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标题: CIK细胞培养的最大密度 [打印本页]

作者: momoenn 时间: 2015-8-8 10:45 标题: CIK细胞培养的最大密度

如题，各位大神，考虑到培养成本的问题，希望吧培养基的营养最大限度的利用起来，所以想问一下，CIK培养的最大密度是多少呢？

作者: 小刘 时间: 2015-8-9 09:50

没明白你的意思，一般它增值都有过程，先在瓶子里养，4天后再转移到培养袋中，转袋的密度是1*10的5次方，细胞成熟后15天密度就在5*10的6次方了

作者: luoan 时间: 2015-8-9 11:39

每个病人的细胞生长是不一样的，要充分利用培养基的话每次加液量不要太大，分多次加液，培养颜色变黄了再加。我们的细胞密度在14天时大概1.0*10的9次方.

作者: cheeray 时间: 2015-8-10 10:34

密度的控制是毕业重要的。。需要观察培养基营养耗尽的情况。再补液。控制在收获前要使细胞处于最好的状态。不然会死亡

作者: momoenn 时间: 2015-8-10 13:13

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是密度能达到1X10^9个/ml吗

作者: momoenn 时间: 2015-8-10 13:15

回复小刘的帖子9 u" w. {. G6 n3 r* m

奥，这个密度应该挺大的了，能不能问一下，你们用的什么培养基呢？这样的密度下，细胞活率有多少呢

作者: luoan 时间: 2015-8-10 13:15

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不是，这怎么可能，这个是细胞量，密度1X10^6个/ml差不多

作者: momoenn 时间: 2015-8-10 13:19

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嗯。

作者: 小刘 时间: 2015-8-11 12:24

回复 momoenn 的帖子. b5 N l* x' X( W: E0 O: o
- X9 ~ p* T. G. L9 R
用的TAKARA T-551，1640，但是主要是工艺细节的完善，别的培养基也用

作者: colins 时间: 2015-8-11 13:31

如果是追求细胞密度的话，可以看看GE的波浪生物反应器，宣称可以使密度达到7次方，有机会的话可以试试

作者: baby00000003 时间: 2015-8-11 16:17

不要图这个便宜，细胞数控制在5*10E5－－－1*10E6之间，培养基变色立刻对半稀释，不然影响细胞状态
临收获的时候可以让它长到2*10E6

作者: 醉心科研 时间: 2015-12-1 15:39

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扯呢，以为是哺乳动物细胞规模化培养啊？- ^. t: F8 t$ z6 _8 h+ S$ s; b
CIK如果能到7次方，估计早就轰动了。, @$ \+ j: m9 R v2 M3 a, ?
如果WAVE能做到，再贵也买

作者: 醉心科研 时间: 2015-12-1 15:41

回复小刘的帖子* w. P- d. d. @7 z& L

你这个密度真是挺高的，想问问怎么计数的，血球计数板还是COUNTESS？

作者: 小刘 时间: 2015-12-2 10:53

必须是血球计数板

作者: 细胞海洋 时间: 2015-12-3 14:20

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# u3 X& C5 @# j/ T; Q7 U
看14楼

作者: 醉心科研 时间: 2015-12-3 15:33

回复细胞海洋的帖子2 h, E% M9 @9 R- x" V, I
- \* ~9 R- u5 V9 |( n/ f( B
嗯，看到了。
其实我想说，手工计数误差蛮大的，差个30-40%太正常了。不同公司之间比较有多大意义。- H3 r" ~4 g) V8 C; w5 W% x# Q* _
即使自动计数仪，同一个样本也有百分之几的误差。0 T, L8 O# ?9 U; q @, E% [
实现细胞制备的标准化也挺不容易的。

作者: guanjun1314 时间: 2015-12-10 10:17

有个体差异的，但一般都会在1.0*10的7次左右

作者: zmfang555 时间: 2016-2-26 12:13

普通悬浮培养的话CIK一般在1-3*106/ml,超过5*106细胞生长收到严重影响甚至死亡，最适密度一般是1*106，但现有有很多别的方法，如微载等密度能达到很高。

作者: 小猫狸狸 时间: 2016-2-26 15:47

太难了，细胞在1*10的六次方的时候培养基已经变黄了，只能稀释，临收获前密度可以大些

作者: saliai2016 时间: 2016-2-29 15:59

一般控制细胞密度在0.5~3*10^6/ml

作者: xiaoxiaodeji 时间: 2016-3-9 11:11

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$ w% p- n/ Q. {/ n$ s) p/ r2 x
刚开始培养不是调节细胞密度10^6么

作者: 星空雾雨 时间: 2016-3-9 14:33

回复小刘的帖子
) A; V& c# J; s
你好，你养的细胞最后能达到5*10的6次方，需要加血浆吗？还有加了哪些细胞因子？

作者: xqlu15@hotmail 时间: 2016-3-10 07:46

不光是加细胞因子的事情，还要尝试不同品牌的培养基

作者: xqlu15@hotmail 时间: 2016-3-10 07:54

不同品牌的培养基含的营养成分及酸碱缓冲能力不一样

作者: 免疫与细胞 时间: 2016-3-10 17:51

本帖最后由免疫与细胞于 2016-3-10 17:52 编辑 & Z, q: b o! s" t- e* c# Q

这个很难说，一般都是是根据显微镜观察和培养基颜色判定，没有明确的密度说明，如果追求最大密度，是不是每次换液都要做细胞计数，麻烦且在成本上减少不了多少，个人感觉意义不大。

作者: 我是传奇 时间: 2016-3-18 11:06

回复 luoan 的帖子; y! U; T" Y4 q- ~

密度啊，不是数量！

作者: 我是传奇 时间: 2016-3-18 11:08

前期一百万到2百万，最多是不可超过3百万，7-14天时调整到50万到100万，Life也有高密度培养的产品能5百万的密度，但是产品比较贵。

作者: xingyanchao 时间: 2016-3-18 17:24

10的九次方不可能，这估计是回输时的细胞数量，不是密度。达到这个密度，成本早降下来了。

作者: 994545 时间: 2016-3-20 20:36

用LONZA培养基在11天后一般能达到4*10^6/ml，如果控制好如液面高度（袋或瓶培养都一样，瓶或更好）及前期理想的增殖最后可以达到6*10^6/ml。会有近百亿的细胞，当然这是最好的几份。用的血细胞计数仪。

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