干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 培养箱污染问题 [打印本页]

作者: fsj1987 时间: 2015-8-6 09:13 标题: 培养箱污染问题

co2培养箱做沉降菌，37度培养两天后长菌，培养箱污染了，请问大家有没有什么好的解决办法啊？

作者: baby00000003 时间: 2015-8-6 09:33

箱子的大环境本来就不是洁净级的，拧好瓶盖，盖好平皿，培养袋管子口保护好
勤喷喷酒精足够啦～3 a1 U8 O) L3 V9 Q9 w( x- ?7 H5 c
非要拆箱子清洁的话，3个月1次，拆下来hepa看看有没有发霉什么的....

作者: tingting2113 时间: 2015-8-6 09:36

在培养箱内做沉降菌？这个真没做过，是检测吗？我们一般拿培养基做检测。如果污染了就要及时处理，把里面的水清理干净，撤掉里面能拆卸下来的隔板和零件，然后用75%的酒精擦，箱体里面也要擦到。然后开启培养箱自带的灭菌模式（紫外或湿热）。如果条件允许，最好重复几次。

作者: chenguangyu 时间: 2015-8-6 09:46

培养箱高温消毒

作者: 免疫与细胞 时间: 2015-8-6 09:55

按照说明书高温湿热灭菌，之后用酒精擦拭

作者: long3390hai 时间: 2015-8-6 10:02

培养箱现在有培养细胞吗，有的话检测一下，对培养箱进行灭菌处理，有一些培养箱是能进行湿热灭菌的，先仔细清理一下，在灭菌

作者: 杏色玻璃 时间: 2015-8-6 10:17

隔板、水盘等取下酒精擦拭后包好高压，培养箱本身也需要高温灭菌，这个他有自带程序。

作者: aochongyu 时间: 2015-8-6 10:19

一般都有90度高温消毒吧，消毒呗，细菌污染难免啊

作者: Ivan0108 时间: 2015-8-6 12:06

我们实验室平常培养箱的消毒方法：（清洁前最好开紫外30分钟）$ @6 j5 B% x9 _- _
1、隔板的清洁：先将隔板卸下，用干净纱布沾新洁而灭擦两遍；- D! U# X5 U1 L7 k* q
2、箱内壁用新洁而灭擦拭后再喷75％酒精，关门熏蒸15分钟；
3、盛蒸馏水的盘子：把盘里的水倒掉，用新洁而灭擦拭，干后倒入三蒸水；4 N) Y5 T: e* G
4、装好板后，再喷75％酒精关门熏蒸30分钟。( e; {5 m q5 _& ~- p8 `
5、培养室开紫外照30分钟以上。( @( P# k9 k* F. C+ v; O \& e
另如果有孢子污染比较困难：用高锰酸钾加甲醛1：1比例熏一遍。注意要是熏的话千万注意混合之后马上离开，然后密闭细胞培养室，味道很刺激的。这种消毒最彻底。最好在养细胞前消毒，否则，确实没地方放细胞。挥发性的甲醛有毒，易燃、易爆。如果在培养箱内残留甲醛的话，细胞会死光光。6 l# n8 O+ T& T1 T% I

作者: momoenn 时间: 2015-8-7 13:11

回复 tingting2113 的帖子+ q: o! G8 g: U0 j5 P# ^9 m! X
! _1 I1 }; W4 n2 j7 Y- d
培养基检测不就是沉降菌吗？不是浮游菌。

作者: tingting2113 时间: 2015-8-7 13:36

回复 momoenn 的帖子+ z/ a) D6 h" Z# ^5 H( Y+ x/ R' t: S( J9 w
8 q0 `; u5 O \. Y0 v
您能说说怎么做的沉降菌检测吗？我们就是把装了培养基的培养皿或者瓶放在培养箱的不同位置，培养几天看看。

作者: momoenn 时间: 2015-8-7 13:40

回复 tingting2113 的帖子
: Z8 m/ T- y8 N2 \% N
我们培养皿用的血平板，在培养箱的几层各放置1个，取样约半个小时的时间，然后取出，放在别的培养箱中培养。和你们差不多啊，但是养菌的平板不在养细胞的培养箱中培养

作者: tingting2113 时间: 2015-8-7 13:45

放置血平板的时候培养箱属于正常开启状态吗？取出在养菌的箱子中养，如果长菌啦，有没有可能是养菌的箱子里的呢？

作者: fsj1987 时间: 2015-8-8 10:23

非常感谢大家，我做的是沉降菌，我的培养箱不带紫外，我采用了以上75%酒精擦拭，然后用臭氧连擦几天，看看怎么样吧

作者: cheeray 时间: 2015-8-10 10:37

培养箱就用酒精或者其他的消毒剂交替擦拭。隔板的话你可以拿去高压灭菌的。

作者: 小刘 时间: 2015-8-11 12:31

培养箱污染你要先从几个方面下手找原因：一，检查你使用的平板是否有问题，是真污染了还是检测平板在操作中污染了，建议复检；二，复检后还是长，那你爬里面可以问一下，哪里的味道比较大一些，因为培养箱自身是个百级洁净空间，带自己净化系统，然后进行一层层拆下，看哪里有滋生的细菌，酒精消毒，实在你感觉找不到污染源，那就建议把净化隔板上边全部拆下，进行消毒，这个事极限了，一般哪里容易长霉菌，只能帮到这了，要不你把培养箱搬过来我帮你清洁啊，呵呵呵

作者: CART 时间: 2015-8-11 14:23

培养箱污染的消毒方法楼上已经有人说了，大致都差不多。关键是日常的维护，保证以后不要再污染。
我们实验室的方法是，定期消毒，即使没污染也2周消毒一次，方法同9楼的差不多，酒精擦洗+照紫外。我们是几个组公用的培养箱，因为外环境维护的好，所以即使有几次个别人自己操作不小心把自己的细胞污染了，也没有殃及池鱼，把整个培养箱的细胞全污染了。

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)