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标题: 请教各位老师这份细胞是怎么样个情况啊 [打印本页]

作者: yzy017101    时间: 2015-6-26 10:57     标题: 请教各位老师这份细胞是怎么样个情况啊

本帖最后由 yzy017101 于 2015-6-26 10:58 编辑
1 [* c: L' E% ~( p$ e/ b* Q
7 d4 [7 _+ X: D; N  }; x请教各位老师这份细胞是怎么样个情况啊,这份细胞培养到第六天的,到第四天的时候发现有些异常,做微生物检测无异常。下面图片第一张开始时D5至D2的照片。[attach]70274[/attach][attach]70273[/attach][attach]70272[/attach][attach]70271[/attach]
作者: saier.HK    时间: 2015-6-26 12:26

这是什么细胞?
作者: yzy017101    时间: 2015-6-26 14:28

回复 saier.HK 的帖子$ m1 D. Q  }' g# `& |$ R
8 I$ Z; b1 {. j  C+ n/ r# ?# u, I
CIK细胞
作者: 小样    时间: 2015-6-26 14:42

第六天应该是增殖速度很快的时候,你这个。。。确定操作时候无菌么?做支原体检测了吗?
作者: 小跑    时间: 2015-6-26 15:34

染菌应该不会。黑色絮状的团块,可能是细胞慢慢凋亡了。
作者: hyg5481655    时间: 2015-6-26 15:43

你从哪看出来异常的?
作者: liuyanli123    时间: 2015-6-26 15:51

考虑下是否为支原体感染,细胞有凋亡破碎的情况
作者: yangpan521    时间: 2015-6-26 15:53

我没看出来有异常
作者: yzy017101    时间: 2015-6-27 10:42

回复 yangpan521 的帖子1 T2 s8 W6 E0 S- k

6 u' n0 i. s, E3 N1 q  W& o7 U前三天的时候细胞挺好的到第四天有点异常,第五天的时候细胞减少百分七八十。
作者: 小刘    时间: 2015-6-28 09:11

检查患者化验单,是否该患者服用过药物
作者: baby00000003    时间: 2015-6-29 07:54

我猜,你这个培养体系里面加过自体血清吧?或者是别的什么血清?
作者: yzy017101    时间: 2015-6-29 08:38

回复 baby00000003 的帖子
( w! Q/ Y4 k8 b' v# D2 \  R5 m) W+ p, T9 @' P2 J6 D
有加自体血清,到现在细胞基本没了
作者: baby00000003    时间: 2015-6-29 09:40

回复 yzy017101 的帖子# z$ _4 O' B# T/ p, P

3 @/ U' O0 o6 N条件允许的话,可以尝试把自体血清热灭活一下,然后离心,0.45um、0.22um分别过滤一次(可能非常费时费力),也许培养效果会好一点
9 Q, N) m9 v9 w( _+ ^4 d6 Q/ v- l0 W更建议改用无血清体系,稳定性好~
作者: yzy017101    时间: 2015-6-29 10:45

本帖最后由 yzy017101 于 2015-6-29 10:46 编辑
( r& s: Q/ n& p8 y' b, @% i9 b
/ ^1 D# K2 Y& W* l& L. L回复 baby00000003 的帖子
6 O2 U* e4 F& D) B, q4 i* j, v5 _; p" Q" o& @! U3 P) {* ]
经灭火和过滤后使用的,会不会是被支原体污染或者是细胞自己本身的问题?- z) y  P* h$ s& V; \
) ?% V: M0 |6 z) J' x  M5 i8 W

作者: baby00000003    时间: 2015-6-29 11:11

回复 yzy017101 的帖子! i7 S* L+ o4 {' T- _

6 s1 V( u$ c6 E" @3 U虽然不敢特别肯定地说,俺觉得有必要调整一下细胞因子的浓度。比如,IL-2可能加多了,或者血清可能浓度过大
作者: yzy017101    时间: 2015-6-30 08:28

回复 baby00000003 的帖子' f1 i  F3 r% f  i

& V0 i; M6 ~& O3 G$ J细胞因子浓度都是那么加的,你们自体血浆浓度百分多少啊?
作者: long3390hai    时间: 2015-6-30 11:06

细胞出现凋亡,看最后一张图片,没什么问题,继续养就可以了,因为个人的细胞差异,是正常的。
作者: baby00000003    时间: 2015-7-1 07:43

回复 yzy017101 的帖子
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" {  k+ P& P( [6 ^+ V- d) x俺不在CIK里面加血清,一般采血量有大有小,血清里面抗凝液比例就不一样,加上各人体质不同,这个血清的量不好控制
% b8 M8 ~  H* J0 X3 \' v" YDC的话,加个2%俺觉得足够了,各人习惯哈,其实不加也可以的~
作者: 云端漫步中看雨    时间: 2015-7-16 15:51

支原体 感染了好像
作者: yinxiaoguang    时间: 2015-8-28 13:58

可能是支原体污染
作者: cheeray    时间: 2015-8-28 16:01

细胞不圆润,状态不好,有碎片。
作者: cheeray    时间: 2015-8-28 16:02

自体血清的添加量,应该在1%左右就可以了。。灭活后加入。
作者: zgzy    时间: 2015-8-30 16:11

细胞凋亡特点明显,怀疑是支原体污染或患者自体细胞本身的状态问题。
作者: yzy017101    时间: 2015-8-31 10:39

回复 zgzy 的帖子
" Z! h+ Y8 [3 a# s. h$ a
( ?. M0 M  G% s+ Y- [" C% j检测过了不是支原体污染,刚刚开始细胞状态很好,后面突然来一下就成这样了
作者: chenguangyu    时间: 2015-9-10 09:39

如果图片倒过来,细胞越来越多正常。你这不知道怎么回事,细胞因子有没有加错的可能?




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