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标题: [求助]关于NK细胞体外扩增的一些问题 [打印本页]

作者: nailute1985    时间: 2015-3-25 10:32     标题: [求助]关于NK细胞体外扩增的一些问题

由于小弟近期准备做NK细胞的体外扩增培养,之前没有接触过有关方面的问题,希望有实验经验的大神给予回答谢谢。
9 m2 G6 ], l) e) i1、如果做探索实验的话 外周血的用血量最小可以是多少?对分离PBMC的实验部分 ficoll分离法是不是最优秀的?* f/ Y7 B) x8 X9 d% B  N1 Q
2、在加入NK细胞刺激因子的时候需不需要加入K562肿瘤细胞株,因为有文献说K562可以提高NK扩增的效率。6 O2 l8 ^/ h: `. l6 E# e
3、刺激因子除了IL-2,IL-15,需要加CD3单抗么?$ x+ N7 ~* T5 T# k6 i/ ?9 l
4、培养基选择,针对NK细胞的培养基哪个是最好的?XVIVO15?1640或者是其他?
: t8 k4 Y) r% j9 o$ B4 T! x5、杀伤性实验LDH方法可否?
作者: 奇幻雪蓝    时间: 2015-3-25 14:46

1.你是做学术研究还是临床治疗,如果是学术研究,上面的都可以试;) d3 C& ~8 B! W( Z9 _5 S# P
2.如果是临床治疗,就不要加入肿瘤细胞株了,其他的请和医生沟通!
作者: Ernest    时间: 2015-3-27 10:42

20ml外周血,15ml分离单个核,5ml制备血清
作者: nailute1985    时间: 2015-3-27 10:45

回复 Ernest 的帖子
9 `5 V) w0 v, S8 k7 R$ J3 t# J
! f5 q0 Y2 H9 \+ c2 G2 K$ L  U什么意思?
6 a7 {8 }( o* C" ?' d" s: u. H2 V! p2 z

作者: syj7888    时间: 2015-3-27 11:21

K562肿瘤细胞株,现在有公司用来培养NK细胞进行治疗的,工程细胞培养法
作者: nailute1985    时间: 2015-3-27 13:47

回复 syj7888 的帖子
9 G' D2 s; H5 p/ }9 l6 B6 m  r5 J  R5 J$ T8 m" M
用于细胞治疗的NK细胞体外扩增实验,用K562细胞刺激会不会在回输的时候对病人有风险?或者是在扩增出来后需要用射线杀死K562?
作者: suning5    时间: 2015-3-31 10:01

IL-2,IL-4,IL-7及IL-12等细胞因子,显著提高增殖能力
作者: suning5    时间: 2015-3-31 10:01

IL-2,IL-4,IL-7及IL-12等细胞因子,显著提高增殖能力
作者: nan_yu1695    时间: 2016-7-21 09:56

也摸索了很久,只加各类白介素没有成功过




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