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标题: [求助]关于NK细胞体外扩增的一些问题 [打印本页]

作者: nailute1985    时间: 2015-3-25 10:32     标题: [求助]关于NK细胞体外扩增的一些问题

由于小弟近期准备做NK细胞的体外扩增培养,之前没有接触过有关方面的问题,希望有实验经验的大神给予回答谢谢。: x0 r* k7 w3 D1 x, w. ~; T
1、如果做探索实验的话 外周血的用血量最小可以是多少?对分离PBMC的实验部分 ficoll分离法是不是最优秀的?8 t) w  P) r9 K4 w
2、在加入NK细胞刺激因子的时候需不需要加入K562肿瘤细胞株,因为有文献说K562可以提高NK扩增的效率。
0 q1 B9 z: h, J, E3、刺激因子除了IL-2,IL-15,需要加CD3单抗么?3 r/ _/ {  b( l; I' H! \  I, }5 W
4、培养基选择,针对NK细胞的培养基哪个是最好的?XVIVO15?1640或者是其他?
( A0 x$ x+ a# V5、杀伤性实验LDH方法可否?
作者: 奇幻雪蓝    时间: 2015-3-25 14:46

1.你是做学术研究还是临床治疗,如果是学术研究,上面的都可以试;8 V, e3 T  ?0 O( k1 q
2.如果是临床治疗,就不要加入肿瘤细胞株了,其他的请和医生沟通!
作者: Ernest    时间: 2015-3-27 10:42

20ml外周血,15ml分离单个核,5ml制备血清
作者: nailute1985    时间: 2015-3-27 10:45

回复 Ernest 的帖子
1 K  i/ V! I1 t2 b1 P
' `. d1 Q0 n# H* [什么意思?
# X% ?2 b% F$ g$ S6 W/ u, d
1 L% C0 \; P  H# p0 C
作者: syj7888    时间: 2015-3-27 11:21

K562肿瘤细胞株,现在有公司用来培养NK细胞进行治疗的,工程细胞培养法
作者: nailute1985    时间: 2015-3-27 13:47

回复 syj7888 的帖子
4 F. W; [/ _8 D, p5 W1 m( ]1 F* h
8 r2 i+ G2 e* V! ~  X, z用于细胞治疗的NK细胞体外扩增实验,用K562细胞刺激会不会在回输的时候对病人有风险?或者是在扩增出来后需要用射线杀死K562?
作者: suning5    时间: 2015-3-31 10:01

IL-2,IL-4,IL-7及IL-12等细胞因子,显著提高增殖能力
作者: suning5    时间: 2015-3-31 10:01

IL-2,IL-4,IL-7及IL-12等细胞因子,显著提高增殖能力
作者: nan_yu1695    时间: 2016-7-21 09:56

也摸索了很久,只加各类白介素没有成功过




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