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标题: cik细胞培养过程中，加了病人的血清，如果血清中存在较多成纤维蛋白会怎样 [打印本页]

作者: luoan 时间: 2015-7-18 22:28 标题: cik细胞培养过程中，加了病人的血清，如果血清中存在较多成纤维蛋白会怎样

cik细胞培养过程中，病人血清中存在较多成纤维蛋白，对细胞生长有什么影响？为什么？

作者: weijunning 时间: 2015-7-20 09:30

使用前先将病人血清进行灭火，即56℃30min，之后3500rpm高速离心20min，去除沉淀物。经过这样处理的血清，才能用于后续的细胞培养。

作者: 刘艳85 时间: 2015-7-20 11:12

会影响细胞的生长，细胞数量会越来越少2 [; c: z3 m' F0 ]0 ~) `

作者: gondobar 时间: 2015-7-20 13:06

56℃30min灭活，之后2100rpm高速离心20min。不灭活离心影响细胞生长。

作者: 老姜 时间: 2015-7-21 14:56

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请教：病人的血清进行灭活，能够去除其中什么影响细胞生长的成分？这种血清是患者自体的，不涉及异体排斥物等，为何需要灭活？

作者: weijunning 时间: 2015-7-22 13:48

回复老姜的帖子' ?5 J+ `( w/ s: r1 v9 P# \" p
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血浆中都有补体成分，这些成分不利于细胞培养；及时你买的成品血清，也都是经过厂家灭火补体后才进行罐装生产的。并且病人的情况千差万别，血液质量都不是很高，就更需要灭活后再使用了。你可以试一下，灭火后，血清会清澈许多，培养细胞时，不会有絮状物的干扰。

作者: 老姜 时间: 2015-7-22 21:40

谢谢！学习了。

作者: 老姜 时间: 2015-7-22 21:41

谢谢！学习了。

作者: chenguangyu 时间: 2015-7-23 16:19

如果不灭活,可能会形成一层膜,如果膜特别多的话,会影响细胞的生长.

作者: luoan 时间: 2015-7-24 11:40

回复 chenguangyu 的帖子% T5 Y @8 E' X5 g+ V
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膜是怎样形成的，主要成分是什么？我之前有看到有膜的，细胞生长得不好。

作者: cheeray 时间: 2015-7-24 14:07

为了将血清中的补体灭活。血清中存在补体会对细胞生长不利，但现在的进口血清大都不需要灭活了。
虽然有人还是不放心就灭了。。但是。灭活也有可能损失血清中的营养成分。。# z$ v# ~& V( f5 ?: E: b

作者: yuanyecat 时间: 2015-7-24 17:33

自体血清不用灭活性吧？

作者: 刘艳85 时间: 2015-7-28 07:52

回复 weijunning 的帖子* V" h! L8 y6 q
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想问一下，CIK在培养的第8天出现絮状沉淀（血浆已经灭活），而前期没有出现该现象，这是什么原因导致的啊？谢谢！

作者: weijunning 时间: 2015-7-28 15:19

回复刘艳85 的帖子
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第八天细胞已经处于对数生长期了，因为一直是补液，从未换过液，随着细胞数量的增多和代谢物的增加，两者会结合形成絮状沉淀；如果是在培养袋内培养，拍打一下就可以；也可以进行全部换液，解决此问题。

作者: fenlichong 时间: 2015-7-28 21:13

不灭活或灭活不彻底的话，培养基可能会呈果冻状，严重影响细胞生长。且培养基若放置时间过久，底部也可能会有沉淀生成，最好离下心再用。

作者: 小刘 时间: 2015-7-29 15:29

血浆是离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体，其中含有纤维蛋白原（纤维蛋白原能转换成纤维蛋白，具有凝血作用），若向血浆中加入钙离子，血浆会发生再凝固，因此血浆中不含游离的钙离子。血清是离体的血液凝固之后，经血凝块聚缩释出的液体，其中已无纤维蛋白原，但含有游离的钙离子，若向其中再加入钙离子，血清也不会再凝固。这就是说血浆成分很复杂，不去除纤维蛋白原，就可能导致凝固，影响细胞生长，如果不灭活也不行，灭活主要灭活补体，避免血浆在细胞生长中干扰，一般1200g 15分钟离心效果最好

作者: 小刘 时间: 2015-8-11 15:30

那还用说，纤维蛋白会影响细胞的生长，到时细胞培养到一半可能终止生长，因为纤维蛋白原是血浆的一部分，具有复杂成分，所以尽可能不要吸到。

作者: zhanglu8677 时间: 2015-12-25 14:51

回复 fenlichong 的帖子
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我遇到一情况，用的病人的自体血浆，也灭活了，培养CIK液也出现了下层果冻状，晃过之后并把果冻状物吸出，后期会对细胞生长影响大吗？细胞还能不能长起来啊？请指教谢谢

作者: 小馬 时间: 2015-12-25 17:07

会有絮状甚至胶状沉淀，影响细胞状态

作者: 细胞海洋 时间: 2015-12-27 12:14

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