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标题: 从脂肪干细胞分化而来的脂肪细胞分泌IL-1 beta吗？ [打印本页]

作者: yunxinxu 时间: 2015-8-8 12:12 标题: 从脂肪干细胞分化而来的脂肪细胞分泌IL-1 beta吗？

最近老板让检测分化的脂肪细胞培养液里的IL-1beta,本人检测不到，老板大怒。本人查了几篇文章，有的说能检测到培养液里分泌有IL-1 beta,有的说分化脂肪细胞里连RNA 都不表达，但有的说表达，所以，请教有经验的给予解答，不胜感激！

作者: dahui 时间: 2015-8-9 18:52

如果确定方法没有问题，那没有表达就是没有表达了，把真是的试验结果拿给老板看，他不服那只能随他去了" D" S2 ~6 p% S F
所以楼主还是要先自查自己的试验设计有没有问题，或者你的检测方法是否正确。
首先你确定你现在检测的对象是分化好的脂肪细胞吗，有没有分化成功，如果分化成功的脂肪细胞，是不是需要其他的刺激才能分泌IL-1beta，你是如何培养的，和文献报道是否一致。另外你选择如何检测IL-1beta，因为现在主流的这几个ELISA kit生产商，或者ELISPOT也可以，国外的几家大公司的kit很灵敏，都在pg级的，另外，你是不是要用Western blot，或者直接检mRNA水平。

作者: yunxinxu 时间: 2015-8-10 10:44

谢谢你的分析。检测方法应该没有问题，因为检测时候有阴性对照和阳性对照。
分化的脂肪细胞很好，脂滴很大，几乎100%。Elisa Kit 应该也没问题，Standard 从0到800，标准曲线很好。 {3 a8 r% L! z
至于需不需要刺激，可能正是我想问的问题。/ k% F# [$ p/ F6 Q$ t& x2 L: l% ?4 {
我用Q-PCR 检测了分化不同天数的脂肪细胞，发现分化过程中，其表达先降低，后升高。至于为什么，我还在思考，哈哈！

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