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标题: 成骨诱导茜素红染色，请问这是矿化结节吗 [打印本页]

作者: 13675844901 时间: 2015-8-11 23:15 标题: 成骨诱导茜素红染色，请问这是矿化结节吗

本帖最后由 13675844901 于 2015-8-11 23:18 编辑

我这是成骨诱导21天的结果，从第7天就出现了钻石样的结晶样的东西，非常多，可是只有小部分被染色，那么这个钻石样的东西到底是不是矿化结节啊？谢谢指点啊！

作者: baby00000003 时间: 2015-8-12 07:46

稍微有点小，经验上出现了正八面体的那种小结晶就是快成功了9 d8 t- @% f l7 M2 n' P3 [5 d3 }
右下角的‘3小块’颜色比较像～

作者: ytumuyangren 时间: 2015-8-12 08:37

第三张图片右下角着色的以及中上部颜色较深的一大块都像是钙结节，只不过一大块着色不是很好。

作者: daiying5200000 时间: 2015-8-12 09:39

再培养个两三天就差不多了

作者: yinchong42 时间: 2015-8-12 21:25

是不是染色没染好啊，我一般是直接不管他，放上一两个小时，再慢慢洗干净

作者: 13675844901 时间: 2015-8-12 22:18

我是95%乙醇固定，PBS洗，PH8.3茜素红染30分钟，我下次多染一段时间试试。之间请教了一位前辈，说我这结晶样的东西可能是碳酸钙，而矿化结节是磷酸钙，我实在搞不明白，既然诱导组出现了这种结晶而对照组没有，为什么不是矿化产物呢？那又是怎么产生的？诱导用的50ug/ml抗坏血酸，10mmol/L的β磷酸钠，10*-8mol/L地塞米松。谢谢！2 k( {4 d) r. o6 z- F+ `

作者: 13675844901 时间: 2015-8-12 22:20

另外还有一点很困惑，碱性磷酸酶染色用的是南京建成的试剂盒，我是第3天、7天取得上清做的，诱导组和对照组没有什么差异。请教是时间点有问题吗？还是我没有诱导成功？谢谢啊

作者: yinchong42 时间: 2015-8-13 17:25

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碱性磷酸酶是成骨的前期指标，7天肯定是不行了，3天的话也不一定，请问你是怎样的处理，建议换个时间点，

作者: yinchong42 时间: 2015-8-13 17:25

本帖最后由 yinchong42 于 2015-8-13 17:25 编辑 - C7 e5 y+ w, V) ~& q

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还有就是我们的试剂盒是碧云天的

作者: 13675844901 时间: 2015-8-15 22:00

本帖最后由 13675844901 于 2015-8-15 22:03 编辑
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回复 yinchong42 的帖子

你好,那么你建议诱导后3天内做吗?我是取上清做的,虽然文献里做细胞裂解的比较多,但我试过,上清的ALP表达更多。可是我ALP没有做出差异。不知道你是怎么做的，求指教谢谢！碧云天的好用吗？

作者: yinchong42 时间: 2015-8-19 11:52

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上清的alp你测的是alp活性吧，那个我们用的好像也是碧云天的试剂盒，检测结果值很低，后来就不做了。我们是直接把细胞固定了拿去测的，就是和茜素红染色类似的那种，可以先两天三天各取一时间点做一下

作者: 13675844901 时间: 2015-8-19 21:28

回复 yinchong42 的帖子0 F) i7 T. B: l% ?4 ^
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对的，我是试剂盒检测ALP活性，检测值也很低，请问你的方法具体是怎么样的，把细胞固定去染色，那是不是就是只能定性？用的是什么试剂呀？

作者: yinchong42 时间: 2015-8-25 00:29

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就是碧云天的ALP染色试剂，用起来比定量的那个方便，染细胞染切片染wb都可以用它~而且很方便

作者: pooh_cat 时间: 2019-3-2 13:07

https://www.researchgate.net/post/How_do_I_prevent_the_formation_of_crystals_in_cell_culture7 A$ A1 F' x/ ]

我觉得你这个是草酸钙结晶

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