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标题: 细胞消失了 [打印本页]

作者: 倒腾细胞 时间: 2015-5-21 19:44 标题: 细胞消失了

各位前辈有遇到过传代细胞时 PBS洗了两遍加入胰酶拿到镜下想观察细胞状态结果发现没细胞吗

作者: defu 时间: 2015-5-21 23:28

是不是对错焦不在一个平面了

作者: cleargreat 时间: 2015-5-22 11:40

是一个细胞都没有了，还是有残留的？在PBS清洗前后，加胰酶前后都在镜下观察一下就能确定原因呢，是PBS清洗之前细胞都死光了被PBS清掉了，还是PBS清洗力道太大，把细胞清洗掉了。又或者是显微镜没用好。

作者: zxkll 时间: 2015-5-22 12:01

如果你确保有细胞的情况下
我比较偏向于2楼的回答* K$ j8 `1 Y8 r0 Z6 S) M8 z- K
不加胰酶的情况被pbs洗掉的可能性很小5 ~2 d& P) N- g. W: u: S& O0 s! z& T
而且即使洗掉不可能都洗掉, Q( R. E9 |* E; y$ T
确定下你显微镜吧

作者: 倒腾细胞 时间: 2015-5-23 00:44

回复 defu 的帖子( s* ~) G, e& _1 D: t; n# n& U
- o* D7 ?! A' j) s
显微镜没有问题因为对照孔正常

作者: 倒腾细胞 时间: 2015-5-23 00:45

回复 cleargreat 的帖子

有点小失误清洗前没有镜下观察个人觉得是细胞全部死了脱落所以被洗干净了

作者: 倒腾细胞 时间: 2015-5-23 00:46

回复 zxkll 的帖子) Q, Y" L" [6 y8 w. ]( n
6 `% _ u$ `9 N3 o$ D$ V. `/ w
显微镜没问题应该是一开始细胞就脱离漂浮了吧所以很容易就洗干净了做了处理的就这情况没处理的就正常

作者: dollar007 时间: 2015-5-25 09:09

回复 cleargreat 的帖子$ d" R9 a O. P+ d- U V+ W6 |

被洗掉的可能性更大。" K) ]1 ~7 h8 r4 F0 }2 u- v
你用的估计是无血清培养体系，贴壁不牢，清洗的时候要注意。

作者: 倒腾细胞 时间: 2015-5-25 13:03

回复 dollar007 的帖子

不是的前辈洗掉的都是跟其他细胞共培养的应该是共培养的问题？

作者: 121qwq 时间: 2015-7-22 16:39

估计你是离心管拿错了

作者: nkcell 时间: 2015-7-23 11:25

首先你确定在用PBS洗之前培养瓶中是有细胞的么，如果有细胞那只能说明你的细胞状态不是很好，已经成片往下掉了，只是掉下的时候你没有发现就是了

作者: daiying5200000 时间: 2015-7-28 11:02

洗之前没有用显微镜观察，所以不好判断。说不定细胞死了，一洗就没了

作者: 王苍金 时间: 2015-12-22 15:53

显微镜焦距不对

作者: optimus 时间: 2016-1-21 09:42

细胞密度过大，PBS清洗的时候细胞会成片的掉。

作者: 倒腾细胞 时间: 2016-1-23 11:10

本帖最后由倒腾细胞于 2016-1-23 11:10 编辑
7 `" k. i3 w/ s% P s8 D6 M
回复 optimus 的帖子+ R0 N, T. u" A6 X% K5 K2 n0 m# c

多谢前辈" b) j f+ u! T. G" \
MSC这种贴壁细胞也会是吗？因为密度过大细胞重叠生长了？

作者: optimus 时间: 2016-1-25 09:32

回复倒腾细胞的帖子) a% T& v. V& k7 U9 Y8 Y3 `

不是前辈哈，就主要是密度太大，细胞之间没有了生长的空间，叠起来了，我遇到过几次，看细胞形态没什么区别，但是轻轻一晃，一片就全掉了。

作者: firstaider 时间: 2016-2-2 16:42

PBS清洗之前细胞都死光了被PBS清掉了

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