干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 间充质干细胞诱导成脂 油红O染色 [打印本页]
作者: saier.HK    时间: 2015-7-8 15:09     标题: 间充质干细胞诱导成脂 油红O染色

请教各位战友，图片是骨髓间充质干细胞诱导成脂的鉴定，油红O染色，图片如图所示，算是成功了吗？为什么这么难看？
作者: FreeCell    时间: 2015-7-8 15:17

saier.HK 发表于 2015-7-8 15:09
7 v; n$ l, k  I6 d/ G7 y请教各位战友，图片是骨髓间充质干细胞诱导成脂的鉴定，油红O染色，图片如图所示，算是成功了吗？为什么这么 ...

% _. z2 N) o# A* T+ v) i: [8 }% V, q嘻嘻，油红O没溶好
作者: saier.HK    时间: 2015-7-8 15:18

回复 FreeCell 的帖子
1 E$ t: ?9 W0 A( E4 M2 |" ^/ m+ R3 s; J' k% T
你是怎么配置的，如何溶解的啊，大侠？
作者: FreeCell    时间: 2015-7-8 15:31

0.5g油红O干粉60℃水浴加热溶于50mL 75%乙醇中，离心得鲜红色上清液备用。
作者: saier.HK    时间: 2015-7-8 15:38

回复 FreeCell 的帖子  T3 ^$ j5 s9 _4 s
- Z9 i- L- x6 m/ ^
嗯 谢谢！
作者: saier.HK    时间: 2015-7-8 15:39

回复 FreeCell 的帖子
* o  I% k/ w3 d% j/ Y+ e; ^. u
7 i7 @. y* Y! y2 S& y/ }. U! s我这几天试试
作者: 刘森泉    时间: 2015-7-9 11:49

回复 saier.HK 的帖子
. b& v7 j1 I. ~3 D8 s" O5 G, v+ y9 A! Z
成脂诱导液自己配的还是哪个公司的？油红O染液我买赛业的，不错，很便宜，100ml几百块钱吧。
作者: saier.HK    时间: 2015-7-9 13:56

回复 刘森泉 的帖子1 H! d& Q- p/ N4 T& q4 O9 K/ l

& U/ O% v  d9 w( i9 j7 x我是自个配的，买的粉末，
作者: 夜光猫    时间: 2015-7-9 14:52

油红O用之前记得过滤，其次，图片用大一点放大倍数的比较好看，20X，40X，能看到红色透亮的脂滴
作者: saier.HK    时间: 2015-7-10 10:12

回复 夜光猫 的帖子+ U. s, n7 S: H5 Y5 J
1 g  D# |9 Q9 Y% J( V. X/ G  U
第一次配置的时候 过滤了，看着溶液也是通透的，结果为什么还是这样呢
作者: saier.HK    时间: 2015-7-10 10:13

回复 FreeCell 的帖子
! r! R' z. V* s& H. z# w: C
# T! H4 [/ Z. h# ?6 X9 q/ D: Q我看文献和好多地方都说用异丙醇溶解，这和57%乙醇有什么不一样吗？
作者: 刘森泉    时间: 2015-7-10 17:39

回复 saier.HK 的帖子
* R8 p: ^2 }, K+ N% L
7 F) X- G, H0 A4 }诱导液是自己配的还是染料是自己配的？
作者: FreeCell    时间: 2015-7-10 21:11

回复 saier.HK 的帖子- F3 N$ q& g2 \. ]1 @
' l0 ^" l' ~3 A, p
理论上都可以，但异丙醇溶解残渣过多容易造成染液浓度不够
作者: 夜光猫    时间: 2015-7-11 00:54

现用现过滤。请问诱导分化的时间有多长呢？诱导过程中，在光镜下有没有看到油滴状结构的生成？
作者: 老姜    时间: 2015-7-13 21:07

图片不清楚，但很不像诱导成功。诱导成功处，没染色细胞的形状一般个大，呈长梭形，更接近似棱性；胞浆中充满脂肪滴，边缘的脂肪滴较小，小脂肪滴汇合形成的大脂肪滴往往在中央，靠近核。油红O染色脂肪滴呈红色或橘红色在细胞内。因此你的图红色呈团块状，应该不是细胞被诱导呈脂肪滴的。
作者: saier.HK    时间: 2015-7-14 08:14

回复 夜光猫 的帖子9 `, @& J9 h) r9 m# F6 W
. \& d* T2 U" F2 u0 i6 @4 b
诱导15天，有看到油滴
作者: saier.HK    时间: 2015-7-14 08:17

本帖最后由 细胞海洋 于 2015-7-14 14:33 编辑
' L' w8 I6 [/ S# Q' p9 w
+ n8 b( ]8 Z3 A9 ~; T: A回复 老姜 的帖子2 \4 R3 d4 J' r' r2 U

8 R2 s( R1 Y( z) a' t- K4 I$ f请教一下老师，您是怎么诱导的？诱导液的配方，和油红O的染色方法，能发一份资料吗？非常感谢！
作者: zhangjieyctc    时间: 2015-7-14 08:26

回复 saier.HK 的帖子! q) _* n3 y" N# o( f

2 ^* W" ^5 t- m/ m
作者: saier.HK    时间: 2015-7-14 11:35

回复 zhangjieyctc 的帖子
* }. G9 F1 y% Z0 [5 e2 E9 _' d9 ~6 a/ a( |
这是什么意思
作者: 细胞海洋    时间: 2015-7-14 14:33

回复 zhangjieyctc 的帖子% [4 q5 o5 B9 O. f0 @) A
6 b/ {' v/ v/ P( B5 T% o7 ]
回复 高级模式 附件上传
作者: 老姜    时间: 2015-7-14 15:23

几年前做过。印象中的关键点是①血清要用质量差的，血清质量好细胞不宜向脂肪细胞分化——很关键啊；②油红O染色前的固定不宜用酒精（脱脂），应轻轻操作③诱导的试剂不要过期，先将使用的粉状试剂配成高浓度的储存液，使用时再配成应用液。
作者: 老姜    时间: 2015-7-14 15:23

几年前做过。印象中的关键点是①血清要用质量差的，血清质量好细胞不宜向脂肪细胞分化——很关键啊；②油红O染色前的固定不宜用酒精（脱脂），应轻轻操作③诱导的试剂不要过期，先将使用的粉状试剂配成高浓度的储存液，使用时再配成应用液。
作者: saier.HK    时间: 2015-7-14 15:44

回复 老姜 的帖子# V- q3 t  c* E7 |
+ D$ a; y; M6 `- {) d. v' c
谢谢，非常感谢！



欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5