干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 有用流式分选获取纯化的MSC吗？ [打印本页]

作者: yahooyeah 时间: 2015-6-24 15:39 标题: 有用流式分选获取纯化的MSC吗？

有用流式分选获取纯化的MSC吗？. ]5 J! z/ d+ W* C) K/ [8 L$ ]
使用的方法是骨片迁移MSC方法，由于获取纯化MSC较为困难，目前正尝试使用流式分选方法获取CD45-CD11b-细胞并进行继续培养。
但观察发现细胞状态有一定影响。请问各位有人做过这方面的实验吗？

作者: daviddow 时间: 2015-6-24 20:17

很少有人这么做。都是直接培养的

作者: s02260441 时间: 2015-6-25 11:52

回复 yahooyeah 的帖子$ V8 ^6 ~) I$ R- S
; q7 i+ C3 h4 R0 j
我想应该是Sorter对细胞造成伤害了。, v, o# R, {, N0 u

导致细胞不够健康。
6 C' W0 V- }) ?7 c( [
分选多多少少都会伤害到细胞。

可能要从分选方式作改善。

作者: yahooyeah 时间: 2015-6-25 13:23

回复 daviddow 的帖子" {, e* y* [5 {# x* f; {" h$ V
r3 J5 E* Q1 U: l! W5 y9 S
比较困扰的问题是，直接分离培养获取纯化MSC仍然存在困难。我已经把所有条件都摸索过了，但是依然很难获得稳定的纯化方法。! [# |# n# T! Z3 @; q; b& |

我的方法是骨片消化法迁移出MSC，存在困难啊。

作者: 蜗牛爱贝贝 时间: 2015-6-26 11:10

骨MSC没有接触过，不过个人感觉，流式成本太高再次就是对细胞有伤害，所以不太建议用流式，还是用培养方法比较好些，你可以变换下因子看看

作者: yahooyeah 时间: 2015-6-26 17:09

回复蜗牛爱贝贝的帖子, t8 ?1 y1 O; V2 Q9 \

真是十分困惑，觉得分离纯化没有想象那么简单，但是一直找不到好的稳定方法。

作者: zhangshich 时间: 2015-6-30 08:57

MSCs本来就是一群混杂的细胞群，并没有说哪个标志物表达就一定是MSCs，所以分离纯化的MSCs好像不太合适，但可以从分离的MSCs中分离出某一细胞群，比如CD90+CD34-等

作者: daviddow 时间: 2015-7-6 17:40

回复 yahooyeah 的帖子
' G' ?2 M) y2 v& Z& m$ _# T7 G
很少分离啊。别人基本都是自己制备的，培养出来的就是啊

作者: 蔚海橙天 时间: 2015-7-7 13:43

你分的是人的还是动物的？如果一定要用流式分的话，一些实验细节注意一下：培养基的成分，是否有加一些supplements，分选时候机器的调节，分选后最好用完全培养基或者加大血清浓度，看看你分出来的细胞会不会好一些

作者: yahooyeah 时间: 2015-7-14 09:17

回复蔚海橙天的帖子
, f, c6 C/ \4 f8 U! ^2 H
尝试了几次，培养后效果不好，增殖传代效果不佳，看来有些细节需要注意下

作者: ywx6302706008 时间: 2015-10-27 21:01

应该是用STRO1磁珠吧，或者流式分选。

作者: yeahjl 时间: 2015-10-28 09:07

最近看到美天旎出了CD271分选MSCs

作者: yeahjl 时间: 2015-10-28 09:07

不知道有没有战友开始采用磁珠分选呢？

作者: ywx6302706008 时间: 2015-10-29 10:27

可以用CD271抗体

作者: ywx6302706008 时间: 2015-10-29 22:35

不过CD271或者stro1好像都只能用于提取骨髓间充质，因为其他组织来源的间充质不表达这两个marker

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)