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标题: 转贴一个问题:关于处理一个6孔板的胚胎成纤维细胞 [打印本页]

作者: jason8085    时间: 2009-3-27 08:42     标题: 转贴一个问题:关于处理一个6孔板的胚胎成纤维细胞

请问大家一个问题哦   我已经用含有血清的培养基配置好了丝裂霉素的溶液   现在想处理一个6孔板的胚胎成纤维细胞,不知道每个孔要加入多少液体呢?处理多长时间呢?
作者: zpzp0312    时间: 2009-3-27 08:51

MMc可以直接溶解在成纤维细胞培养基中,处理时PBS洗涤1遍,加入含有MMc的成纤维细胞培养基,覆盖培养皿底部即可。+ u  l5 g+ T3 y0 u. U! m  n
孵育2.5-3小时' u+ n. t. V7 F
PBS彻底洗涤5遍,即可消化成细胞悬液制作饲养层。
6 n' m' L4 b5 h建议使用5天以内的,一周以内也可以。
$ h1 j% \* Y! @$ }* A1 a0 \并且成纤维细胞要使用5代以内的,否则细胞因子的分泌会显著下降!
作者: have-a-rest    时间: 2009-3-28 10:50

回答正确,有一种懒惰的做法,如果密度合适,PBS洗涤后不用消化,可以直接作为饲养层。
作者: zpzp0312    时间: 2009-3-29 10:21

3# have-a-rest # |+ t* J4 w0 n7 Q8 V- ]
呵呵,楼上好主意啊!
作者: 开心馒头    时间: 2009-3-30 23:01

很好,向高手学习
作者: 菲儿    时间: 2009-3-31 09:20

好资料
作者: wangabu    时间: 2009-4-19 08:14

好贴,顶一下,谢了
作者: waji_42    时间: 2009-4-20 08:12

谢谢
作者: 猪笑天    时间: 2009-4-22 12:41

很好




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