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标题: 这一份外周血CIK养得匪夷所思....求大神解惑....Orz [打印本页]

作者: baby00000003    时间: 2015-4-16 15:47     标题: 这一份外周血CIK养得匪夷所思....求大神解惑....Orz

本帖最后由 baby00000003 于 2015-4-16 15:51 编辑 8 v- {/ \% {( x1 r

3 G  @% \' N# D2 X3 {7 `还是先上图吧..
. ~' W5 L7 o! s. p+ X0 [* W[attach]68891[/attach]9 d# X' H; J3 I/ J
流式检测CIK表面标志,CD3/CD56,如上图
% f- V6 c2 I; \' h% H' C- f1 ]* l* L  B  u& |; H
这是同一来源,培养至D14和混合DC培养至D5的外周血CIK* K4 I. O$ J; K. d2 z2 A
细胞增殖速率、观察形态没有特别异常,但单独培养的CIK中CD3+比例仅有75%,CD3+/CD56+比例~13%;混合培养组中上述比例仅为60%和2%
2 P6 E( g0 I9 i6 H& ?+ I% Q$ a7 O1 m就细胞形态而言,混合培养组细胞可见体积增大及细胞内分泌颗粒增加,这应该是细胞成熟的形态变化(个人理解)
/ }' C. m$ Q' |6 y8 k- R+ o$ I
想请教各位老师,为什么随着CIK细胞的成熟,CD56+比例反而降低了很多呢,甚至比单独培养的CIK更低?- d; i/ L+ V( c0 F( \3 A) E6 N
再上个混合培养的CIK照片吧,各位老师看看可有什么异常?4 t! x+ ^  \- |& @' F
[attach]68894[/attach]
' W$ l" C* Y3 C- a$ q9 W/ V5 l混合D0
8 m1 ^1 f" x3 g1 c- J
. x' E- F+ b: N$ {. _; V9 o/ A[attach]68893[/attach]4 q7 F$ a2 a4 G( `) a$ P' f
[attach]68892[/attach]
: {7 |) E. b4 u3 ], l这2个是混合D4
5 r) _% h6 ^: N4 q+ u7 [4 v3 z; a
附加信息,样本来源为30岁男性,健康状况良好,无不良嗜好或非常规工作生活时间7 \; `2 n6 y0 p5 z# ~

作者: snowny007    时间: 2015-4-16 16:02

同求,个人也做过DC+CIK混合培养实验,混合后,双阳性比率略有增加,但细胞增殖数量却不如CIK单独培养。* t8 D+ R* a3 `( d

作者: lyj-0017    时间: 2015-4-16 17:12

回复 baby00000003 的帖子
+ _' w" m9 L  m: K- R. ^+ U$ G; d; T* O8 }7 ]3 i* Y/ t
没有混合培养过,不是太懂。以前见过夏建川的课件里也有混合培养的流式检测图,他那个混合培养的细胞中CD3+CD56+的比例也不高,还不到4%。我建议你做个平行试验,再将两组细胞分别进行检测看看。
作者: baby00000003    时间: 2015-4-17 08:03

回复 lyj-0017 的帖子1 I" K4 `& U2 z+ u$ O$ v7 W  R

' S6 y9 r5 ^; c1 n1 ~$ |) N. v可是之前混合培养的CD3+/CD56+都能到40%以上呢......困惑ing...
作者: lyj-0017    时间: 2015-4-17 09:33

回复 baby00000003 的帖子
' n; X5 D" Y5 d4 Y( t* W$ u
5 D: F/ L. O9 d8 a0 o我CIK单独培养有的患者都能达到60%多来,那还比你这个混合培养的好很多,所以说,混合培养相对于单一培养没有什么优势,况且患者也存在个体差异的问题。
作者: hsu86    时间: 2015-4-18 08:41

理论上混合培养能刺激双阳性的比例,但是在实际培养中发现单独培养的CIK不必混合培养的差,而且单独培养的CIK杀伤实验结果也不必混合培养的差。) K1 Y) b3 h/ e" W
就图片而言细胞形态是趋向于成熟的
. a9 B$ X9 m) _当然我没有用抗原刺激DC细胞,不知道是否是这个原因。




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