形态学，免疫组化，流式检测着手做

作者: liuzheng349 时间: 2015-3-24 17:22

我也不知道。帮你顶起来

作者: cleargreat 时间: 2015-3-24 20:29

主要就是细胞诱导分化检测，流式鉴定，细胞增殖能力。

作者: 风自在流年 时间: 2015-3-25 09:42

回复 ciweiyuan 的帖子3 f ]' ~; x: t6 {2 Q5 A5 c* ^

谢谢你的回复，我目前也是通过肉眼观察后拍照和台盼蓝的方法来检测的。请问我可以染色直接检测，然后培养几天后再台盼蓝检测吗，谢谢

作者: 风自在流年 时间: 2015-3-25 09:42

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谢谢你的回复。

作者: 风自在流年 时间: 2015-3-25 09:43

回复 cleargreat 的帖子4 j' t# ~: s) j. F1 K
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谢谢您的回复，请问您可以具体说一下吗，比如流式鉴定，因为之前觉得MSC的大小和形态不好确定，觉得做流式比较有困难，而增殖能力检测请问一般采用什么方法

作者: colins 时间: 2015-3-25 09:45

用流式检测吧，有时间的话也可以做个诱导分化实验

作者: 风自在流年 时间: 2015-3-25 09:48

回复 colins 的帖子1 c9 u4 X# S2 t. M- V4 a
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谢谢您的回复，请问您可以具体说一下吗，由于之前不太接触，比如流式鉴定，因为之前觉得MSC的大小和形态不好确定，觉得做流式比较有困难，而诱导分化请问一般采用什么方法，谢谢

作者: woshibotao_01 时间: 2015-3-25 15:22

细胞贴壁，成纤维样细胞，流式检测CD73CD90CD105阳性率大于95%+ j: r/ a3 a# [! k6 e5 V. m$ r" t
诱导三向分化，成骨，成脂肪，成软骨，诱导方法可以参考一些文献，都有介绍

作者: afei198520 时间: 2015-3-25 16:39

还是用流式吧，染色和培养几天再流式检测，用正常培养细胞作为对照。

作者: lousia04306 时间: 2015-4-2 10:51

一般比较重要的项目是计数，活力，细胞的生长曲线，间充质的诱导分化测试（成骨，成脂，成软骨），流式的表面标志物的检测。

作者: 风自在流年 时间: 2015-4-2 16:08

回复 afei198520 的帖子6 N6 }; ^$ k' u+ R7 j7 {3 v& N
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谢谢你的回复，我初次做流式，其中有些细节不太了解，现在我用染料标记了细胞，同阴性组一起做流式看染料的标记阳性率，请问散点图横坐标写着10的1次方到10的4次方，我把范围应该设在多少呢，还是按着可以区分画出出阳性细胞即可。谢谢

作者: scarletkiki 时间: 2015-4-3 11:38

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目前常用的也就是 Clonal efficiency, total cell output, proliferation assay , differentiation assay

作者: avbn 时间: 2015-4-7 14:13

从干细胞的本质属性着手，增殖，多向分化，免疫调节

作者: saier.HK 时间: 2015-4-7 14:54

干细胞做诱导成骨成脂鉴定实验。干细胞活力检测流式细胞可以做。

作者: chenlin080102 时间: 2015-4-16 09:45

可以做表面表型检测，最好的是做分化实验，比如考察所获得的细胞是否具有分化成神经、脂肪、软骨等潜能，如果都不能的话那就没什么用处了

作者: 风自在流年 时间: 2015-5-1 14:23

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谢谢您的回复，请问分化实验的具体是怎么做，我对这方面不是很了解，谢谢

作者: saier.HK 时间: 2015-5-4 12:48

回复风自在流年的帖子7 c! X4 {) Z5 R3 L4 F$ l' _

就是用诱导液培养干细胞一段时间，然后用一些鉴定方法鉴定诱导成功与否，在网上和文献能查到诱导液的配置，祝你好运！

作者: yunshi503 时间: 2015-5-5 08:15

我认为MSC的活性，最直接的方法是检测他的衰老指标，如b-gal，另外可以检测他的P16基因的变化。

作者: 风自在流年 时间: 2015-5-11 10:49

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请教一下干细胞活力检测怎么用流式做，不太了解这方面，请指教，谢谢

作者: saier.HK 时间: 2015-5-11 13:22

回复风自在流年的帖子4 j5 j! |. S" q: m8 `
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干细胞的活力检测，我还不太清楚，不过，其他细胞的活性检测，用MTT和CCK8能检测在一定时间内相对于正常的实验组细胞的多少，你可以多看看文献里怎么说，祝你好运。

作者: chenlin080102 时间: 2015-5-11 13:32

可以做生长速率检测，形态检测、活率检测和分化实验检测

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